目的:探討斑馬魚體內(nèi)髓樣特異性過氧化物酶（mpx）在胚胎發(fā)育過程中的表達模式。方法:按Trizol法提取斑馬魚總RNA后逆轉錄成c DNA,再以c DNA為模板RT-PCR擴增mpx基因片段;用基因重組技術構建p CS2⁺-mpx重組質(zhì)粒后將質(zhì)粒酶切線性化,T3聚合酶制備mpx反義RNA探針,用全胚胎原位雜交檢測mpx基因的表達。結果:成功構建了p CS2⁺-mpx重組質(zhì)粒,原位雜交結果顯示在24 hpf,mpx基因在斑馬魚胚胎中間細胞團表達;從24 hpf開始,mpx基因在斑馬魚胚胎卵黃囊表面、心臟和軸向脈管系統(tǒng)中高表達,一直持續(xù)到72 hpf;尤其是在72 hpf,mpx基因在整個胚胎頭部、卵黃囊表面、尾部中彌散表達。結論:mpx基因在斑馬魚心血管系統(tǒng)發(fā)育的時間和部位中都有表達,mpx基因可能參與調(diào)控斑馬魚心血管系統(tǒng)發(fā)育。 

【文章來源】：貴州醫(yī)科大學學報. 2020年05期

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

pCS2+-mpx重組質(zhì)粒HindⅢ、XhoⅠ雙酶切產(chǎn)物的瓊脂糖凝膠電泳結果

pCS2+-mpx重組質(zhì)粒菌落RT-PCR產(chǎn)物的瓊脂糖凝膠電泳結果

結果顯示在18 hpf前的斑馬魚胚胎中無明顯陽性信號表達，在24 hpf，斑馬魚胚胎中間細胞團有較弱的藍紫色陽性信號表達;從24 hpf開始一直持續(xù)到72 hpf，在斑馬魚胚胎卵黃囊表面、心臟和軸向脈管系統(tǒng)中出現(xiàn)較強的的藍紫色陽性信號表達;尤其是在72 hpf，在整個胚胎頭部、卵黃囊表面、尾部中均有彌散的藍紫色陽性信號表達(圖5)。說明mpx基因在斑馬魚胚胎18 hpf以后開始表達，并且主要在心血管系統(tǒng)中高表達。圖5 mpx基因的斑馬魚全胚胎原位雜交結果(40×)


本文編號：2918342