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CGRP對人牙周膜干細胞成骨分化和成血管能力影響的體外研究

發(fā)布時間:2020-06-02 15:50
【摘要】:目的探究在體外降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)對人牙周膜干細胞(hPDLSCs)成骨分化和成血管能力的影響。方法 hPDLSCs體外分離培養(yǎng),采用流式細胞術(shù)鑒定。給予不同濃度的CGRP處理,CCK-8法檢測CGRP對hPDLSCs增殖的影響。通過RT-PCR和Western blot法檢測堿性磷酸酶(ALP)、核心結(jié)合因子2(RUNX2)、骨鈣素(OCN)和血管內(nèi)皮生長因子(VEGF)的mRNA以及蛋白表達。在成骨誘導的第7天和第21天分別進行ALP染色和茜素紅染色以及半定量分析。結(jié)果從人牙周膜組織中分離培養(yǎng)的細胞經(jīng)鑒定符合間充質(zhì)干細胞的特征。與0 mol/L組比較,10~(-8) mol/L組、10~(-9) mol/L組的CGRP促進hPDLSCs的增殖(P0.05),同時使ALP、RUNX2、OCN、VEGF基因和蛋白的表達升高(P0.05)。ALP和茜素紅染色以及半定量分析結(jié)果顯示,與0 mol/L組比較,10~(-8) mol/L組、10~(-9) mol/L組的CGRP促進hPDLSCs成骨分化中ALP的表達及鈣結(jié)節(jié)的形成。結(jié)論特定濃度的CGRP促進hPDLSCs體外成骨分化和成血管能力。
【圖文】:

CGRP對人牙周膜干細胞成骨分化和成血管能力影響的體外研究


hPDLSCs體外培養(yǎng)

細胞,表面標志,流式細胞術(shù)


圖1 hPDLSCs體外培養(yǎng)表2 CCK-8檢測不同時間和組別的細胞OD值 ( x ˉ ±s) 天數(shù)(d) 0 mol/L 10-10 mol/L 10-9 mol/L 10-8 mol/L 10-7 mol/L 10-6 mol/L 1 0.540±0.040 0.547±0.035 0.566±0.036 0.588±0.005 0.565±0.031 0.530±0.021 2 1.079±0.010 1.072±0.030 1.145±0.006* 1.162±0.007* 1.089±0.035 0.795±0.020* 3 1.446±0.044 1.480±0.031 1.513±0.026* 1.544±0.037* 1.450±0.020 1.185±0.037* 4 1.856±0.028 1.849±0.015 1.904±0.032* 1.946±0.045* 1.821±0.026 1.390±0.016* 5 2.074±0.052 2.094±0.051 2.167±0.033* 2.253±0.045* 2.096±0.020 1.455±0.019* 與0 mol/L組比較:*P<0.05

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10 戴瑛;CGRP上調(diào)TGF-β/BMP-2表達促牙周膜成纖維細胞纖維鈣化的作用機制研究[D];第二軍醫(yī)大學;2013年

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本文編號:2693401

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