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無血清單層細(xì)胞誘導(dǎo)法培養(yǎng)豬誘導(dǎo)多能性干細(xì)胞定向分化為血管內(nèi)皮細(xì)胞

發(fā)布時(shí)間:2020-12-12 10:18
  背景:誘導(dǎo)多能性干細(xì)胞是一種新型的干細(xì)胞來源,具有多向分化潛能。豬作為人類心血管及代謝性疾病研究的良好模型,對(duì)其多能性細(xì)胞向血管內(nèi)皮細(xì)胞定向分化體系的建立,將為創(chuàng)建心血管疾病模型提供保障。目的:建立一種無血清單層誘導(dǎo)分化方法,使豬誘導(dǎo)多能性干細(xì)胞定向分化為CD31陽性血管內(nèi)皮細(xì)胞,并對(duì)獲得的內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行鑒定。方法:使用CHIR99021、骨形態(tài)發(fā)生蛋白4、堿性成纖維生長(zhǎng)因子、血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子等對(duì)豬誘導(dǎo)多能性干細(xì)胞和人胚胎干細(xì)胞進(jìn)行單層細(xì)胞誘導(dǎo)分化,使干細(xì)胞經(jīng)歷3個(gè)分化階段最終成為血管內(nèi)皮細(xì)胞,檢測(cè)并比較分化過程中2種干細(xì)胞的胚層標(biāo)記基因的表達(dá),對(duì)流式分選后獲得的血管內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行鑒定。結(jié)果與結(jié)論:①通過無血清單層細(xì)胞誘導(dǎo)法從豬誘導(dǎo)多能性干細(xì)胞定向誘導(dǎo)分化獲得的內(nèi)皮細(xì)胞具有與豬永生化主動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞類似的基因表達(dá)模式及生物學(xué)功能——能夠吸收低密度脂蛋白并在Matrigel上形成微血管樣結(jié)構(gòu);②該誘導(dǎo)體系下,豬誘導(dǎo)多能性干細(xì)胞的分化效率高于人胚胎干細(xì)胞的分化效率,這可能與誘導(dǎo)過程中2種細(xì)胞譜系基因表達(dá)模式上的差異相關(guān)。 

【文章來源】:中國(guó)組織工程研究. 2020年31期 第4971-4978頁 北大核心

【文章頁數(shù)】:8 頁

【部分圖文】:

無血清單層細(xì)胞誘導(dǎo)法培養(yǎng)豬誘導(dǎo)多能性干細(xì)胞定向分化為血管內(nèi)皮細(xì)胞


豬誘導(dǎo)多能性干細(xì)胞(A)和人胚胎干細(xì)胞(B)定向誘導(dǎo)后內(nèi)皮細(xì)胞標(biāo)記基因的表達(dá)

胚胎干細(xì)胞,干細(xì)胞,標(biāo)記基因,誘導(dǎo)分化


流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)豬誘導(dǎo)多能性干細(xì)胞(A)和人胚胎干細(xì)胞(B)定向誘導(dǎo)分化后的CD31陽性細(xì)胞比率(圖中展示的是代表性結(jié)果)

標(biāo)尺,血管內(nèi)皮,標(biāo)記基因,細(xì)胞


圖3 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)豬誘導(dǎo)多能性干細(xì)胞(A)和人胚胎干細(xì)胞(B)定向誘導(dǎo)分化后的CD31陽性細(xì)胞比率(圖中展示的是代表性結(jié)果)圖5 豬誘導(dǎo)多能性干細(xì)胞來源內(nèi)皮細(xì)胞和人胚胎干細(xì)胞來源內(nèi)皮細(xì)胞的功能學(xué)檢測(cè)(標(biāo)尺為50μm)


本文編號(hào):2912366

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