目的研究1株微生態(tài)活菌制品生產(chǎn)用糞腸球菌的安全性。方法采用目前腸球菌安全性評(píng)價(jià)主要方法,測(cè)定糞腸球菌GMCC 0460.3株的全基因組序列并分析毒力和耐藥性相關(guān)基因;以生物化學(xué)方法測(cè)定其耐藥性和有毒代謝產(chǎn)物的產(chǎn)生情況;經(jīng)口灌胃小鼠測(cè)定其動(dòng)物體內(nèi)毒力。結(jié)果該株腸球菌對(duì)卡那霉素和磺胺類藥物耐藥,耐藥譜窄;基因組存在多種腸球菌毒力基因;生化試驗(yàn)表明其溶血性陰性、氨基脫羧酶活性陰性、硝基還原酶活性較低、細(xì)胞表面疏水性較低、生物膜形成能力較弱;動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明該株菌在小鼠體內(nèi)無(wú)明顯毒性作用。結(jié)論糞腸球菌GMCC0 460.3株實(shí)驗(yàn)評(píng)價(jià)的結(jié)果顯示了良好的安全性。
【部分圖文】：

各株菌革蘭染色結(jié)果

對(duì)GMCC 0460.3實(shí)驗(yàn)株進(jìn)行全基因組測(cè)序,結(jié)果顯示,基因全長(zhǎng)2 750.507 kb;將基因序列在NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行比對(duì),結(jié)果顯示測(cè)序結(jié)果與多株糞腸球菌(ATCC 29212株等)序列一致性均達(dá)99%(圖2)。綜合上述鑒定實(shí)驗(yàn)結(jié)果可見,實(shí)驗(yàn)菌株均為糞腸球菌。傳代30代菌株與原始實(shí)驗(yàn)菌株結(jié)果一致。

進(jìn)一步對(duì)實(shí)驗(yàn)菌株GMCC 0460.3株與腸球菌屬其他菌株進(jìn)行了系統(tǒng)進(jìn)化樹分析,結(jié)果顯示,本株菌與腸球菌屬其他糞腸球菌進(jìn) 化水平相當(dāng),與益生性腸球菌Symbioflor株和腸道共 生性腸球菌E. faecalis 62株等關(guān)系接近(圖3)。2.2 毒力基因和耐藥基因分析
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