研究背景和研究目的當(dāng)前男性不育發(fā)病率逐年升高,中國(guó)人口協(xié)會(huì)2013年調(diào)查顯示夫妻不孕不育中,男性不育為主因的占35%。根據(jù)向桂橋等2005年統(tǒng)計(jì)資料,致不育的原因與兒童時(shí)期睪丸發(fā)育異常、睪丸損傷、免疫、內(nèi)分泌、感染等因素密切相關(guān),部分與遺傳有關(guān)。因此,探明兒童睪丸生殖功能損傷及修復(fù)的可能機(jī)制,可以為后續(xù)促進(jìn)生殖功能恢復(fù)的研究指明方向。眾所周知,睪丸組織主要由3大類(lèi)細(xì)胞組成:生精、間質(zhì)和支持細(xì)胞。生精細(xì)胞的主要功能為精子生發(fā),間質(zhì)細(xì)胞能生產(chǎn)雄激素,而支持細(xì)胞則具有多種重要作用,甚至被稱(chēng)為生精細(xì)胞的“保姆細(xì)胞”。因其最早由意大利Enricol Sertoli于1865年發(fā)現(xiàn),Sertoli細(xì)胞由此得名。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn),睪丸支持細(xì)胞除對(duì)生殖細(xì)胞有支持和營(yíng)養(yǎng)作用,同時(shí)還具有構(gòu)成血睪屏障,參與自身免疫豁免（免疫相關(guān)）,形成睪丸內(nèi)環(huán)境,產(chǎn)生類(lèi)固醇類(lèi)物質(zhì)（內(nèi)分泌相關(guān)）,吞噬細(xì)胞殘?bào)w等重要功能;此外,支持細(xì)胞上的雄激素受體（androgen receptor AR）也被認(rèn)為與男性不育癥密切相關(guān),AR基因先天突變即可引發(fā)。鑒于睪丸支持細(xì)胞的重要性,以及希望實(shí)驗(yàn)研究的集中性,我們選取了睪丸支持細(xì)胞作為本次... 

【文章來(lái)源】：山東大學(xué)山東省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：105 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【部分圖文】：

圖１?ＴＭ４細(xì)胞系光鏡下形態(tài)??

微鏡進(jìn)行觀(guān)察（Ｚｅｉｓｓ?８００）。??結(jié)果：??根據(jù)圖２，分別測(cè)定ＣＩＰ２Ａ蛋白和其ＤＮＡ，顯影良好。將兩圖ｍｅｒｇｅ后可見(jiàn)在ＴＭ４??細(xì)胞中，ＣＩＰ２Ａ基因位于細(xì)胞核內(nèi)，但其合成的ＣＩＰ２Ａ蛋白主要分布于細(xì)胞胞漿??中。??圖２免疫熒光ＣＩＰ２Ａ在ＴＭ４細(xì)胞中定位與分布??２．２正常小鼠ＴＭ４細(xì)胞中ＦａｓＬ蛋白的定位與分布??材料和儀器??實(shí)驗(yàn)材料??ＤＭＥＭ／Ｆ１２培養(yǎng)基?美國(guó)Ｇｉｂｃｏ公司??青鏈霉素?美國(guó)Ｇｉｂｃｏ公司??胎牛血清?美國(guó)Ｇｉｂｃｏ公司??馬血清?美國(guó)Ｇｉｂｃｏ公司??ＤＭＳＯ?美國(guó)Ｇｉｂｃｏ公司??０．２５％的胰酶消化液?美國(guó)Ｇｉｂｃｏ

??結(jié)果：據(jù)圖３，在正常ＴＭ４細(xì)胞中，ＦａｓＬ基因及其蛋白顯影強(qiáng)度一般，Ｍｅｒｇｅ后??可見(jiàn)兩者幾乎完全重疊，提示ＦａｓＬ基因及其蛋白主要分布于細(xì)胞核中。??■Ｍｌ??圖３免疫熒光ＦａｓＬ在ＴＭ４細(xì)胞中定位與分布??１２??


本文編號(hào)：2971996