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雄鼠交配前高脂高糖高鹽飲食對(duì)子二代腎功能的影響

發(fā)布時(shí)間:2020-12-05 12:11
  目的:本研究采用高脂高糖高鹽飲食(高復(fù)合飲食,HFSSD)給予親代(F0)雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠交配前暴露,且子一代(F1)雄鼠進(jìn)一步給予高復(fù)合飲食二次暴露,觀察雄鼠高復(fù)合飲食暴露對(duì)子二代(F2)腎功能的影響并探討可能的機(jī)制。方法:1.動(dòng)物模型建立與動(dòng)物實(shí)驗(yàn)流程:將F0雄性SD大鼠隨機(jī)分為兩個(gè)組:(1)對(duì)照飲食組(CD,n=15),給予對(duì)照飲食喂養(yǎng)9周;(2)高脂高糖高鹽飲食組(HFSSD,n=15),給予HFSSD喂養(yǎng)9周。之后兩組與對(duì)照飲食喂養(yǎng)的雌鼠交配產(chǎn)生F1代。F1大鼠第一個(gè)階段:雌鼠懷孕階段至F1第15周,均采用對(duì)照飲食喂養(yǎng),第二個(gè)階段:F1第15周至第24周,分別從兩組的F1中隨機(jī)取2只雄鼠給予HFSSD喂養(yǎng)二次暴露9周,同時(shí)分別從兩個(gè)組的F1中隨機(jī)取2只雄鼠給予CD喂養(yǎng)。第24周上述8只F1雄鼠與12只對(duì)照飲食喂養(yǎng)的F1雌鼠交配產(chǎn)生F2代。F2分為4組:(1)F0CD+F1CD組:F0和F1雄鼠均喂養(yǎng)對(duì)照飲食的子二代,記為對(duì)照組;(2)F0CD+F1HD組:F0親代雄鼠喂養(yǎng)對(duì)照飲食和F1雄鼠喂養(yǎng)高復(fù)合飲食的子二代;(3)F0HD+F1CD組:F0親代... 

【文章來源】:湖南師范大學(xué)湖南省 211工程院校

【文章頁數(shù)】:83 頁

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

雄鼠交配前高脂高糖高鹽飲食對(duì)子二代腎功能的影響


動(dòng)物模型建立流程圖

流程圖,動(dòng)物實(shí)驗(yàn),流程圖,離心管


用無菌 50mL 離心管收集 24h 尿液。次日取下離心管標(biāo)記對(duì)應(yīng)的大鼠編號(hào)并記錄尿液量。將離心管置于高速低溫離心機(jī)離心(3000rpm,20min),收集上清液保存到干凈的離心管中,如發(fā)現(xiàn)仍有沉淀,再次離心取上清。EP 管分裝-80℃冰箱保存。(3)血液標(biāo)本收集:F2 大鼠第 25 周時(shí),禁食 12h 后用 1%戊巴比妥納溶液按 3mL/kg 進(jìn)行腹腔注射麻醉,然后將其固定在動(dòng)物臺(tái)上,腹主動(dòng)脈取血,無抗凝管收集,在室溫下放置 5 min,待血清析出后,將血液置于離心機(jī)內(nèi),室溫下2500rpm×15min 離心,移液器小心吸取上清液,轉(zhuǎn)移至干燥 EP 管分裝后于-80℃冰箱保存。(4)腎組織標(biāo)本收集:取血后解剖大鼠,分離取出雙側(cè)腎臟后用電子天平快速稱腎臟重量并記錄。其中左側(cè)腎臟剪取部分放入凍存管,放于液氮中速凍后保存到-80°C 冰箱用于提取 RNA。右側(cè)腎臟用冰生理鹽水沖洗后放入 4%多聚甲醛溶液固定保存。

體重


Table 3-2 The result of body weight in F2 male offspring體重(g)F0CD+F1CD(n=20)F0CD+F1HD(n=7)F0HD+F1CD(n=9)F0HD+F1HD(n=19)第 0 周 6.35±0.82 7.39±0.55 6.67±0.88 7.37±0.51第 2 周 32.69±4.27 26.97±1.91 33.67±2.27 26.99±5.49第 3 周 53.00±6.85 42.34±3.88 56.84±4.55 48.09±5.64第 6 周 191.83±13.16 153.43±10.8 213.77±10.05 186.71±10.33第 9 周 353.39±19.04 303.79±29.73 386.17±21.43 356.22±17.89第 12 周 402.52±35.64 349.73±34.90 443.12±26.94 427.02±25.46第 15 周 465.66±25.78 399.31±35.25 491.44±24.69 461.43±47.35第 18 周 520.89±30.37 458.69±43.19★540.63±33.32 527.28±39.10第 22 周 565.74±34.50 502.47±42.76★583.04±36.22 584.77±32.44第 25 周 585.78±31.92 518.80±41.21★594.24±34.37 604.77±37.05注:★:F0CD+F1HD 與 F0CD+F1CD 兩組之間 P < 0.05;◇: F0HD+F1CD 與 F0CD+F1CD兩組間 P < 0.05;▲: F0HD+F1HD 與 F0CD+F1CD 兩組間 P < 0.05。A B

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]大鼠母體孕期高脂高糖飲食對(duì)子代成年期動(dòng)脈粥樣硬化的影響[J]. 肖嬋云,鄒麗,康瑋,周燕.  中國優(yōu)生與遺傳雜志. 2008(08)
[2]Sperm chromatin structure and male fertility:biological and clinical aspects[J]. J.Erenpreiss,M.Spano,J.Erenpreisa,M.Bungum,A.Giwercman.  Asian Journal of Andrology. 2006(01)



本文編號(hào):2899432

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