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體外誘導(dǎo)骨髓細胞分化成巨核細胞的方法學(xué)研究

發(fā)布時間:2020-10-22 10:20
   目的:探討體外將小鼠骨髓細胞誘導(dǎo)分化為巨核細胞的方案,用于中藥活性評價。方法:從小鼠股骨和脛骨取骨髓細胞,在血小板生成素(TPO)及TPO和干細胞因子(SCF)或TPO、SCF、白介素-6(IL-6)和白介素-9(IL-9)聯(lián)合誘導(dǎo)下,體外培養(yǎng)6 d。然后用倒置顯微鏡觀察培養(yǎng)體系中的細胞生長情況,自動細胞計數(shù)儀檢測細胞數(shù)量,流式細胞術(shù)分析培養(yǎng)體系中巨核細胞比例,并計算巨核細胞絕對數(shù)量。結(jié)果:單因子或多因子聯(lián)合誘導(dǎo)方法均能體外促進骨髓細胞分化成巨核細胞,TPO輕微促進骨髓細胞分化成巨核細胞,TPO和SCF聯(lián)合及TPO、SCF、IL-6和IL-9聯(lián)合均顯著促進骨髓細胞增殖和分化成巨核細胞,添加IL-6和IL-9可促進骨髓細胞分化成巨核細胞,減少非巨核細胞增殖。結(jié)論:TPO、SCF、IL-6和IL-9聯(lián)合具有最強的促進骨髓細胞分化為巨核細胞的作用,可以用于促血小板形成中藥活性篩選和評價。
【文章目錄】:
材料和方法
    試劑與儀器
    實驗動物
    骨髓細胞的制備和培養(yǎng)
    細胞生長的倒置顯微鏡觀察
    活細胞自動計數(shù)
    巨核細胞的流式細胞術(shù)分析
    統(tǒng)計學(xué)分析
結(jié)果
    細胞生長
    活細胞計數(shù)
    巨核細胞的分析
討論

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本文編號:2851472

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