發(fā)布時間：2020-12-24 07:27

　　目的探討不同Wnt蛋白對小鼠胚胎肝祖細胞HP14-19分化的作用,篩選有效的肝干細胞定向分化體系,為治療肝衰竭提供理論基礎。方法攜帶不同Wnt蛋白基因的19種重組腺病毒,分別感染HP14-19,檢測清蛋白啟動子啟動的熒光素酶報告基因活性;實時熒光定量PCR檢測detla蛋白DLK、甲胎蛋白（AFP）、清蛋白（ALB）、上皮特異性標志物細胞角蛋白（CK18）等肝細胞分化成熟相關標志物的表達情況;糖原（PAS）染色實驗和吲哚菁綠（ICG）攝取實驗用于檢測肝細胞合成代謝功能。結果 19種Wnt腺病毒均能有效感染HP14-19細胞并表達相應的Wnt信號蛋白,隨著處理時間的延長,熒光素酶值逐漸升高,其中Wnt3a的作用最明顯;Ad-Wnt3a組肝干細胞標志DLK、AFP表達明顯下降;肝細胞特異性成熟標志ALB、CK18明顯上調(diào);Ad-Wnt3a處理后PAS染色可見70%～80%的細胞染色陽性,細胞由多角形變?yōu)殚L梭形;ICG攝取實驗可見大量綠色圓形或者多邊形陽性細胞。結論 Wnt3a蛋白是誘導HP14-19細胞成熟分化的重要蛋白,誘導分化后的細胞類似于成熟肝細胞,有較強的合成代謝功能;對進一步研究... 

【文章來源】：國際檢驗醫(yī)學雜志. 2020年17期

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

不同重組腺病毒對HP14-19細胞的感染情況（200×）

HP14-19轉染后第4、6、9天的ALB-GLuc活性

實時熒光定量PCR結果顯示，Ad-Wnt3a組肝干細胞標志DLK、AFP表達明顯下降；肝細胞特異性成熟標志ALB、CK18明顯上調(diào)（圖3），差異有統(tǒng)計學意義（P<0.05）。圖4 Ad-Wnt3a處理后HP14-19細胞PAS染色情況（100×）

【參考文獻】：
期刊論文
[1]Wnt3a:functions and implications in cancer[J]. Sha He,Yi Lu,Xia Liu,Xin Huang,Evan T.Keller,Chao-Nan Qian,Jian Zhang.  Chinese Journal of Cancer. 2015(12)
[2]Wnt/β-catenin信號通路在肝細胞癌中的促進作用[J]. 謝亮海,蔣晗,吳福生.  南方醫(yī)科大學學報. 2014(06)



本文編號：2935244