發(fā)布時間：2020-10-26 16:41

　　 目的:本研究旨在分析亞洲帶絳蟲實驗感染乳豬后被囊尾蚴寄生的乳豬肝臟轉錄組表達變化,為探討亞洲帶絳蟲與中間宿主相互作用的可能分子機制提供基礎資料。方法:將采自貴州省都勻市良畝鄉(xiāng)的亞洲帶絳蟲孕節(jié)解剖后,以生理鹽水反復清洗并離心收集蟲卵。20日齡約克施格雜交乳豬12頭隨機分為實驗組和對照組各6頭,實驗組以定量15萬個蟲卵/頭灌胃感染,于感染后第15天和第75天解剖乳豬,取實驗組囊尾蚴寄生的肝臟和對照組對應部位肝臟。采用RNA測序(RNA-sequence,RNA-seq)技術檢測實驗組和對照組肝臟mRNA轉錄組的表達差異,并對差異表達基因(Differentially expressed genes,DEGs)進行生物信息學分析和實時熒光定量PCR(quantitative Real-time PCR,q RT-PCR)驗證。結果:與對照組比,感染15天和75天實驗組肝臟中分別檢測出152個和558個DEGs,分別占所有被檢測的mRNA基因的百分比為0.85%和3.12%。通過GO和KEGG分析,發(fā)現(xiàn)這些DEGs涉及肝臟的免疫反應、物質代謝、纖維化和組織增生修復等功能,并與MHC抗原加工、呈遞,IFN受體介導的信號級聯(lián)反應,細胞色素P450,TGF-β信號通路等有關。對部分DEGs的q RT-PCR驗證結果與RNA-seq一致。結論:亞洲帶絳蟲寄生可導致乳豬肝臟組織中出現(xiàn)顯著性的差異基因表達,特定的DEGs參與肝臟的新陳代謝,免疫應答和組織修復或再生等生物過程。這些結果可能有助于闡明宿主-寄生蟲相互作用的分子機制。
【學位單位】：貴州醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2019
【中圖分類】：R383.3
【部分圖文】：

圖 1 帶絳蟲頭節(jié)Fig.1 Scolex of Taenia圖 2 帶絳蟲孕節(jié)Fig.2 Gravid proglottid of Taenia2.1.3 帶絳蟲成蟲分子生物學鑒定用從良畝鄉(xiāng)帶絳蟲提取的 DNA，以亞洲帶帶絳蟲 cox1 基因片段的特異性引物（Tasia：5’-ACGGTTGGATTAGATGTTAAGACTA-3’）、通用的反向引物（Rev:5’-GACATAACATAATGAAAATG-3’），經(jīng) PCR 擴增和瓊脂糖凝膠電泳，均擴增出約 260 bp 的產(chǎn)物，而以牛帶絳蟲 cox1 基因片段的特異性引物（Tsag：5’-TTGATTCCTTCGATGGCTTTTCTTTTG-3’）和 Rev 為引物的 PCR 產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳，均未見擴增產(chǎn)物（圖 3）。

圖 1 帶絳蟲頭節(jié)Fig.1 Scolex of Taenia圖 2 帶絳蟲孕節(jié)Fig.2 Gravid proglottid of Taenia2.1.3 帶絳蟲成蟲分子生物學鑒定用從良畝鄉(xiāng)帶絳蟲提取的 DNA，以亞洲帶帶絳蟲 cox1 基因片段的特異性引物（Tasia：5’-ACGGTTGGATTAGATGTTAAGACTA-3’）、通用的反向引物（Rev:5’-GACATAACATAATGAAAATG-3’），經(jīng) PCR 擴增和瓊脂糖凝膠電泳，均擴增出約 260 bp 的產(chǎn)物，而以牛帶絳蟲 cox1 基因片段的特異性引物（Tsag：5’-TTGATTCCTTCGATGGCTTTTCTTTTG-3’）和 Rev 為引物的 PCR 產(chǎn)物經(jīng)瓊脂糖凝膠電泳，均未見擴增產(chǎn)物（圖 3）。

絳蟲頭節(jié)colex of Taenia圖 2 帶絳蟲孕節(jié)Fig.2 Gravid proglottid蟲分子生物學鑒定鄉(xiāng)帶絳蟲提取的 DNA，以亞洲帶帶絳蟲 cox1 基因片段’-ACGGTTGGATTAGATGTTAAGACTA-3’）、通用的ATAACATAATGAAAATG-3’），經(jīng) PCR 擴增和瓊脂糖0 bp 的產(chǎn)物，而以牛帶絳蟲 cox1 基因片段的特異性引TTCGATGGCTTTTCTTTTG-3’）和 Rev 為引物的 PC，均未見擴增產(chǎn)物（圖 3）。
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本文編號：2857239