本文關(guān)鍵詞：全饑餓對腦皮質(zhì)細胞凋亡及相關(guān)因子表達的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的研究全饑餓狀態(tài)對大腦皮層細胞凋亡及其相關(guān)因子Bcl-2,Bax,Caspase-3的表達影響。方法成年雄性SD大鼠,健康清潔級90只,350±30g,隨機分為6組(每組15只):正常對照組(即正常進食組),饑餓組為五組即3d組、5d組、7d組、9d組、11d組。其后又將每一組隨機分為三個亞組I、II、III組,每一個亞組5只。其中每一組I組應(yīng)用蘇木素-伊紅染色法觀測大腦皮質(zhì)區(qū)神經(jīng)細胞的形態(tài)變化,采用TUNEL法檢測凋亡細胞,然后利用圖像分析儀來計算凋亡細胞表達數(shù)和凋亡指數(shù),以此推測全饑餓狀態(tài)下大腦功能的變化。II組大鼠皮質(zhì)區(qū)Bcl-2、Bax、Caspase-3三種因子表達的信使核糖核酸及蛋白,其表達情況利用逆轉(zhuǎn)錄PCR技術(shù)和免疫印跡試驗來檢測觀察,以研究急性全饑餓對大鼠腦皮質(zhì)區(qū)凋亡相關(guān)因子的影響。III組大鼠在不同饑餓時限時腦組織含水量變化利用干濕重比法來檢測觀察,以便我們了解在這種情況下腦組織是否存在脫水情況。結(jié)果1大鼠一般行為觀察饑餓3d和饑餓5d組大鼠的一般狀態(tài)良好,饑餓后期即饑餓7d、9d、11d組,大鼠的一般狀況極度變差,精神狀態(tài)較萎靡,對刺激反應(yīng)遲鈍。2大鼠重量的變化饑餓前,各組大鼠之間對其機體重量進行兩兩對比,均無統(tǒng)計學(xué)差異(P0.05)。隨著饑餓時間的增加,大鼠的體重不斷減輕。3皮質(zhì)區(qū)HE染色形態(tài)學(xué)比較結(jié)果光鏡下(×400)組織形態(tài)觀察可見:正常對照組、饑餓3d組和饑餓5d組大鼠皮質(zhì)區(qū)的細胞清晰飽滿,形態(tài)完整,分布緊密規(guī)則,細胞質(zhì)染色深,分布均勻,細胞核居中,有明顯大量的神經(jīng)纖維。隨著饑餓時間的延長,饑餓7d、9d、11d組大鼠皮質(zhì)區(qū)細胞排列極其稀疏紊亂,細胞線不清,細胞間隙增寬,間質(zhì)水腫疏松,神經(jīng)細胞丟失、細胞結(jié)構(gòu)不清,尼氏體減少,細胞質(zhì)染色淡,細胞壞死增多。4皮質(zhì)區(qū)細胞凋亡的檢測結(jié)果與正常對照組相比,皮質(zhì)區(qū)凋亡細胞百分率,饑餓3d組無顯著差異(P0.05);饑餓5d組稍有增加,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05);而饑餓后期7d、9d、11d組凋亡細胞百分比增加有顯著差異(P0.01)。說明在饑餓早期,即饑餓3d時,大鼠皮質(zhì)區(qū)神經(jīng)細胞凋亡較少,饑餓5d組略有增加,而在饑餓后期,即饑餓7d、9d、11d時,大鼠皮質(zhì)區(qū)凋亡細胞的數(shù)目明顯增多。5逆轉(zhuǎn)錄PCR技術(shù)檢測大腦皮質(zhì)區(qū)在全饑餓狀態(tài)下,三種凋亡相關(guān)因子其m RNA的表達結(jié)果與實驗正常對照組相比,饑餓3d組Bax、Caspase-3 m RNA表達無明顯增高(P0.05),而饑餓5d、7d、9d、11d組Baxm RNA、Caspase-3 m RNA表達均顯著增加(P0.01);饑餓3d、5d、7d組Bcl-2m RNA的表達均增高(P0.05),5d組表達量最高(P0.01),9d、11d組表達降低(P0.05),11d組表達量最低(P0.01)。6免疫印跡試驗檢測大腦皮質(zhì)區(qū)在全饑餓狀態(tài)下,三種凋亡相關(guān)因子其蛋白的表達結(jié)果與對照組相比,饑餓3d組Bax蛋白、Caspase-3蛋白表達無增加(P0.05),饑餓5d組Caspase-3蛋白表達增加(P0.05),Bax蛋白表達明顯增多(P0.01),饑餓后期組7d、9d、11d組Bax蛋白和Caspase-3蛋白表達均顯著增加(P0.01),差異有統(tǒng)計學(xué)意義;饑餓3d、5d、7d組Bcl-2蛋白的表達均明顯增高(P0.01),5d組表達量最高,9d、11d組表達降低,11d組表達量最低(P0.01)。7干濕比重法各饑餓組的腦組織含水量與正常對照組相比,3d組增加不明顯(P0.05),5d組明顯增加(P0.01),饑餓后期(7d、9d、11d)組均下降(P0.01)。結(jié)論1全饑餓狀態(tài)下大鼠皮質(zhì)區(qū)神經(jīng)細胞凋亡增加從饑餓第5d開始存在。2在全饑餓狀態(tài)下,短期饑餓應(yīng)激可能有一定的腦保護作用,而長期饑餓應(yīng)激引起大量皮質(zhì)細胞凋亡,導(dǎo)致腦功能受損,應(yīng)積極的預(yù)防和治療。3在全饑餓狀態(tài)下,Bcl-2、Bax、Caspase-3因子在凋亡調(diào)控中起著非常重要的作用。
