目的通過改良兩種時段接收淋巴結(jié)的固定方式,提高淋巴瘤診斷的制片質(zhì)量。方法隨機收集上午10時左右及下午4時左右接收的132例淋巴結(jié)標(biāo)本,每例各切取2塊組織,上午切取的組織隨機分為2組,分別行短時間固定處理程序(上午短時間組)和延長固定時間處理程序(上午長時間組)進(jìn)行固定,下午切取的組織也隨機分為2組,也分別行短時間固定處理程序(下午短時間組)和延長固定時間處理程序(下午長時間組)進(jìn)行固定�；仡櫺苑治霾⒑Y選出病理診斷為彌漫大B細(xì)胞淋巴瘤的58例,其中包括上午10時左右接收的26例及下午4時左右接收的32例。脫水處理后的4組組織進(jìn)行包埋后,按常規(guī)進(jìn)行切片、HE染色、CD79a免疫組織化學(xué)檢測、C-MYC雙色分離熒光原位雜交實驗(fluorescence in situ hybridization, FISH)。通過比較4組切片出現(xiàn)肉眼可見裂隙、皺折及破碎不全發(fā)生率、HE染色質(zhì)量、免疫組織化學(xué)檢測陽性率、熒光原位雜交成功率,探討最佳的淋巴結(jié)固定方法。結(jié)果上午長時間組制片CD79a免疫組織化學(xué)檢測陽性率、熒光原位雜交成功率均不如上午短時間組,切片不完整發(fā)生率及HE染色質(zhì)量與上午短時間組無明顯差異;下午短時間組制片切片不完整發(fā)生率高且HE染色質(zhì)量、CD79a免疫組織化學(xué)檢測陽性率、熒光原位雜交成功率明顯不如上午短時間組;下午長時間組切片以上指標(biāo)均與上午短時間組無明顯差異。結(jié)論上午接收的淋巴結(jié)標(biāo)本應(yīng)剖開于當(dāng)天進(jìn)行隔夜常規(guī)脫水,下午接收的淋巴結(jié)標(biāo)本必須剖開后行延長固定程序進(jìn)行脫水,隨后得到的淋巴結(jié)組織在切片完整性、HE染色、免疫組織化學(xué)檢測及FISH檢測中能更好地提高淋巴瘤診斷的制片質(zhì)量。
【部分圖文】：

上午長時間組（B組）及下午長時間組（D組）兩組切片不完整發(fā)生率與上午短時間組（A組）的差異均無統(tǒng)計學(xué)意義；下午短時間組（C組）則顯著高于A組（表2）。2行延長固定改良程序的淋巴結(jié)切片HE染色質(zhì)量較高

C-MYC雙色分離FISH檢測顯示，上午短時間組（A組）組織切片雙色熒光雜交成功，紅、綠信號明亮清晰；同A組相同消化時間，上午長時間組（B組）組織切片消化不良，雜交失�。幌挛缍虝r間組（C組）組織切片雙色熒光雜交紅綠信號均有，但信號強度弱，清晰度相對較差；下午長時間組（D組）組織切片雙色熒光雜交成功，紅、綠信號明亮清晰。B、C兩組FISH雜交成功率均明顯低于A組，D組與A組的差異無統(tǒng)計學(xué)意義（表5）。討論

惡性淋巴瘤的發(fā)病率逐年上升，對其研究也越來越引起病理學(xué)家的和臨床醫(yī)師的關(guān)注[5]，淋巴瘤的診斷與鑒別診斷一直以來都是病理診斷工作中的困難。隨著病理技術(shù)的迅速發(fā)展，HE聯(lián)合IHC及FISH在淋巴瘤的診斷已發(fā)揮著不可替代的作用。本單位以往工作中常遇到淋巴結(jié)接收后未及時進(jìn)行對半切開固定，或標(biāo)本固定時間不夠即進(jìn)行脫水處理，導(dǎo)致淋巴結(jié)組織中央固定不良，難以制片，影響后續(xù)的HE染色、免疫組織化學(xué)檢測（IHC)以及FISH檢測，影響淋巴瘤的診斷。故日常工作中，淋巴結(jié)組織處理質(zhì)量的優(yōu)劣至關(guān)重要。10%中性緩沖福爾馬林（甲醛）因其經(jīng)濟，滲透性強，對組織收縮小，固定效果佳而且能同時與蛋白質(zhì)和染料相結(jié)合，增強組織著色能力，被廣泛用于組織的長期保存。使用10%中性福爾馬林固定淋巴結(jié)，時間過短，其致密的被膜及細(xì)胞結(jié)構(gòu)容易導(dǎo)致中間組織固定不良，造成制片時組織產(chǎn)生裂隙或脫片，HE染色時將出現(xiàn)灰染現(xiàn)象。實驗中下午短時間組淋巴結(jié)組織（C組）固定時間不足，少于6小時，故切片出現(xiàn)的可見裂隙或脫片率高于上午短時間組（A組）且HE染色的質(zhì)量最低，而上午長時間組（B組）、下午長時間組（D組）則與A組無明顯區(qū)別。
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