目的:探索一種新型移植靜脈再狹窄人鼠嵌合模型,為冠狀動(dòng)脈旁路移植術(shù)后移植靜脈再狹窄的研究提供可靠的動(dòng)物模型。方法:隨機(jī)選擇18只F344RG大鼠,將其分為3組,每組6只。應(yīng)用改良套管法建立模型并于術(shù)后第7(T1)、28(T2)、84(T3)天預(yù)設(shè)時(shí)間點(diǎn)行超聲檢查并處死,取出移植靜脈,行HE染色并測(cè)定內(nèi)膜增厚程度,免疫組化染色檢測(cè)α-SMA表達(dá)及分布情況,Western-Blot檢測(cè)mTORC1及mTORC2自身和下游蛋白表達(dá)變化情況。結(jié)果:18只受體大鼠有15只存活至預(yù)期時(shí)間且無血運(yùn)障礙表現(xiàn)。3只受體大鼠因凝血及感染原因死亡。HE染色可見移植靜脈內(nèi)膜增生并隨時(shí)間而加重,內(nèi)膜/(中膜+外膜)比例上升;免疫組化可見α-SMA表達(dá)增加并且分布更加密集;WB分析可見Rictor、PKC-α在T1至T3表達(dá)增高并高于對(duì)照組,Raptor、eIF4e在T1時(shí)間點(diǎn)表達(dá)降低、T2、T3恢復(fù)正常水平。結(jié)論:通過實(shí)驗(yàn)建立了一種新型移植靜脈再狹窄人鼠嵌合模型,并對(duì)mTOR通路部分蛋白進(jìn)行分析。為今后進(jìn)行mTOR通路相關(guān)研究提供一種動(dòng)物模型。
【學(xué)位單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位年份】：2019
【中圖分類】：R654.2;R-332
【部分圖文】：

雷帕霉素復(fù)合物相關(guān)的結(jié)構(gòu)［２７１。ｍＴＯＲＣｌ和２均響應(yīng)生長(zhǎng)因子而被激活。ＡＫＴ活化通過抑逡逑制ＴＳＣ復(fù)合物刺激ｍＴＯＲＣｌ活化，導(dǎo)致ｍＴＯＲＣｌ去阻遏。作為ｍＴ０ＲＣ２的底物，ＡＫＴ逡逑還起到在兩個(gè)ＴＯＲＣ復(fù)合物之間建立反饋環(huán)的作用。圖２闡述了邋ｍＴＯＲＣｌ和２下游的主要逡逑途徑。逡逑ｍＴＯＲＣｌ維持合成代謝過程的平衡，包括核糖體生物合成和核苷酸，脂質(zhì)逡逑和蛋白質(zhì)的產(chǎn)生，其分解代謝過程包括細(xì)胞周期停滯，細(xì)胞死亡和自噬。由逡逑ｍＴＯＲＣｌ活化誘導(dǎo)的核苷酸產(chǎn)生包括通過磷酸化ｐ７０Ｓ６Ｋ和ＡＴＦ４從頭合成嘧啶逡逑和嘌呤。具體而言，Ｐ７０Ｓ６Ｋ激活ＣＡＤ（氨基甲酰磷酸合成酶２，天冬氨酸轉(zhuǎn)氨甲逡逑３逡逑

取邋２０Ｇ邋ｌ．ｌｍｍｘ３０ｍｍ邋ＢＤ邋Ｉｎｔｉｍａ邋ＩＩ邋ＰＬＵＳ邋靜脈留置針，外徑邋１．３ｍｍ，內(nèi)徑逡逑１．１ｍｍ，抽出內(nèi)芯，剪�。保玻悖�，修剪一端呈楔形，浸沒于肝素生理鹽水中備用。逡逑如圖３所示，按示意圖中步驟，用精細(xì)剪刀將遠(yuǎn)心端血管夾上緣５ｍｍ處的逡逑大鼠主動(dòng)脈前壁剪開約０．８ｍｍ，將楔形端插入破口并將整根處理后的靜脈留置逡逑針插入主動(dòng)脈腔內(nèi)。以ＰＲＯＬＥＮＥ邋８－０邋Ｗ２７７７邋ＥＴＨＩＣＯＮ縫線縫合破口，并將留逡逑置針向下移動(dòng)，使其遠(yuǎn)端位于主動(dòng)脈縫合口以下。在距離留置針兩端約３＿處逡逑用ＭＥＲＳＩＬＫ４－０邋Ｗ５０１Ｈ邋ＥＴＨＩＣＯＮ縫線將主動(dòng)脈與留置針一同捆扎，固定留置逡逑針的位置。用精細(xì)剪刀在手術(shù)段血管正中連同主動(dòng)脈及留置針一并剪斷。此時(shí)逡逑兩斷端會(huì)回縮，兩者將分離約５－６ｍｍ。將斷端的主動(dòng)脈翻折呈“袖套”樣，并用逡逑１０逡逑

圖４．邋Ａ所示為移植靜脈位于受體中；Ｂ為取下的移植靜脈逡逑

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