【摘要】：目前,性傳播是HIV最主要的傳播方式。其中男男性行為群體HIV感染率呈逐年上升趨勢(shì),該群體已成為HIV感染的高危人群。在男男同性性行為中,腸道黏膜成為HIV入侵宿主的主要門(mén)戶(hù)之一。由于腸道黏膜固有層中存在著大量的激活或處于靜息狀態(tài)的CD4+T淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞,腸道黏膜是HIV感染和復(fù)制的主要場(chǎng)所。由于HIV攻擊腸道內(nèi)激活的CD4+T淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞造成CD4+T淋巴細(xì)胞迅速耗竭和巨噬細(xì)胞釋放炎性因子,腸道黏膜受損,使微生物及其代謝產(chǎn)物易位(Microtranslocation)以及全身性慢性免疫激活(Systemic immune activation)。腸上皮細(xì)胞(Intestinal epithelial cells,IECs)是腸黏膜中最豐富的細(xì)胞類(lèi)型。通過(guò)自身緊密連接,腸上皮細(xì)胞在腸道中發(fā)揮重要的黏膜屏障功能。更重要的是,腸上皮細(xì)胞表達(dá)多種識(shí)別病原微生物的模式識(shí)別受體,啟動(dòng)天然免疫應(yīng)答,在腸道天然免疫抗病毒中發(fā)揮重要作用。本課題旨在研究腸上皮細(xì)胞參與抗HIV感染/復(fù)制的天然免疫機(jī)制。1.IECs表達(dá)功能性Toll樣受體3(Toll-like receptor 3,TLR3),并誘導(dǎo)產(chǎn)生I型和Ⅲ型干擾素(Interferon,IFN)作為重要的抗病毒模式識(shí)別受體之一,TLR3可有效地監(jiān)控病毒感染和復(fù)制。TLR3識(shí)別病毒雙鏈RNA(double-stranded RNA,dsRNA),啟動(dòng)細(xì)胞內(nèi)天然免疫應(yīng)答。我們使用dsRNA類(lèi)似物(PolyI:C),激活I(lǐng)ECs內(nèi)TLR3信號(hào)通路,研究其對(duì)IFN的誘導(dǎo)和調(diào)控。研究結(jié)果顯示,IECs表達(dá)所有能識(shí)別病毒感染的Toll樣受體(TLR3、TLR7、TLR8和TLR9)。但是,僅有TLR3激活能顯著誘導(dǎo)IFN信號(hào)通路,產(chǎn)生IFN-β和IFN-λ,這種TLR3誘導(dǎo)的IFN誘導(dǎo)表達(dá)和PolyI:C使用劑量和時(shí)間相關(guān)。其分子機(jī)制是:TLR3激活后上調(diào)了干擾素調(diào)節(jié)因子3(IFN regulatory factor,IRF3)和IRF7,這兩個(gè)因子促進(jìn)了Ⅰ型和Ⅲ型IFN表達(dá)。2.TLR3信號(hào)通路激活可誘導(dǎo)IECs自身表達(dá)多種抗病毒因子,并通過(guò)外泌體釋放我們的研究結(jié)果表明,IECs TLR3信號(hào)通路激活可誘導(dǎo)自身表達(dá)多種抗病毒因子,包括干擾素刺激基因(Interferon stimulate genes,ISGs):ISG15、ISG56、OAS-1、MxA、MxB、GBP5 和 Viperin 和限制 HIV 的微小 RNA(miRNA-17、miRNA-20、miRNA-28、miRNA-29a、miRNA-29b、miRNA-29c 和 miRNA-125b)。這些抗病毒因子包裹在IECs分泌的外泌體中,通過(guò)外泌體介導(dǎo)抗病毒天然免疫。3.TLR3激活的IECs培養(yǎng)上清(Supernant,SN)抑制HTV在巨噬細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制腸道黏膜固有層中富含巨噬細(xì)胞。