發(fā)布時間：2020-12-12 10:18

　　背景:誘導(dǎo)多能性干細(xì)胞是一種新型的干細(xì)胞來源,具有多向分化潛能。豬作為人類心血管及代謝性疾病研究的良好模型,對其多能性細(xì)胞向血管內(nèi)皮細(xì)胞定向分化體系的建立,將為創(chuàng)建心血管疾病模型提供保障。目的:建立一種無血清單層誘導(dǎo)分化方法,使豬誘導(dǎo)多能性干細(xì)胞定向分化為CD31陽性血管內(nèi)皮細(xì)胞,并對獲得的內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行鑒定。方法:使用CHIR99021、骨形態(tài)發(fā)生蛋白4、堿性成纖維生長因子、血管內(nèi)皮生長因子等對豬誘導(dǎo)多能性干細(xì)胞和人胚胎干細(xì)胞進(jìn)行單層細(xì)胞誘導(dǎo)分化,使干細(xì)胞經(jīng)歷3個分化階段最終成為血管內(nèi)皮細(xì)胞,檢測并比較分化過程中2種干細(xì)胞的胚層標(biāo)記基因的表達(dá),對流式分選后獲得的血管內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行鑒定。結(jié)果與結(jié)論:①通過無血清單層細(xì)胞誘導(dǎo)法從豬誘導(dǎo)多能性干細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化獲得的內(nèi)皮細(xì)胞具有與豬永生化主動脈血管內(nèi)皮細(xì)胞類似的基因表達(dá)模式及生物學(xué)功能——能夠吸收低密度脂蛋白并在Matrigel上形成微血管樣結(jié)構(gòu);②該誘導(dǎo)體系下,豬誘導(dǎo)多能性干細(xì)胞的分化效率高于人胚胎干細(xì)胞的分化效率,這可能與誘導(dǎo)過程中2種細(xì)胞譜系基因表達(dá)模式上的差異相關(guān)。 

【文章來源】：中國組織工程研究. 2020年31期 第4971-4978頁 北大核心

【文章頁數(shù)】：8 頁

【部分圖文】：

豬誘導(dǎo)多能性干細(xì)胞(A)和人胚胎干細(xì)胞(B)定向誘導(dǎo)后內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)記基因的表達(dá)

流式細(xì)胞術(shù)檢測豬誘導(dǎo)多能性干細(xì)胞(A)和人胚胎干細(xì)胞(B)定向誘導(dǎo)分化后的CD31陽性細(xì)胞比率(圖中展示的是代表性結(jié)果)

圖3 流式細(xì)胞術(shù)檢測豬誘導(dǎo)多能性干細(xì)胞(A)和人胚胎干細(xì)胞(B)定向誘導(dǎo)分化后的CD31陽性細(xì)胞比率(圖中展示的是代表性結(jié)果)圖5 豬誘導(dǎo)多能性干細(xì)胞來源內(nèi)皮細(xì)胞和人胚胎干細(xì)胞來源內(nèi)皮細(xì)胞的功能學(xué)檢測(標(biāo)尺為50μm)


本文編號：2912366