目的探討青蒿琥酯（ART）和重組白細胞介素-33（r IL-33）聯合治療伯氏瘧原蟲ANKA(PbA感染小鼠腦型瘧的效果及其對免疫相關指標的影響。方法 40只雌性C57BL/6小鼠隨機分為5組:PbA感染未治療組（Pb A組）,PbA感染治療組（Pb A+rIL-33組、 PbA+ART組、 PbA+rIL-33+ART組）和健康對照組,每組8只。PbA組及各治療組小鼠經腹膜內注射1×10⁶個Pb A感染的紅細胞;感染后第2～4天,PbA+rIL-33組小鼠經腹膜內注射r IL-33（0.2μg/鼠,連續(xù)3 d）, PbA+ART組灌胃ART [40 mg/（kg·d）,連續(xù)3 d], PbA+rIL-33+ART組灌胃ART [40 mg/（kg·d）]并經腹膜內注射rIL-33（0.2μg/鼠,連續(xù)3 d）; Pb A組不作處理;健康對照組在相同時間點注射等體積的PBS。感染后第3天起每隔1天采尾靜脈血制作血涂片,吉氏染色后計數感染紅細胞并計算感染率,記錄小鼠死亡情況和生存期。感染后第5天各組取1只小鼠,尾靜脈注射伊文思藍溶液,根據腦組織上清液的吸光度（A63... 

【文章來源】：中國寄生蟲學與寄生蟲病雜志. 2020年02期 北大核心

【文章頁數】：7 頁

【部分圖文】：

伯氏瘧原蟲ANKA感染小鼠經rIL-33和/或ART治療后的小鼠生存率（A）與紅細胞感染率（B)

伯氏瘧原蟲ANKA感染小鼠經rIL-33和/或ART治療后的小鼠腦組織伊文思藍滲出情況

ART治療對氯喹和磺胺多辛-乙胺嘧啶耐藥的惡性瘧非常有效，能比其他抗瘧藥物更快地清除瘧原蟲，降低蟲負荷[14]。本研究采用ART來降低腦型瘧發(fā)生時的原蟲血癥，rIL-33高表達來平衡Th1/Th2免疫應答，進而降低前炎癥反應，減少腦瘧神經系統(tǒng)的病理性損傷。實驗結果顯示，Pb A+rIL-33+ART組小鼠的神經系統(tǒng)癥狀發(fā)生明顯被抑制，生存期顯著延長，優(yōu)于任意單獨治療組。腦型瘧的特征在于過度的炎癥反應導致趨化因子和受體的上調以及炎性細胞因子和黏附分子的聚集，導致腦微血管內皮細胞分解和感染紅細胞螯合作用。因此，在ART降低感染率和rIL-33抑制Th1型免疫應答共同作用下，rIL-33聯合ART治療保護小鼠血腦屏障完整性的效果優(yōu)于任意單獨治療組。在重癥瘧疾中，Th1細胞的隔離和活化影響腦型瘧的惡化程度[15]。研究表明，Th1型細胞因子IFN-γ的參與可導致腦型瘧的嚴重惡化[16]。本研究中，rIL-33聯合ART治療明顯促進脾組織中Th2細胞增殖，抑制Th1細胞增殖，從而抑制腦型瘧發(fā)生。研究表明，IL-33促進Th2型淋巴細胞的擴增和細胞因子（IL-4、IL-5和IL-13）的表達，使抗炎性M2巨噬細胞極化，導致Treg作用增強，進而協調保護性免疫應答來阻止腦型瘧發(fā)展[5]。同時，在惡性瘧原蟲感染期間，Treg增殖可以抑制Th1增殖，進而抑制炎癥反應[17]。本研究數據顯示，rIL-33聯合ART治療誘導Treg增殖，同時顯著刺激巨噬細胞擴增，這可能與其M2細胞大量增殖有關，有利于減少腦型瘧小鼠神經系統(tǒng)的炎癥性損傷。動物實驗表明，如果大量細菌和細胞因子進入血液循環(huán)，會刺激TLR4和其他TLRs產生前炎癥細胞因子[18]。外周循環(huán)產生的炎癥因子會增加血腦屏障的通透性，因此這些炎癥因子可能直接影響大腦導致神經系統(tǒng)功能障礙[19]。研究表明，瘧原蟲刺激TLR4途徑會觸發(fā)先天免疫系統(tǒng)，導致局部產生TNF-α，加劇炎癥反應[20]。因此，在感染期間，TLR4激活是炎癥感染的主要途徑。然而本研究中，腦型瘧小鼠在rIL-33聯合ART治療后，脾組織中TLR4表達顯著降低，表明炎癥反應受到抑制，這可能與其保護大腦神經系統(tǒng)相關。瘧原蟲感染導致TLRs受體的反應性增加可能是腦型瘧發(fā)生的重要機制之一[21]。研究表明，IL-33/ST2信號通路參與了TLR信號的下調[22]。TLR信號通路的激活可使巨噬細胞極化向M1表型轉移[23]。但其調控機制仍不清楚。因此，今后的工作著眼于IL-33ST2信號通路，探究其與TLR信號通路的關系。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]瘧疾發(fā)病中樹突狀細胞/調節(jié)性T細胞/Th17細胞的功能變化及其交叉調控機制[J]. 陳光,劉蕾.  中國寄生蟲學與寄生蟲病雜志. 2014(04)
[2]腦型瘧發(fā)生的免疫病理機制[J]. 劉太平,付雍,徐文岳.  中國寄生蟲學與寄生蟲病雜志. 2011(01)
[3]BALB/c小鼠感染不同瘧原蟲CD4+ Th應答和凋亡特點的比較研究[J]. 鄭麗,孫曉丹,潘艷艷,馮輝,陳光,周泓旭,曹雅明.  微生物學雜志. 2011(01)
[4]重癥惡性腦型瘧疾的細胞粘附機制[J]. 沈娟,田野蘋,宋關鴻.  中國寄生蟲學與寄生蟲病雜志. 2003(01)



本文編號：2922627