由于這些細(xì)胞高表達(dá)HIV的輔助受體CCR5,它們對(duì)HIV具有高易感性。因此,我們使用巨噬細(xì)胞作為HIV體外感染細(xì)胞模型,研究IECs的抗病毒效應(yīng)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,TLR3激活的IECs培養(yǎng)上清可顯著地抑制HIV在巨噬細(xì)胞內(nèi)的復(fù)制。對(duì)其機(jī)制研究顯示,使用抗IFN-β和IFN-λ受體的中和抗體可抵消IECs SN介導(dǎo)的抗HIV效應(yīng);經(jīng)SN處理的巨噬細(xì)胞產(chǎn)生多種ISGs和HIV特異性限制因子,包括 ISG15,ISG56,MxA,MxB,OAS-1,OAS-2,Tetherin,A3F,A3G 和GBP5。此外,IECs分泌含有多種抗病毒因子的外泌體可被巨噬細(xì)胞攝取,這些因子參與IECsSN介導(dǎo)的抗HIV效應(yīng)。4.TLR3激活的IECs表達(dá)CC趨化因子(CC chemokines),抑制HIV進(jìn)入巨噬細(xì)胞我們的研究結(jié)果還表明:TLR3激活的IECs高表達(dá)CCR5的天然配體CC chemokines(MIP-1α,MIP-1β 和 RANTES),CC chemokines 競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合 HIV 輔助受體CCR5,降低HIV對(duì)巨噬細(xì)胞的感染性。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,加入TLR3激活的IECs培養(yǎng)上清預(yù)處理巨噬細(xì)胞,可顯著降低HIV進(jìn)入巨噬細(xì)胞后第一輪復(fù)制產(chǎn)物Strong-stop DNA表達(dá),進(jìn)而說(shuō)明TLR3激活的IECs表達(dá)CC chemokines,抑制HIV進(jìn)入巨噬細(xì)胞。
【圖文】：

３５００萬(wàn)人死亡。世界衛(wèi)生組織（Ｗｏｒｌｄ邋Ｈｅａｌｔｈ邋Ｏｒｇａｎｉｚａｔｉｏｎ，邋ＷＨＯ）數(shù)據(jù)顯示：截至逡逑２０１６年底，全球共有約３６７０萬(wàn)ＨＩＶ?jǐn)y帶者，其中成人約３４５０萬(wàn)，１５歲以下兒童約逡逑２１０萬(wàn)；２０１６年新X棧齲桑指腥靜±跡保福巴潁勞霾±跡保埃巴潁ㄍ跡保保�。栽x體義喜×饜械那蛑�，非洲祬�?guó)受到祿习响桩岓，２０１Ｙ�曖校玻擔(dān)叮巴潁齲桑指腥菊擼嫉餃義锨潁齲桑中路⒏腥咀蓯慕種�。男男性行为者、注射吸毒者、栽倗曼和茰O忮義媳棧肪持械娜嗽薄⑿怨ぷ髡嘸捌滏慰停約氨湫勻思撼晌齲桑指腥鏡鬧氐閎巳�，，估辶x霞樸校矗矗サ男路⒏腥痙⑸謖廡┤巳褐�。｝x桑止惴捍嬖謨?cè)嵭染者惦y骸⒕�、阴辶x系婪置諼鎩⑷櫓�、募s掛�、有神经症状的脑讬┋液中，其中以血液、精液、阴道钒櫫x廈諼鎦信ǘ茸罡摺Ｒ壞┣秩牖�，｝x桑種饕セ魅頌宓模茫模矗澹粵馨拖赴偷ズ司掊義鮮上赴�，病毒进入諒T┫赴�，繜合又]拗鰨模危林�，膸r韻�。辶x希常叮罰恚椋歟歟椋錚鑠義希穡澹錚穡歟邋澹睿錚麇澹澹螅簦椋恚幔簦澹溴澹簦镥澹猓邋澹歟椋觶椋睿玨澹鰨椋簦楨澹齲桑皺義希ǎ常板澹福矗插澹渝澹恚椋歟歟椋錚睿蒎義希保福恚椋歟歟椋錚鑠危卞澹希恚椋歟歟椋錚鑠義希穡澹錚穡歟邋澹睿澹鰨歟澹椋睿媯澹悖簦澹溴危齲桑鄭潁澹歟幔簦澹溴澹洌澹幔簦瑁簀義賢煎澹保卞澹玻埃保跺迥晷略鰣澹齲桑皺甯腥炯八勞鋈絲謔ㄒ藻澹校潁澹觶澹睿翦澹齲桑鄭澹簦澹螅翦澹幔睿溴澹簦潁澹幔翦澹幔歟歟澹玻埃保叮╁義希疲椋紓澹保卞澹危酰恚猓澹蟈澹錚駑澹穡澹錚穡歟邋澹睿澹鰨歟澹椋睿媯澹悖簦澹溴澹鰨椋簦楨澹齲

本文編號(hào)：2673594