【關(guān)鍵詞】：全饑餓狀態(tài) 大腦皮質(zhì) 凋亡 Bcl-2 Bax Caspase-3
【學(xué)位授予單位】：華北理工大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R338.25
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 英文縮略表10-11
• 引言11-13
• 第1章 實驗研究13-47
• 1.1 材料與方法13-27
• 1.1.1 主要試劑13
• 1.1.2 主要實驗儀器13-14
• 1.1.3 實驗動物的選擇14
• 1.1.4 實驗大鼠分組14-15
• 1.1.5 全饑餓大鼠模型的復(fù)制15
• 1.1.6 標(biāo)本的采集、處理及HE染色15-17
• 1.1.7 皮質(zhì)區(qū)凋亡神經(jīng)細胞的檢測17-19
• 1.1.8 RT-PCR法檢測皮質(zhì)區(qū)Bcl-2、Bax、Caspase-3 三種因子mRNA的表達情況19-21
• 1.1.9 Western blot方法檢測皮質(zhì)區(qū)Bcl-2、Bax、Caspase-3 三種因子蛋白的表達情況21-26
• 1.1.10 干濕比重法26-27
• 1.1.11 統(tǒng)計學(xué)分析27
• 1.2 結(jié)果27-36
• 1.2.1 大鼠一般行為觀察及體重變化27-28
• 1.2.2 皮質(zhì)區(qū)HE染色形態(tài)學(xué)比較結(jié)果28-30
• 1.2.3 各組大鼠皮質(zhì)區(qū)神經(jīng)細胞凋亡情況30-32
• 1.2.4 大腦皮質(zhì)區(qū)在全饑餓狀態(tài)下Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA表達結(jié)果32-34
• 1.2.5 大腦皮質(zhì)區(qū)在全饑餓狀態(tài)下Bcl-2、Bax、Caspase-3 蛋白表達結(jié)果34-36
• 1.2.6 大鼠腦組織含水量的變化36
• 1.3 討論36-42
• 1.3.1 全饑餓大鼠動物模型的制備37
• 1.3.2 全饑餓狀態(tài)對大鼠一般狀況及體重的影響37-38
• 1.3.3 全饑餓狀態(tài)對大鼠皮質(zhì)區(qū)神經(jīng)細胞凋亡的影響38-39
• 1.3.4 全饑餓狀態(tài)下Bcl-2、Bax、Caspase-3 三種因子在皮質(zhì)凋亡中的調(diào)控作用39-42
• 1.3.5 全饑餓狀態(tài)對大鼠腦組織重量的影響42
• 1.4 小結(jié)42
• 參考文獻42-47
• 第2章 綜述47-62
• 2.1 凋亡概述47-48
• 2.2 細胞凋亡信號傳導(dǎo)途徑48-49
• 2.2.1 死亡受體信號通路48
• 2.2.2 線粒體途徑48-49
• 2.2.3 內(nèi)質(zhì)網(wǎng)通路49
• 2.3 Bcl-2 蛋白家族與細胞凋亡49-52
• 2.3.1 Bcl-2 蛋白家族的分類、結(jié)構(gòu)與功能49-51
• 2.3.2 Bcl-2 蛋白家族在細胞凋亡中的調(diào)控機制51-52
• 2.4 Caspase蛋白與細胞凋亡52-53
• 2.4.1 Caspase蛋白家族的分類、結(jié)構(gòu)與功能52-53
• 2.4.2 Caspase-3 在細胞凋亡中的作用機制53
• 2.5 Bcl-2、Bax、Caspase-3 三者在細胞凋亡中的相互作用關(guān)系53-55
• 2.5.1 Bcl-2、Bax蛋白間的相互作用關(guān)系53-54
• 2.5.2 Bcl-2、Bax蛋白表達能夠作為Caspase-3 的上游調(diào)控因素54-55
• 2.5.3 Caspase-3 亦能夠作為bcl-2 的上游調(diào)控因素55
• 2.6 小結(jié)55
• 參考文獻55-62
• 結(jié)論62-63
• 致謝63-64
• 導(dǎo)師簡介64-65
• 作者簡介65-66
• 學(xué)位論文數(shù)據(jù)集66

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前2條

1 方敏,王曉東;細胞凋亡的線粒體通路[J];北京大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版);2002年01期

2 謝靜濤,唐晉;饑餓狀態(tài)對注意力的影響[J];湖南中醫(yī)學(xué)院學(xué)報;2004年03期

  本文關(guān)鍵詞：全饑餓對腦皮質(zhì)細胞凋亡及相關(guān)因子表達的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：283481