【背景、目的】炎癥誘導(dǎo)的淋巴管生成是一種被廣泛接受的概念。在健康的成年人中,淋巴管系統(tǒng)是穩(wěn)定的。然而,在炎癥條件下淋巴管發(fā)生急性擴(kuò)張。動(dòng)脈粥樣硬化是一種慢性炎癥過(guò)程。在動(dòng)脈粥樣硬化的早期階段,外膜淋巴管的密度隨著疾病的程度加重而增加,但具體機(jī)制尚不清楚。隨著研究的進(jìn)展,淋巴管功能的激活一方面不僅干預(yù)著炎癥過(guò)程。另一方面,斑塊膽固醇的逆向轉(zhuǎn)運(yùn)也依賴于淋巴管運(yùn)輸。近期研究表明鞘氨醇-1-磷酸（S1P）不僅與動(dòng)脈粥樣硬化的慢性炎癥過(guò)程密切相關(guān),而且還影響血管生成。因此,本論文的目的是探究S1P是否通過(guò)炎癥影響淋巴管的生成及其機(jī)制�！緦�(shí)驗(yàn)方法】（1）將人原代淋巴內(nèi)皮細(xì)胞（HLECs）放在含有10%胎牛血清（FBS）的DMEM中生長(zhǎng)（5%CO₂,37℃）,并在第2代和第8代之間使用。在用試劑處理細(xì)胞之前,先將細(xì)胞放在含有1%FBS的DMEM中饑餓培養(yǎng)10 h。然后再將細(xì)胞與不同濃度的S1P（0、50、100、200和400 nM）共同孵育24 h。使用CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞增殖、細(xì)胞劃痕法檢測(cè)細(xì)胞遷移以及基質(zhì)膠小管形成法檢測(cè)細(xì)胞小管形成。（2）不同濃度的S1P（0、50、100...

【文章頁(yè)數(shù)】：80 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
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英文縮略語(yǔ)索引
第1章 前言
第2章 實(shí)驗(yàn)材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 細(xì)胞來(lái)源
        2.1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑
        2.1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器
        2.1.4 主要基本試劑的配制
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)分組
        2.2.2 人淋巴內(nèi)皮細(xì)胞的培養(yǎng)
        2.2.3 人淋巴內(nèi)皮細(xì)胞的凍存
        2.2.4 細(xì)胞增殖、遷移和管形成檢測(cè)
        2.2.5 蛋白提取與Western blot
        2.2.6 ELISA
        2.2.7 Real-time PCR和 siRNA轉(zhuǎn)染
        2.2.8 免疫熒光實(shí)驗(yàn)
        2.2.9 小鼠的飲食與治療
        2.2.10 S1P受體的阻斷和NF-κB的抑制
        2.2.11 免疫組化
        2.2.12 統(tǒng)計(jì)分析
第3章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 S1P對(duì) HLEC增殖、遷移和管形成的影響
    3.2 不同濃度與時(shí)間的S1P對(duì)HLECs中炎癥因子分泌的影響
    3.3 炎癥因子對(duì)HLEC增殖、遷移和管形成的影響
    3.4 S1P受體在HLECs中的表達(dá)模式
    3.5 S1P通過(guò)S1PR1 介導(dǎo)HLECs促炎效應(yīng)
    3.6 IκBα/NF-κB通路對(duì)S1P誘導(dǎo)HLECs炎癥的影響
    3.7 S1PR1/NF-κB通路對(duì)S1P誘導(dǎo)HLEC管形成的影響
第4章 討論
第5章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述
    References
碩士期間的科研成果
致謝
附件



本文編號(hào)：4012489