發(fā)布時間：2024-11-22 16:33

　　【背景、目的】炎癥誘導(dǎo)的淋巴管生成是一種被廣泛接受的概念。在健康的成年人中,淋巴管系統(tǒng)是穩(wěn)定的。然而,在炎癥條件下淋巴管發(fā)生急性擴張。動脈粥樣硬化是一種慢性炎癥過程。在動脈粥樣硬化的早期階段,外膜淋巴管的密度隨著疾病的程度加重而增加,但具體機制尚不清楚。隨著研究的進展,淋巴管功能的激活一方面不僅干預(yù)著炎癥過程。另一方面,斑塊膽固醇的逆向轉(zhuǎn)運也依賴于淋巴管運輸。近期研究表明鞘氨醇-1-磷酸（S1P）不僅與動脈粥樣硬化的慢性炎癥過程密切相關(guān),而且還影響血管生成。因此,本論文的目的是探究S1P是否通過炎癥影響淋巴管的生成及其機制�！緦嶒灧椒ā浚�1）將人原代淋巴內(nèi)皮細胞（HLECs）放在含有10%胎牛血清（FBS）的DMEM中生長（5%CO₂,37℃）,并在第2代和第8代之間使用。在用試劑處理細胞之前,先將細胞放在含有1%FBS的DMEM中饑餓培養(yǎng)10 h。然后再將細胞與不同濃度的S1P（0、50、100、200和400 nM）共同孵育24 h。使用CCK-8法檢測細胞增殖、細胞劃痕法檢測細胞遷移以及基質(zhì)膠小管形成法檢測細胞小管形成。（2）不同濃度的S1P（0、50、100...

【文章頁數(shù)】：80 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
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英文摘要
英文縮略語索引
第1章 前言
第2章 實驗材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 細胞來源
        2.1.2 主要實驗試劑
        2.1.3 主要實驗儀器
        2.1.4 主要基本試劑的配制
    2.2 實驗方法
        2.2.1 實驗分組
        2.2.2 人淋巴內(nèi)皮細胞的培養(yǎng)
        2.2.3 人淋巴內(nèi)皮細胞的凍存
        2.2.4 細胞增殖、遷移和管形成檢測
        2.2.5 蛋白提取與Western blot
        2.2.6 ELISA
        2.2.7 Real-time PCR和 siRNA轉(zhuǎn)染
        2.2.8 免疫熒光實驗
        2.2.9 小鼠的飲食與治療
        2.2.10 S1P受體的阻斷和NF-κB的抑制
        2.2.11 免疫組化
        2.2.12 統(tǒng)計分析
第3章 實驗結(jié)果
    3.1 S1P對 HLEC增殖、遷移和管形成的影響
    3.2 不同濃度與時間的S1P對HLECs中炎癥因子分泌的影響
    3.3 炎癥因子對HLEC增殖、遷移和管形成的影響
    3.4 S1P受體在HLECs中的表達模式
    3.5 S1P通過S1PR1 介導(dǎo)HLECs促炎效應(yīng)
    3.6 IκBα/NF-κB通路對S1P誘導(dǎo)HLECs炎癥的影響
    3.7 S1PR1/NF-κB通路對S1P誘導(dǎo)HLEC管形成的影響
第4章 討論
第5章 結(jié)論
參考文獻
文獻綜述
    References
碩士期間的科研成果
致謝
附件



本文編號：4012489