發(fā)布時間：2020-06-15 07:06

【摘要】：研究目的探究CD200-CD200R1信號在自發(fā)性腦出血中發(fā)生的變化及其起到的作用,尤其是這一信號與血腦屏障的關(guān)系,以及通過給予CD200Fc藥物的方式進行干預,研究這一信號對于神經(jīng)功能預后的作用。研究方法采用尾動脈采血,自體血注射法來構(gòu)建小鼠腦出血模型,所有小鼠品系均為C57/BL6,體重20至24克。在建模后6小時、12小時、24小時、72小時取腦組織,用蛋白質(zhì)印記法(Western Blot)測出不同時間點CD200R和CD200的表達量的變化。選擇它們改變最顯著的時間點作為后續(xù)實驗選擇的關(guān)鍵時間點。在腦出血建模后關(guān)鍵時間點,用免疫熒光法對CD200R分別與小膠質(zhì)細胞、神經(jīng)元、星形膠質(zhì)細胞的標記物進行共定位,以驗證在腦出血后CD200R的表達部位和其起作用的細胞。在干預實驗中,將小鼠隨機分成對照組、腦出血組、CD200Fc治療組、普通IgG對照組,在建模后1小時按每克體重0.08微克的劑量給藥。在建模后第24小時用依文思藍法測各組小鼠血腦屏障的滲漏程度。此外,按以上四個分組建模和給藥后,在建模后第24小時測各組小鼠的加西亞評分,連續(xù)一周測量各組小鼠的各項長期行為學,包括失足率、轉(zhuǎn)角試驗、疲勞棒試驗。所有數(shù)據(jù)采用GraphPad Prism v.6.02進行統(tǒng)計分析,并且用均數(shù)±標準差(mean±SD)表示,兩組間比較采用t檢驗,多組間比較采用單因素方差分析,多重比較用Tukey。P0.05為差異有統(tǒng)計學意義。研究結(jié)果(1)小鼠腦出血后腦內(nèi)CD200R1表達量減少,在24小時降到最低并且在72小時回升;CD200表達量在24小時明顯降低;(2)小鼠腦內(nèi)CD200R1主要表達在小膠質(zhì)細胞上,而星形膠質(zhì)細胞和神經(jīng)元上幾乎沒有表達;(3)腦出血后給予CD200Fc能在24小時之時檢測到對小鼠血腦屏障的保護;(4)腦出血后給予CD200Fc能在短期和長期均顯示出對小鼠的神經(jīng)功能學改善。結(jié)論小鼠腦內(nèi)CD200R主要表達在小膠質(zhì)細胞上,并且在腦出血后其表達量減少,至24小時達到最低,腦出血后一小時給予CD200Fc治療可以減輕第24小時的血腦屏障滲漏,并對近、遠期神經(jīng)功能學產(chǎn)生改善作用。
【學位授予單位】：浙江大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2019
【分類號】：R743.34;R-332
【圖文】：

浙江人學碩士學位論文邐正義結(jié)栗逡逑２結(jié)果逡逑２．１腦出血后ＣＤ２００和ＣＤ２００Ｒ１的表徸量逡逑為了邋了解腦出血后ＣＤ２００／ＣＤ２００Ｒ１的自然變化，我們用免疫印跡法檢測了逡逑腦出血后各個時間點的小鼠腦姐織中ＣＤ２００和ＣＤ２００Ｒ１的表達水平。結(jié)果顯示逡逑ＣＤ２００的表達在小鼠腦出血后２４ｈ降低（與對照組比ｐ＜０．０５，邋ＦｉｇｕｒｅｌＢ），而逡逑ＣＤ２００Ｒ１的表達自腦出血后６邋ｈ即開始持續(xù)降低（與對照組比ｐ＜邋０．０５，Ｆｉｇｕｒｅ逡逑１Ａ），在第２４小時達到最低值，并于７２ｈ觀察到明顯的回升（與２４小時組比ｐ逡逑＜０．０５，邋Ｆｉｇｕｒｅ邋１Ａ）接近假手術(shù)組的水平。每一組各使用了邋４只小鼠。逡逑

浙江人‘７：碩丨．？學位論義邐ｉｌ－：文２．２邋ＣＤ２００Ｒ１在血腫周圍組織的表達定位逡逑為了解ＣＤ２００Ｒ１在小鼠腦內(nèi)表達于何種細胞，分別對來自假手術(shù)組和血組的小鼠腦組織切片樣本進行熒光共定位染色，著重觀察基底節(jié)區(qū)，即血圍區(qū)域。共定位染色的結(jié)果顯示ＣＤ２００Ｒ１在對照組和腦出血組的小膠質(zhì)細均有表達（Ｆｉｇｕｒｅ２Ａ－２Ｂ），而在星形膠質(zhì)細胞和神經(jīng)元上沒有檢測到ＣＤ２０表達ＣＦｉｇＵｒｅ２Ｃ－２Ｄ）。在假手術(shù)組中，小肢質(zhì)細胞上的Ｉｂａ－１信號呈現(xiàn)靜息胞體小樹突多的形態(tài)，且ＣＤ２００Ｒ１信號與Ｉｂａ－１重合范圍比例較大；而在腦后２４小時的小鼠腦組織切片樣本中，Ｉｂａ－１陽性小膠質(zhì)細胞呈現(xiàn)出激活狀態(tài)有的胞體大而突起少的形態(tài)，此外，不僅ＣＤ２００Ｒ１陽性的細胞較少，ＣＤ２０與Ｉｂａ－１重合的范圍也較小。假手術(shù)組和腦出血組各使用了邋４只小鼠。逡逑Ａ邐Ｓｈａｍ邐邋Ｂ邋邐ＩＣＨ邋２４ｈ邐逡逑

【相似文獻】

相關(guān)碩士學位論文 前1條

1 樂辰升;CD200FC通過保護血腦屏障來改善腦出血后的神經(jīng)功能[D];浙江大學;2019年

本文編號：2714070