目的探討硫化氫（H2S）對PC12細(xì)胞PI3K/Akt信號通路的影響及該通路在H2S神經(jīng)保護(hù)中的作用。方法Western blot法檢測H2S供體硫氫化鈉（NaHS）處理PC12細(xì)胞誘導(dǎo)Akt磷酸化的水平;CCK-8比色法檢測細(xì)胞存活率;應(yīng)用碘化丙啶（PI）染色流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡率。結(jié)果應(yīng)用不同濃度NaHS處理PC12細(xì)胞30 min,在50～400μmol.L-1濃度范圍內(nèi),呈濃度依賴性地上調(diào)Akt磷酸化的水平,但隨著NaHS濃度的增加,磷酸化Akt表達(dá)量逐漸下降;Ly294002明顯抑制了NaHS對Akt磷酸化水平的上調(diào)作用。NaHS預(yù)處理可以保護(hù)PC12細(xì)胞對抗600μmol.L-1CoCl2誘導(dǎo)的損傷,使細(xì)胞存活率提高及細(xì)胞凋亡率降低。而在預(yù)處理前使用PI3K/Akt信號通路抑制劑Ly294002,則明顯地減弱了H2S的神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)作用。結(jié)論 H2S可通過激活PI3K/Akt信號通路保護(hù)PC12細(xì)胞對抗化學(xué)性缺氧損傷。 

【文章來源】：中國藥理學(xué)通報(bào). 2013年02期 北大核心

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 材料
    1.2 細(xì)胞培養(yǎng)
    1.3 實(shí)驗(yàn)分組
        1.3.1 探討Na HS干預(yù)PC12細(xì)胞對Akt磷酸化 （P-Akt） 水平的影響
        1.3.2 探討PI3K/Akt通路抑制劑Ly294002對H2S神經(jīng)細(xì)胞保護(hù)作用的影響
    1.4 細(xì)胞存活率的檢測
    1.5 PI染色流式細(xì)胞儀 （FCM） 檢測細(xì)胞凋亡
    1.6 Western blot法檢測p-Akt的水平
    1.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 Na HS對PC12細(xì)胞p-Akt水平的影響
    2.2 PI3K介導(dǎo)了Na HS預(yù)處理誘導(dǎo)的Akt活化
    2.3 PI3K/Akt信號通路介導(dǎo)H2S抗Co Cl2誘導(dǎo)的細(xì)胞毒性作用
    2.4 PI3K/Akt信號通路介導(dǎo)H2S抑制Co Cl2誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡作用
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]PI3K/Akt信號通路在外源性硫化氫后處理大鼠離體心肌中的作用[J]. 于水,楊�？�,米琰,季永,曾因明.  中國藥理學(xué)通報(bào). 2010(06)
[2]熱休克蛋白90在硫化氫保護(hù)PC12細(xì)胞對抗化學(xué)性缺氧損傷中的作用[J]. 孟金蘭,蘭愛平,楊春濤,楊戰(zhàn)利,王立偉,陳麗新,朱琳燕,陳培熹,馮鑒強(qiáng).  中國藥理學(xué)通報(bào). 2010(01)
[3]新生鼠缺氧缺血性腦損傷時(shí)三磷酸肌醇激酶信號通路與缺氧誘導(dǎo)因子1α的調(diào)節(jié)[J]. 李麗華,屈藝,毛萌,母得志.  中國修復(fù)重建外科雜志. 2008(09)



本文編號：2932243