發(fā)布時(shí)間：2017-04-09 08:18

  本文關(guān)鍵詞：人堿性成纖維生長(zhǎng)因子對(duì)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞增殖能力及多向分化潛能的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的: 觀察堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子(bFGF)對(duì)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(hUC-MSCs)體外培養(yǎng)增殖能力及多向分化潛能的影響 方法: 貼壁培養(yǎng)法培養(yǎng)hUC-MSCs后，應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)分析其表面相對(duì)特異性標(biāo)志物(CD90, CD105，CD73等)，初步證實(shí)其為間充質(zhì)干細(xì)胞；培養(yǎng)并誘導(dǎo)P2代hUC-MSCs向成脂、成軟骨及成骨的方向分化，以進(jìn)一步鑒定其為間充質(zhì)干細(xì)胞，且具有多向分化潛能。確定bFGF促增殖作用：分為實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組，實(shí)驗(yàn)組添加bFGF于DMED/F12培養(yǎng)液中，對(duì)照組使用DMED/F12常規(guī)培養(yǎng)液；同時(shí)對(duì)照觀察加入不同濃度的bFGF對(duì)hUC-MSCs增殖的影響；MTT法測(cè)定hUC-MSCs的增殖能力，，確定bFGF促增殖作用最適濃度為30μg/L。 結(jié)果: 培養(yǎng)的細(xì)胞通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)CD90、CD105、CD73和CD166為陽(yáng)性表達(dá)，而不表達(dá)CD34、CD45和HLA-DR，說(shuō)明具有間充質(zhì)干細(xì)胞的表型特征。油紅O染色和茜素紅染色均呈陽(yáng)性，說(shuō)明具有向成脂、成骨方向分化能力。MTT法分析生長(zhǎng)曲線提示bFGF具有顯著促進(jìn)hUC-MSCs的增殖作用（其最適濃度為30μg/L）。繪制hUC-MSCs生長(zhǎng)曲線可見(jiàn)誘導(dǎo)后的hUC-MSCs連續(xù)培養(yǎng)7天可見(jiàn)細(xì)胞增殖趨勢(shì)，接種后從第二天起實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞增殖活躍，第3天達(dá)到增殖高峰，第4-5天各組細(xì)胞增殖處于平臺(tái)期。 結(jié)論: hUC-MSCs具有良好的多向分化潛能，bFGF可促進(jìn)hUC-MSCs增殖并增強(qiáng)hUC-MSCs的多向分化潛能，為后續(xù)大宗實(shí)驗(yàn)奠定了基礎(chǔ)和提供充足優(yōu)良的hUC-MSCs。
【關(guān)鍵詞】：堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子 人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞 細(xì)胞增殖 多向分化
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R329.2
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-9
• 中英文縮略詞表9-10
• 第1章 綜述10-17
• 第2章 正文17-26
• 2.1 材料和方法17-19
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料17
• 2.1.2 主要儀器17-18
• 2.1.3 主要試劑18-19
• 2.1.4 主要培養(yǎng)基及試劑19
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法19-26
• 2.2.1 原代 hUCMSCs 的分離和培養(yǎng)19-20
• 2.2.2 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè) hUC-MSCs 表面標(biāo)記20-21
• 2.2.3 成脂肪細(xì)胞誘導(dǎo)21
• 2.2.4 hUC-MSCs 成骨細(xì)胞誘導(dǎo)21-22
• 2.2.5 bFGF 對(duì) hUC-MSCs 增殖能力的影響22
• 2.2.6 平板克隆實(shí)驗(yàn)檢測(cè) bFGF 對(duì) hUC-MSCs 克隆形成能力22-23
• 2.2.7 bFGF 對(duì) hUCMSCs 衰老的影響23-24
• 2.2.8 bFGF 對(duì) hUC-MSCs 多向分化潛能的影響24
• 2.2.9 MTT 比色法分析 2 組 hUC-MSCs 的存活和增殖能力24-26
• 第3章 結(jié)果26-32
• 第4章 討論32-36
• 第5章 結(jié)論36-37
• 參考文獻(xiàn)37-44
• 導(dǎo)師、作者簡(jiǎn)介及在學(xué)期間所取得的科研成果44-47
• 致謝47

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

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  本文關(guān)鍵詞：人堿性成纖維生長(zhǎng)因子對(duì)人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞增殖能力及多向分化潛能的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：294850