流感病毒可引起急性呼吸道傳染病并且該病毒每年都有不同規(guī)模的小流行,若干年一次全球范圍的大流行,給人類健康和經(jīng)濟(jì)的發(fā)展帶來負(fù)面影響。作為流感病毒表面包膜主要的兩種糖蛋白血凝素（hemagglutinin,HA）和神經(jīng)氨酸酶（neuraminidase,NA）,不但與病毒的致病性有關(guān),同時(shí)HA和NA還要承受著外界環(huán)境的選擇壓力,在這些選擇壓力之下往往會(huì)引起HA和NA的變異,也會(huì)增加產(chǎn)生新型病毒的可能性。本研究共分為兩個(gè)方面對(duì)流感病毒不同亞型的共同感染及流感病毒的進(jìn)化進(jìn)行描述。希望借此為闡明流感病毒流行規(guī)律提供新的依據(jù)。第一部分目的:了解一例新甲型H1N1和季節(jié)性H3N2亞型流感混合感染病例中季節(jié)性H3N2亞型流感病毒和新甲型H1N1亞型流感病毒的HA和NA基因的變異情況。方法:鼻咽拭子的核酸樣本和細(xì)胞培養(yǎng)物100倍稀釋的核酸樣本經(jīng)實(shí)時(shí)熒光PCR方法鑒定流感病毒亞型。病毒經(jīng)MDCK細(xì)胞培養(yǎng)后進(jìn)行紅細(xì)胞凝集試驗(yàn)（HA）和紅細(xì)胞凝集抑制試驗(yàn)（HI）。分離病毒毒株,提取核酸經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）方法擴(kuò)增HA和NA基因,獲得測(cè)序結(jié)果與WHO推薦的疫苗株和疫苗相似毒株同源比對(duì),使用生物信... 

【文章來源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
一、流感不同亞型混合感染的檢測(cè)及HA和NA片段分析
    1.1 對(duì)象和方法
        1.1.1 資料來源
        1.1.2 方法
    1.2 結(jié)果
        1.2.1 鼻咽拭子實(shí)時(shí)熒光PCR檢測(cè)結(jié)果
        1.2.2 細(xì)胞培養(yǎng)檢測(cè)結(jié)果
        1.2.3 季節(jié)性H3N2亞型流感病毒進(jìn)化樹分析
        1.2.4 氨基酸序列同源性分析
    1.3 討論
    1.4 小結(jié)
二、甲型N9亞型流感病毒神經(jīng)氨酸酶基因進(jìn)化分析
    2.1 對(duì)象和方法
        2.1.1 資料來源
        2.1.2 方法
    2.2 結(jié)果
        2.2.1 NA進(jìn)化構(gòu)建結(jié)果
        2.2.2 NA進(jìn)化速率結(jié)果
        2.2.3 進(jìn)化選擇壓力和氨基酸置換熵值結(jié)果
    2.3 討論
    2.4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說明
附錄
綜述 流感病毒NA結(jié)構(gòu)功能與耐藥性研究
    綜述參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：2958097