發(fā)布時(shí)間：2020-12-08 12:24

　　目的探討PBMC中高水平的A20（TNFAIP3）蛋白能否抑制TLR2、4-p38MAPK/NF-κB信號(hào)通路并緩解SLE小鼠的炎癥反應(yīng)。方法觀察MRL/lpr小鼠瑞香素（Daphnetin）處理組一般情況和生存期,檢測(cè)其尿蛋白含量;檢測(cè)血清中BUN、anti-dsDNA IgG、IL-6和TNF-α水平;檢測(cè)PBMC裂解液中A20、TLR2、TLR4、pNFκB-p65及pp38MAPK水平。以上所有指標(biāo)均與MRL/lpr小鼠未處理組、陰性對(duì)照組BALB/c雌性小鼠進(jìn)行比較。結(jié)果隨著Daphnetin處理組小鼠PBMC裂解液中A20蛋白水平顯著升高（P <0.01）,小鼠尿蛋白及血清BUN減少（P <0.001,P <0.001）,其生存期（存活率）雖低于陰性對(duì)照健康鼠,但明顯優(yōu)于未處理組狼瘡鼠（66.7%<88.9%<100%）;血清中anti-dsDNA IgG、IL-6和TNF-α水平明顯下降（P <0.01,P <0.01,P<0.001）;PBMC裂解液中TLR2、TLR4、pNFκB-p65、pp38MAPK水平均有明顯下降... 

【文章來(lái)源】：皮膚病與性病. 2020年03期 第313-317頁(yè)

【文章頁(yè)數(shù)】：5 頁(yè)

【部分圖文】：

A20高表達(dá)降低了小鼠血清anti-dsDNA IgG水平

SLE組小鼠血清IL-6、TNF-α水平顯著高于Sham組小鼠，而Daphnetin組小鼠血清IL-6、TNF-α水平低于SLE組小鼠（圖7）。2.8 小鼠TLR2、TLR4蛋白的表達(dá)及p NFκB-p65、pp38MAPK活性

近年來(lái)，通過(guò)研究抑制信號(hào)傳導(dǎo)通路減少細(xì)胞炎癥因子的釋放，從而控制SLE的進(jìn)展，已經(jīng)成為治療SLE的新思路。多項(xiàng)研究表明，SLE患者出現(xiàn)p38MAPK及NF-κB過(guò)度活化的現(xiàn)象[6、7]，而這兩條信號(hào)通路受多分子調(diào)控，其中就包括Toll樣受體（Toll-like receptors,TLRs）。作為天然免疫與獲得性免疫的橋梁，有研究報(bào)道SLE患者體內(nèi)存在TLRs表達(dá)水平的異常，不同的TLRs發(fā)揮著協(xié)同或不同的作用，TLR2和TLR4作為細(xì)菌感染的主要受體，可通過(guò)識(shí)別病原體病原相關(guān)分子模式與相應(yīng)配體結(jié)合而啟動(dòng)細(xì)胞內(nèi)信號(hào)傳導(dǎo)，通過(guò)激活p38MAPK及NF-κB最終引起大量促炎因子IL-6、IL-1β及TNF-α等的分泌，導(dǎo)致SLE患者腎臟、肝臟等多臟器的損傷[8]。有報(bào)道稱(chēng)SLE患者穩(wěn)定組、活動(dòng)組和合并感染組外周血PBMC中TLR2和TLR4表達(dá)明顯高于正常對(duì)照組，說(shuō)明TLR2和TLR4在SLE的發(fā)病中發(fā)揮著重要作用。本研究通過(guò)MRL/lpr狼瘡小鼠模型，將MRL/lpr未治療組與陰性對(duì)照組比較，其結(jié)果表明，MRL/lpr未處理組小鼠較陰性對(duì)照組小鼠尿蛋白及血清中血尿素氮明顯增多，血清anti-dsDNA IgG產(chǎn)生增加和血清IL-6、TNF-α分泌增多以及PBMC中TLR2、TLR4、pNFκB-p65及pp38MAPK表達(dá)水平增加，提示TLR2、4-p38MAPK/NF-κB該信號(hào)通路積極參與了MRL/lpr狼瘡小鼠的發(fā)病機(jī)制。A20作為一種具有強(qiáng)大抗炎功能的蛋白，利用自身N端的去泛素化功能和C端的泛素化活性，可以負(fù)調(diào)控作用于p38MAPK/NF-κB兩條信號(hào)通路上的多種信號(hào)分子，減少細(xì)胞炎癥因子的產(chǎn)生，這主要通過(guò)TNF途徑和TLR途徑來(lái)完成[9、10]。其中TLR主要由髓樣分化因子（MyD88）依賴(lài)及非依賴(lài)途徑激活，A20蛋白通過(guò)去除TRAF6泛素化從而抑制TLR途徑。有研究證實(shí)，當(dāng)IL-1β和LPS刺激后，可招募MyD88和TRAF6聚積至細(xì)胞內(nèi)的TLR/IL-1R區(qū)。A20通過(guò)去除TRAF6的K63多聚泛素鏈以及干擾TRAF6與Ubc13/H5的結(jié)合，使Ubc5和Ubc13被蛋白酶體降解來(lái)抑制TRAF6的泛素化作用和活化，進(jìn)而抑制TAK1與下游信號(hào)分子的相互作用，從而達(dá)到抑制p38MAPK/NF-κB活化的目的[11]。在本研究中，與MRL/lpr未處理組小鼠比較，Daphnetin處理組小鼠PBMC中A20蛋白表達(dá)水平顯著提高。結(jié)果顯示高表達(dá)的A20能改善狼瘡模型小鼠營(yíng)養(yǎng)和生長(zhǎng)狀況；高表達(dá)的A20能降低狼瘡模型小鼠促炎細(xì)胞因子IL-6、TNF-α和自身抗體anti-dsDNA IgG水平；高表達(dá)的A20能抑制TLR2、TLR4的表達(dá)及p38MAPK、NF-κB的活化；高表達(dá)的A20能減輕狼瘡相關(guān)的腎臟損傷使得小鼠尿蛋白及血清中血尿素氮減少。因此，A20的高表達(dá)可抑制TLR2、4-p38MAPK/NF-κB信號(hào)通路，從而明顯改善對(duì)MRL/lpr狼瘡模型小鼠的炎癥反應(yīng)。

【參考文獻(xiàn)】：
博士論文
[1]A20治療系統(tǒng)性紅斑狼瘡小鼠模型機(jī)制研究[D]. 李敏.第三軍醫(yī)大學(xué) 2016
[2]Toll樣受體2、4和9在SLE患者外周血和骨髓單個(gè)核細(xì)胞的表達(dá)及其意義[D]. 李昕.天津醫(yī)科大學(xué) 2014



本文編號(hào)：2905079