【摘要】：第一部分 經(jīng)尿道留置膀胱異物加注射產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌建立尿路感染大鼠模型目的:探究采用經(jīng)尿道留置膀胱異物加注射ESBLs大腸埃希菌的方法建立尿路感染大鼠模型的可行性。方法:30只雌性SD大鼠隨機(jī)分為空白組,無異物7d、14d組,異物7d、14d組,每組6只。異物組經(jīng)尿道置入異物加注射ESBLs大腸埃希菌菌液,無異物和空白組分別注入等量菌液和無菌生理鹽水。流式細(xì)胞學(xué)檢測(cè)外周血白細(xì)胞及中性粒數(shù),尿液行細(xì)菌培養(yǎng)計(jì)數(shù)及耐藥鑒定,腎臟HE染色。結(jié)果:異物7d、14d組尿液細(xì)菌陽性率為100%;無異物7d組尿液細(xì)菌陽性率為33.3%,無異物14d組尿液培養(yǎng)無細(xì)菌;異物7d組腎臟HE病理可見明顯炎性變化,異物14d組腎小球周圍可見少許纖維組織;無異物7d組尿液細(xì)菌培養(yǎng)陽性的大鼠腎臟可見有少許的炎癥細(xì)胞浸潤,無異物14d組腎臟未見明顯炎癥變化;異物7d、14d組中性粒細(xì)胞百分率較無異物組和空白組均增高(P0.05);異物7d組白細(xì)胞數(shù)較無異物7d組和空白組增高(P0.05)。結(jié)論:經(jīng)尿道留置膀胱異物加注射ESBLS大腸埃希菌可建立高成功率、穩(wěn)定的尿路感染大鼠模型。第二部分 中藥方劑對(duì)產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌致大鼠復(fù)雜性尿路感染的作用目的:探究中藥方劑對(duì)產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌所致復(fù)雜性尿路感染的作用及其可能機(jī)制,為臨床中藥治療ESBLs大腸埃希菌復(fù)雜性尿路感染提供實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。方法:66只雌性SD大鼠隨機(jī)分為空白組5只、阿莫西林克拉維酸鉀組5只、模型組8只、左氧氟沙星組8只、八正散組8只、左氧氟沙星+扶正清熱通淋組8只、八正散(前7d)+扶正清熱通淋組(后7d)8只、扶正清熱通淋(低、高劑量)組各8只;空白組注入無菌生理鹽水,其余各組經(jīng)尿道置入異物后注射等量產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌菌液;治療2周后處死取材,流式細(xì)胞學(xué)檢測(cè)外周血白細(xì)胞數(shù)及中性粒百分比(NEUT%),尿素酶-谷氨酸脫氫酶酶法檢測(cè)外周血尿素氮(BUN)的濃度,肌氨酸氧化酶法檢測(cè)外周血肌酐(CREA)的濃度,ELISA法檢測(cè)外周血C反應(yīng)蛋白(CRP)、CD4+、CD8+及尿液SIg A、NAG分子的濃度,尿液行細(xì)菌培養(yǎng),腎臟HE染色。結(jié)果:NEUT%和CRP:空白組、各治療組(左氧氟沙星組除外)明顯低于模型組(P0.05);尿液細(xì)菌培養(yǎng)陽性率:空白組、阿莫西林克拉維酸鉀組、左氧氟沙星+扶正清熱通淋組、左氧氟沙星組陽性率分別為0、0、40%、80%,余各組陽性率均為100%,其細(xì)菌計(jì)數(shù)明顯低于模型組;BUN:空白組及各治療組均低于模型組;CREA:空白組和各治療組均低于模型組(左氧氟沙星組除外);尿SIg A:阿莫西林克拉維酸鉀組、左氧氟沙星+扶正清熱通淋組、八正散組、扶正清熱通淋組低劑量組均高于模型組,其中八正散+扶正清熱通淋組明顯增高(P0.05);尿NAG:空白組及各治療組(左氧氟沙星除外)均低于模型組(P0.05);血清CD4分子:空白組和各治療組均低于模型組,其中空白組、阿莫西林克拉維酸鉀組、八正散+扶正清熱通淋組、扶正清熱通淋高劑量組、左氧氟沙星+扶正清熱通淋組較明顯(P0.05),與空白組比較,阿莫西林克拉維酸鉀和八正散+扶正清熱通淋組較空白組稍高,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),余各組較空白組升高(P0.05);血清CD8分子:空白組和各治療組均高于模型組,其中空白組、阿莫西林克拉維酸鉀組、八正散+扶正清熱通淋組、扶正清熱通淋低高劑量組、左氧氟沙星+扶正清熱通淋組明顯高于模型組(P0.05),與空白組比較,阿莫西林克拉維酸鉀和八正散+扶正清熱通淋組較空白組稍低,但無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05),余各組較模型組降低(P0.05);腎臟HE病理:模型組腎臟可見大量炎癥細(xì)胞,少許纖維組織增生,大量集合管上皮細(xì)胞壞死、脫落、細(xì)胞管形成。左氧氟沙星組較模型組未見明顯好轉(zhuǎn)。左氧氟沙星+扶正清熱通淋組腎臟局部近端小管腔擴(kuò)張,未見明顯炎癥。扶正清熱通淋低劑量組腎臟可見較多炎癥細(xì)胞,少許集合管壞死、脫落、管型形成。八正散組、八正散+扶正清熱通淋組、扶正清熱通淋高劑量組局部可見少許炎癥細(xì)胞,局部近端小管腔擴(kuò)張,上皮細(xì)胞扁平�？瞻捉M和阿莫西林克拉維酸鉀組未見明顯異常。結(jié)論:1、中藥方劑能減輕大鼠復(fù)雜性尿路感染的全身和局部炎癥;2、中藥方劑可能有調(diào)節(jié)復(fù)雜性尿路感染大鼠免疫功能及保護(hù)腎功能的作用;3、中藥方劑可能逆轉(zhuǎn)細(xì)菌耐藥而讓不敏感抗生素重新對(duì)耐藥細(xì)菌起有效治療作用。
【圖文】：

