本文主要研究重組人感染高致病性禽流感H7N9株作為主工作種子批在Vero細胞連續(xù)傳代中的高產(chǎn)特性和傳代穩(wěn)定性,為疫苗開發(fā)提供前期研究。將重組獲得的H7N9流感病毒Vero細胞適應株(A/Anhui/1/2013Va)按照病毒感染復數(shù)(MOI) 0. 01的病毒量接種于Vero細胞,并連續(xù)傳15代。血凝試驗檢測每代病毒血凝效價,并繪制病毒在Vero細胞上的生長曲線;每代病毒用MDCK細胞檢測病毒的感染性滴度;通過單向免疫擴散試驗對重組病毒H7N9的第1及第16代進行型別鑒定;取第1、5及16代病毒,用雞胚半數(shù)感染量及致死量檢測病毒在傳代過程中毒力變化;分別提取第1和16代H7N9流感病毒的RNA,反轉(zhuǎn)錄及克隆后測序,對比病毒在連續(xù)傳代過程中血凝素(HA)和神經(jīng)氨酸酶(NA)基因的變化。試驗結(jié)果表明:在連續(xù)傳代過程中,病毒效價越來越趨于穩(wěn)定,血凝效價穩(wěn)定維持在384～448;病毒感染性滴度維持在7 Log10TCID50/mL左右;病毒在傳代過程中毒力未發(fā)生顯著變化; HA和NA在連續(xù)傳代過程中并未出現(xiàn)因基因變異導致的編碼氨基酸改變的狀況。H7N9安徽株病毒在Vero細胞傳代過程中不僅產(chǎn)量... 

【文章來源】：激光生物學報. 2020年03期 第268-273頁

【文章頁數(shù)】：6 頁

【部分圖文】：

各代病毒的效價及感染性滴度

如圖3所示:其中1和4是H7N9抗原標準品;2和5是第16代病毒;3和6是第1代病毒。重配病毒H7N9與NIBSC的標準抗H7N9抗血清反應后出現(xiàn)抗原抗體免疫復合物擴散環(huán)，雖然與標準H7N9抗原形成的環(huán)大小有差異，但是足以說明重配病毒H7N9血清型表型屬于H7型。圖3 單向免疫擴散型別鑒定結(jié)果圖

單向免疫擴散型別鑒定結(jié)果圖

【參考文獻】：
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本文編號：2912242