【摘要】：目的:建立小劑量電離輻射小鼠模型;觀察多酚提取物對小劑量輻射損傷的防護作用及多酚類化合物是否具有協同抗輻射作用。方法:實驗1.小劑量輻射小鼠模型的建立與評價8周齡清潔級昆明雄性小鼠32只,隨機分為空白對照組(NC組)、低劑量輻射組(L組)、中劑量輻射組(M組)、高劑量輻射組(H組)共4組,每組8只,空白對照組不輻射,低、中、高輻射劑量組分別采用輻射劑量率為0.04Gy/h/d、0.08Gy/h/d、0.12Gy/h/d的低劑量X射線照射,連續(xù)7天。試驗周期內觀察各組小鼠的外觀和整體狀況改變;輻射前后對各組小鼠稱重并記錄;輻射結束后立即處死動物,取肝臟、脾臟稱重并計算臟器指數;取血檢測小鼠外周血細胞數量;分離左側股骨檢測骨髓有核細胞數量;試劑盒檢測血清超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量。實驗2.多酚提取物對小劑量輻射防護作用的實驗研究8周齡清潔級昆明雄性小鼠40只,隨機分為空白對照組(NC組)、輻射模型組(R組)、藍莓提取物干預組(B組)、葡萄籽提取物干預組(G組)、藍莓提取物+葡萄籽提取物復合干預組(M組)共5組,每組8只,實驗周期共21天。NC組不輻射,每日蒸餾水灌胃,灌胃劑量5ml/(kg bw·d),共21天;R組每日蒸餾水灌胃,連續(xù)14天,劑量同空白對照組,第15天起采用輻射劑量率為0.08Gy/h/d的X射線連續(xù)照射7天,累計輻射劑量0.56Gy;B組采用藍莓提取物混懸液灌胃,劑量600mg/(kg bw/d),G組采用葡萄籽提取物混懸液灌胃,劑量450mg/(kg bw/d);M組采用藍莓提取物復合葡萄籽提取物混懸液灌胃,灌胃劑量600mg+450mg/(kg bw/d);三個干預組連續(xù)灌胃14天后開始X線輻射,同時繼續(xù)干預物灌胃,輻射劑量率為0.08Gy/h/d,連續(xù)照射7天,累計輻射劑量0.56Gy。實驗周期內觀察各組小鼠的外觀和整體狀況,每3天對各小組小鼠稱重并記錄,實驗結束后立即處死動物,取腦、肝臟、胸腺、脾臟稱重并計算臟器指數;取血檢測外周血細胞數量;分離左側股骨檢測骨髓有核細胞數量;試劑盒檢測血清、肝、胸腺、脾臟組織勻漿SOD活性、MDA含量;試劑盒檢測血清IL-2、IL-6濃度;試劑盒檢測血清AST、ALT活力;取肝臟、脾臟、胸腺組織,HE染色,光學顯微鏡觀察病理變化。結果:(1)照射后7天,L組小鼠體質量明顯低于NC組以及M、H組(P0.05);M、H組小鼠脾臟指數顯著低于NC組(P0.01)和L組(P0.05);不同劑量輻射組小鼠外周血WBC和骨髓有核細胞數量均較NC組顯著降低(P0.05,P0.01);與NC組比較,M組小鼠血清MDA含量顯著升高(P0.05)、SOD活性顯著降低(P0.05)。(2)與輻射模型組比較,三個干預組小鼠的外周血白細胞(WBC)數量、紅細胞(RBC)數量、血小板(PLT)數量均升高,藍莓組、葡萄籽組、復合物組顯著升高WBC數量(P0.05),復合物組升高較明顯,且比藍莓組更顯著(P0.05);藍莓組、葡萄籽組和復合物組均顯著升高RBC數量(P0.05),且復合物組較藍莓組、葡萄籽組顯著升高(P0.05),葡萄籽組、復合物組顯著升高血紅蛋白(HGB)含量(P0.05),復合物組較明顯;與輻射模型組比較,葡萄籽組、復合物組顯著升高骨髓有核細胞數量(P0.05);與輻射模型組比較,藍莓組、復合物組對肝指數有升高趨勢,復合物組較明顯,但無統(tǒng)計學差異(P0.05),葡萄籽組、復合物組均顯著升高腦指數(P0.05),藍莓組也有上升趨勢,三個干預組均顯著升高胸腺指數(P0.05),復合物組最明顯,三個干預組對脾臟指數也有升高趨勢,但無統(tǒng)計學差異(P0.05);與輻射模型組比較,三組干預組均顯著升高血清、肝臟、胸腺、脾臟中的SOD活性、降低MDA含量(P0.05);與輻射模型組比較,三組干預組均顯著升高血清IL-2濃度,降低IL-6濃度(P0.05),復合物組效果最為明顯;與輻射模型組比較,三組干預組均顯著降低血清AST、ALT活力;與輻射模型組比較,三組干預組不同程度的改善小鼠肝臟受損程度,復合物最明顯;復合物組對小鼠脾臟損傷有一定程度改善,藍莓組、葡萄籽組未見顯著改善;三組干預組不同程度的改善小鼠胸腺受損程度。結論:(1)小劑量輻射小鼠模型的最佳造模方法為輻射劑量率0.08 Gy/h/d、連續(xù)輻射7天,累積輻射劑量0.56 Gy。(2)多酚提取物對小劑量輻射損傷具有良好的保護作用;藍莓花色苷、葡萄籽原花青素具有一定的協同作用。
【學位授予單位】：軍事科學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R818;R-332
【圖文】：

圖 1.1 小劑量輻射對小鼠肝指數的影響(n=8)圖 1.2 小劑量輻射對小鼠脾指數的影響 NC 組比較，aP＜0.05，bP＜0.01；與 L 組比較，cP＜0.05；n=劑量輻射小鼠外周血細胞數量的變化

第 9頁圖 1.2 小劑量輻射對小鼠脾指數的影響（與 NC 組比較，aP＜0.05，bP＜0.01；與 L 組比較，cP＜0.05；n=8 小劑量輻射小鼠外周血細胞數量的變化1 WBC 數量：與對照組比較，三個劑量組 WBC 數量均顯著降低統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。2 RBC 數量、HGB 濃度：與對照組比較，三個劑量組 RBC 數學差異（P＞0.05）；組間比較無統(tǒng)計學差異（P＞0.05）3 PLT 數量：與對照組比較，低劑量組 PLT 數量有上升趨勢降低趨勢，但均無統(tǒng)計學差異（P＞0.05）；組間比較無統(tǒng)

BC（109/L） RBC（1012/L） HGB（g/L） PLT（1.03±1.13 7.90±1.11 118.88±14.39 408.25±.55±0.88a7.60±0.45 112.38±5.29 458.75±.94±0.96a7.65±0.29 116.50±6.05 385.13±.13±0.53a7.17±0.32 110.63±4.66 403.00±aP＜0.05劑量輻射小鼠骨髓有核細胞（BMNC）數量的變化組比較，三個劑量組骨髓有核細胞數量均顯著降低，差異有統(tǒng)）；組間比較無統(tǒng)計學差異（P＞0.05）

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本文編號：2771043