目的:觀察肺炎克雷伯菌夾膜多糖(CPS)對人支氣管上皮細胞表達β-防御素-3(hBD-3)的影響,并探討其作用機制。方法:用肺炎克雷伯菌CPS刺激人支氣管上皮細胞BEAS-2B。使用實時定量PCR和ELISA分別檢測hBD-3 mRNA和蛋白表達的影響。測定CPS處理前后絲裂原活化蛋白激酶(MAPKs)以及c-Jun的磷酸化。采用MAPKs和NF-κB抑制劑或RNA干擾TLR4表達,觀察其在介導hBD-3表達中的作用。采用染色質(zhì)共沉淀技術(shù)檢測核轉(zhuǎn)錄因子AP-1與hBD-3啟動子的結(jié)合情況。結(jié)果:CPS處理細胞后,hBD-3 mRNA的表達呈劑量依賴性升高,ELISA獲得類似結(jié)果。CPS能激活MAPKs,采用p38、ERK及NF-κB抑制劑SB203580、PD98059和PDTC處理細胞后,不影響hBD-3的表達,而JNK抑制劑SP600125處理后,hBD-3分泌明顯降低。CPS可誘導AP-1亞基c-Jun磷酸化及能增強AP-1與hBD-3啟動子的結(jié)合。結(jié)論:肺炎克雷伯菌夾膜多糖激活AP-1誘導人支氣管上皮細胞表達β-防御素-3。
【部分圖文】：

mRNA和蛋白 BEAS-2B細胞給予0.1 μg/ml、1.0 μg/ml和10 μg/ml CPS孵育24 h后,實時定量PCR結(jié)果顯示,與陰性對照組相比,hBD-3 mRNA表達水平隨之增高,呈一定的濃度依賴性(圖1A)。此外,培養(yǎng)上清中hBD-3蛋白水平也具有類似的趨勢(圖1B)。這表明肺炎克雷伯菌能誘導BEAS-2B細胞表達hBD-3。圖2 沉默TLR4對CPS誘導hBD-3表達的影響

沉默TLR4對CPS誘導hBD-3表達的影響

MAPKs介導CPS誘導hBD-3分泌
【相似文獻】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 李迎雪;楊林;王立生;荀安營;朱忠生;朱惠明;;雙歧桿菌的完整肽聚糖對巨噬細胞AP-1的影響[J];中國微生態(tài)學雜志;2007年02期

2 朱瑾,周劍萍,張煒,賀斌,劉銀坤;AP-1蛋白在胚胎著床前后小鼠子宮內(nèi)膜的表達[J];現(xiàn)代婦產(chǎn)科進展;2002年02期

3 翁立新;李秀霞;;改構(gòu)體酸性成纖維細胞生長因子對腸缺血再灌注損傷中AP-1表達的影響[J];內(nèi)蒙古醫(yī)學院學報;2011年05期

4 韓梅;溫進坤;聶磊;;AP-1與STAT5相互作用協(xié)同調(diào)節(jié)血管緊張素原基因表達[J];中國生物化學與分子生物學報;2006年06期

5 周欽;AP-1在基因轉(zhuǎn)錄調(diào)控中的研究進展[J];國外醫(yī)學(分子生物學分冊);2001年02期

6 王永堂,魯秀敏,蔣建新,李關(guān)榮,伍亞民,李春穴;內(nèi)毒素肝損傷過程中枯否細胞NF-κB和AP-1活性變化及其生物學意義[J];生命科學研究;2002年03期

7 周欽;AP-1在轉(zhuǎn)錄水平調(diào)控氧化低密度脂蛋白誘導的轉(zhuǎn)化生長因子-β_1表達(摘要)[J];復旦學報(醫(yī)學版);2003年03期

8 王雯,朱廣瑾,祖淑玉;植物雌激素α-玉米赤霉醇降低組織因子及核轉(zhuǎn)錄因子AP-1和NF-κB水平的作用[J];微循環(huán)學雜志;2004年02期

9 張文;張烜;;TRAF2在人B淋巴細胞AP-1信號傳導系統(tǒng)中的作用[J];基礎(chǔ)醫(yī)學與臨床;2008年05期

10 李琦,錢桂生,張青,湯正才,高正今;全身炎癥反應綜合征-肺損傷大鼠肺組織IL-10mRNA表達及AP-1活性變化的研究[J];中國病理生理雜志;2002年08期

相關(guān)博士學位論文 前1條

1 石艷軍;NF-κB和AP-1參與低氧誘導大鼠CRHR1基因轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)[D];浙江大學;2012年

相關(guān)碩士學位論文 前3條

1 王永堂;NF-κB和AP-1活性變化及其在內(nèi)毒素誘導IL-6基因表達中的調(diào)控作用[D];西南農(nóng)業(yè)大學;2001年

2 李鵬程;巴多昔芬對子宮內(nèi)膜異位癥模型大鼠子宮內(nèi)膜組織中ERα、ERβ、AP-1、VEGF表達的影響[D];鄭州大學;2017年

3 吳限;CADPE抑制RANKL誘導的破骨細胞形成和卵巢切除后的骨質(zhì)丟失及其分子機理[D];華東師范大學;2011年

本文編號：2855653