目的通過鹽酸洛哌丁胺誘導(dǎo)慢傳輸型便秘小鼠模型,比較不同劑量、不同給藥時間所誘導(dǎo)模型之間的差異,探索建立穩(wěn)定的鹽酸洛哌丁胺誘導(dǎo)的慢傳輸便秘小鼠模型各項實驗參數(shù)。方法采用健康雄性C57BL/6小鼠,配制0. 025、0. 25和2. 5 mg/m L的鹽酸洛哌丁胺混懸液灌胃,給藥時間為每日上午9時和下午3時,分兩次給藥。從腸道推進率檢測、排便量檢測等指標(biāo)進行造模效果評價,觀察不同劑量、不同給藥時間對于慢傳輸型便秘小鼠模型的影響。結(jié)果 1)對比不同劑量的鹽酸洛哌丁胺造模的效果,在0. 5 mg/kg～50 mg/kg的給藥濃度范圍內(nèi),通過比較組間腸道推進率,結(jié)果表明50 mg/kg組與空白組相比,小鼠腸道推進率顯著降低、排便量明顯減少,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0. 05);(2)對比3、7、10和14 d四個不同造模天數(shù),造模第7天時,小鼠的腸道推進率與空白組相比明顯降低(P<0. 05);而3、10、14 d腸道推進率相比無明顯變化(P> 0. 05)。結(jié)論本次研究發(fā)現(xiàn)采用50 mg/kg的劑量連續(xù)灌胃7 d,可使小鼠的腸道推進率顯著降低,排便量明顯減少,能夠制造相對穩(wěn)定... 

【文章來源】：中國實驗動物學(xué)報. 2020年03期 北大核心

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

鹽酸洛哌丁胺不同造模時間對小鼠腸道推進率影響

本文通過鹽酸洛哌丁胺誘導(dǎo)小鼠慢傳輸型便秘模型，觀察不同劑量、不同給藥時間對于小鼠便秘模型的影響。鹽酸洛哌丁胺是一種外周性阿片受體激動劑，已廣泛用于建立便秘動物模型[13-17]。主要通過作用于腸道縱行肌層的肌間神經(jīng)叢來降低腸道的推動作用[18-19]，或者通過刺激吸收和鈣調(diào)素拮抗介導(dǎo)的抗分泌作用來調(diào)節(jié)水和電解質(zhì)的腸道運輸[20-22]，也可在肌間神經(jīng)叢水平作用于阿片受體，從而降低腸蠕動[23]。鹽酸洛哌丁胺減少了便秘動物的攝水量，減少糞粒含水量，但不會影響動物的攝食，符合人類便秘的臨床表現(xiàn)[18,24]。其藥理學(xué)機制提示，在腸道中它具有通過阿片受體和非阿片受體機制介導(dǎo)的抗分泌作用和影響腸動力的作用。在較高劑量下，通過腸肌間神經(jīng)叢中的阿片受體介導(dǎo)而降低腸動力。說明可能存在兩種機制:低劑量可發(fā)揮抗分泌作用，高劑量可發(fā)揮影響腸動力的作用[19]�？傊}酸洛哌丁胺復(fù)雜的劑量差異性藥理學(xué)機制，提示小鼠便秘模型的建立，更加需要注意給藥劑量和時間。因此確定鹽酸洛哌丁胺的最有效造模劑量，誘導(dǎo)建立穩(wěn)定、可以重復(fù)的慢傳輸型便秘模型，已成為實驗研究體系不可缺少的一部分。便秘模型建立中，鹽酸洛哌丁胺給藥的劑量不盡相同，文獻報道藥物劑量范圍從2.1 mg～20 mg/kg不等[20-22,25]。如采用4 mg/kg連續(xù)給藥3d，停藥3 d后，繼續(xù)不同濃度4 mg/kg和8 mg/kg連續(xù)給藥4 d，建立了穩(wěn)定的便秘模型，并發(fā)現(xiàn)模型動物組織PKC磷酸化表達存在差異[20];如果造模采用9.38 mg/kg給藥，并且首次給藥劑量翻倍，連續(xù)給藥10 d，模型小鼠出現(xiàn)結(jié)腸粘膜層變薄，遠端結(jié)腸杯狀細胞體積變小等細胞形態(tài)變化[26-27]。本研究對比同樣的給藥模式不同劑量的鹽酸洛哌丁胺造模的效果，在0.5～50 mg/kg的劑量濃度范圍內(nèi)，選擇0.5 mg/kg、5.0 mg/kg、50 mg/kg三個不同的給藥濃度，檢測給藥后腸道推進率、排便量及糞便含水率三個指標(biāo)，觀察不同濃度的鹽酸洛哌丁胺對于腸道推進率的影響。研究發(fā)現(xiàn):在0.5～50 mg/kg的給藥濃度范圍內(nèi)，通過比較組間腸道推進率，50 mg/kg組與空白組相比，小鼠腸道推進率顯著降低、排便量明顯減少，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。本次研究中糞便的含水率與正常組相比，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。由于小鼠有隨時排便的習(xí)性，糞便含水量易受多種因素影響[28]。同時觀察不同濃度給藥后小鼠狀態(tài)和耐受性，造模過程中過程中并未發(fā)現(xiàn)小鼠出現(xiàn)體重下降、精神不濟甚至死亡的現(xiàn)象。本次研究認為50 mg/kg的劑量是能夠造模成功的最大穩(wěn)定劑量。

如圖3所示，觀察收集小鼠的糞便稱重，監(jiān)測小鼠每天的排便量變化，各模型組小鼠隨著給藥天數(shù)的不斷增加，排便量呈現(xiàn)先減少而后再增加的趨勢。造模3、7、10、14 d后，小鼠排便量與空白組相比，差異均具有顯著性(P<0.05)。圖2 鹽酸洛哌丁胺不同造模時間對小鼠腸道推進率影響


本文編號：2931079