西 南 醫(yī) 科 大 學(xué) 碩 士 學(xué) 位 論 文插管內(nèi)流出；第三步：自制螺旋形導(dǎo)管沿插管官腔螺旋進(jìn)入 1-2 圈（長度約 1.5cm）后用導(dǎo)絲推入膀胱（見圖 1-1f、g），可見清涼尿液自插管官腔流出，留置異物成功（見圖 1-1h）；然后，緩慢依次拔除導(dǎo)管及插管。最后，無菌操作將直徑 1mm 導(dǎo)管插入各組大鼠膀胱，無異物和異物組用 1ml無菌注射器針頭插入導(dǎo)管腔內(nèi)緩慢注入約1.5X108CFU/ml產(chǎn)ESBLs大腸埃希菌菌液約 0.5ml，空白組注入等量的無菌生理鹽水；迅速拔除導(dǎo)管同時(shí)用鑷子夾閉尿道防止菌液溢出，細(xì)線結(jié)扎尿道口，2h 后松開，，恢復(fù)正常飲食。

圖 1- 1 鏡下觀察腎臟病理改變（HE×100）注：a：空白組； b：無異物 7d 組；c：無異物 14d 組；d：異物 7d 組；e：異物 14d 組；討 論可用于尿路感染模型的動(dòng)物包括小鼠、大鼠、兔、狗、豬等。其中，大鼠個(gè)體適中，操作方便，可以從尿道或直接腹腔內(nèi)注射細(xì)菌或置入異物，由于泌尿道解剖特點(diǎn)，易發(fā)生尿液自發(fā)性輸尿管膀胱反流，注射細(xì)菌同時(shí)加夾閉尿道口的方法制作成機(jī)械性的膀胱內(nèi)靜水壓增高，來造成逆行性感染，因而更適用于尿路感染動(dòng)物模型制備[20]。但既往的造模方式，尿路感染的成功率較低，且與臨床真實(shí)的感染途徑和類型差異較大。本模型模擬臨床常見的結(jié)石、異物滯留（支架管、尿管等）等原因?qū)е碌膹?fù)雜性尿路
【學(xué)位授予單位】：西南醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R691.3;R-332

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10 蔣沁p

本文編號(hào)：2706122