研究背景環(huán)境溫度的改變能夠影響正常機體的生理功能,寒冷作為一種重要的環(huán)境因素可以引發(fā)機體多個系統(tǒng)的損傷,對人們的健康造成嚴重的威脅。暴露于寒冷的環(huán)境被廣泛認為是人類健康的全球性挑戰(zhàn)。流行病學調(diào)查結果顯示男性和女性對寒冷有不同的敏感性。寒冷對女性健康帶來許多不良影響,然而許多機制至今尚未闡明。研究目的本研究旨在評估冷暴露對雌性大鼠生殖器官的影響,并初步探討寒冷環(huán)境下雌性生殖功能改變的機制。通過雌性大鼠動情周期的變化模擬冷暴露對女性月經(jīng)周期的影響,從組織形態(tài)學和分子生物學方面,觀察冷暴露對雌性大鼠相關性激素分泌水平,以及對卵巢和子宮相關基因表達情況的影響,以初步揭示冷暴露對雌性大鼠的生殖功能的影響及其可能的作用機制。研究方法將24只成年雌性SD大鼠隨機分為兩組,分別為常溫對照組和冷暴露組(n=12),冷暴露組大鼠每天4小時,單籠單只-10℃暴露,共暴露2周。記錄雌性大鼠體重變化;攝食、飲水量變化;行陰道脫落細胞學觀察并記錄大鼠動情周期;實驗結束后取動物卵巢和子宮并計算臟器系數(shù);觀察卵巢和子宮的病理變化及測量大鼠子宮的上皮高度;放射免疫分析法檢測大鼠血清中性激素雌二醇(E2)、黃體生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)、孕酮(P)和泌乳素(Prl)的分泌水平;實時熒光定量PCR法檢測卵巢和子宮中雌激素受體(ER)、黃體生成素受體(LHR)、孕酮受體(PR)和泌乳素受體(PrlR)基因mRNA的表達情況。研究結果(1)與對照組相比,冷暴露組大鼠體重增長在第一周與對照組之間沒有顯著差異,從第8天到第14天冷暴露組體重增加減緩,與對照組相比差異有統(tǒng)計學意義(P0.05和P0.01);冷暴露組大鼠的攝食、飲水量都明顯多于對照組(P0.05和P0.01);兩組卵巢和子宮臟器系數(shù)的差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。(2)冷暴露組的動情周期出現(xiàn)顯著性改變,其中動情期和動情間期明顯延長(P0.05,P0.01),動情前期和動情后期無顯著性改變。(3)冷暴露導致大鼠卵巢中的卵泡數(shù)量明顯增加,卵泡結構和卵泡輪廓變得模糊,顆粒細胞層數(shù)減少,排列紊亂;冷暴露導致雌性大鼠子宮管腔變窄或出現(xiàn)連接,內(nèi)膜層的管腔上皮呈不規(guī)則乳頭狀,子宮內(nèi)膜基質(zhì)和肌層出現(xiàn)水腫,腺體減少或形態(tài)不規(guī)則;此外,冷暴露組的雌性大鼠子宮上皮高度明顯低于常溫對照組子宮上皮高度(P0.05)。(4)與對照組相比,冷暴露組雌性大鼠血清P水平顯著降低(P0.05),血清LH水平顯著升高(P0.05),血清E2和Prl水平有下降趨勢,但差異不顯著(P0.05),血清FSH水平無顯著性差異(P0.05)。(5)與對照組相比,冷暴露組雌性大鼠卵巢中LHR基因表達水平升高(P0.05),ER基因表達水平具有上升趨勢及PR表達水平具有下降趨勢,但差異不顯著(P0.05),PrlR基因表達水平無顯著性差異(P0.05);子宮中PR基因表達水平升高(P0.05),ER基因表達水平降低(P0.05),LHR和PrlR基因表達水平無顯著性差異(P0.05)。研究結論隨著冷暴露時間延長,雌性大鼠體重增長減緩、攝食和飲水量增加;冷暴露可引起雌性大鼠動情周期延長、卵巢組織病理學改變,初步推測冷暴露可能通過增加血清LH水平和增加卵巢LHR基因表達而損害卵巢功能;冷暴露可引起子宮組織病理學改變,推測可能與血清P水平降低、子宮PR基因表達水平升高和ER基因表達水平降低有關。
【學位單位】：蘭州理工大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2019
【中圖分類】：R339.5
【部分圖文】：

圖 2.3.1 動情周期的不同階段動情周期的細胞特征顯微照片（10×10）。動情前期涂片主要由有核上皮細胞組成（A）；動情期涂片主要由無核角化上皮細胞組成（B）；動情后期涂片主要由比例相同的白細胞、無核角化上皮細胞和有核上皮細胞組成（C）；動情間期涂片主要由白細胞組成（D）。Fig. 2.3.1 Different stages of estrous cycle. Microphotographs (10×10) of cellularcharacteristics for the identification of the estrus stage. A proestrus smear mainlyconsisted of nucleated epithelial cells (A); an estrus smear primarily consisted ofanucleated cornified cells (B); a metestrus smear consisted of the same proportionamong leukocytes, anucleated cornified cells, and nucleated epithelial cells (C); a

冷暴露對雌性大鼠生殖功能的影響及其機制的初步研究后，取出大鼠的卵巢和子宮在預冷生理鹽水中輕肉眼觀察，對照組的卵巢呈淡紅色，圓形或橢圓形丘狀。冷暴露組與對照組相比，卵巢肉眼未發(fā)現(xiàn)明呈“Y”字型，兩個子宮角的腔分開。冷暴露組大鼠見到部分大鼠的子宮出現(xiàn)水腫（Fig. 2.4.1）。

圖 2.4.2 雌性大鼠卵巢組織病理學檢查Fig. 2.4.2 Photomicrographs of rat ovary by HE staining. Bar = 100 μm.對照組雌性大鼠的子宮鏡下顯示正常子宮內(nèi)膜特征：高柱狀上皮、纖維細胞間質(zhì)和腺體。肌層和外膜分別由致密結締組織上的良好的平滑肌和鱗狀上皮構成（Fig.2.4.3C）。而冷暴露組雌性大鼠子宮管腔變窄或出現(xiàn)連接，內(nèi)膜層的管腔上皮呈不規(guī)則乳頭狀。子宮內(nèi)膜基質(zhì)和肌層出現(xiàn)水腫，腺體減少或形態(tài)不規(guī)則（Fig.2.4.3D）。
【參考文獻】

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