【摘要】：目的:觀察胱硫醚-β-合成酶(CBS)對(duì)坐骨神經(jīng)慢性縮窄性損傷(CCI)大鼠的疼痛閾值及核因子-κB(NF-κB)、蛋白激酶C(PKC)表達(dá)的影響,探討CBS在背根神經(jīng)節(jié)NF-κB痛覺調(diào)制中的作用及可能機(jī)制。方法:健康雄性SPF級(jí)SD大鼠36只(180~200g),鞘內(nèi)置管成功后,采用隨機(jī)數(shù)字表法分為3組(n=12):假手術(shù)組(Sham組),CCI模型組(CCI組)和CBS抑制劑AOAA組(CCI+AOAA組)。鞘內(nèi)置管第3d,CCI組和CCI+AOAA組建立神經(jīng)病理性疼痛模型(CCI模型);Sham組只游離坐骨神經(jīng)主干而不結(jié)扎。術(shù)后第1d起連續(xù)14d對(duì)大鼠進(jìn)行鞘內(nèi)注射給藥(每天一次,同一時(shí)間點(diǎn)):Sham組和CCI組鞘內(nèi)注射生理鹽水20μl;CCI+AOAA組鞘內(nèi)注射CBS抑制劑AOAA(10μg/kg)10μl,并用生理鹽水10μl進(jìn)行鞘內(nèi)沖洗。分別于術(shù)前1d,術(shù)后1、3、7、10、14d鞘內(nèi)注射后30min時(shí)測(cè)定各組大鼠的機(jī)械縮足閾值(MWT)和熱縮足潛伏期(TWL)。術(shù)后7d和14d時(shí)處死大鼠,取出脊髓L4-6的背根神經(jīng)節(jié),運(yùn)用免疫熒光染色技術(shù)觀察背根神經(jīng)節(jié)CBS和NF-κB p65的表達(dá)情況,Western Blot技術(shù)檢測(cè)各組大鼠背根神經(jīng)節(jié)CBS、p-NF-κB p65、p-PKC的表達(dá)情況。結(jié)果:與Sham組相比,CCI組大鼠術(shù)后1、3、7、10和14d時(shí)機(jī)械縮足閾值和熱縮足潛伏期下降(P0.05),且術(shù)后7d、14d時(shí)背根神經(jīng)節(jié)CBS、p-NF-κB p65、p-PKC的表達(dá)上調(diào)(P0.05);與CCI組相比,CCI+AOAA組大鼠術(shù)后1、3、7、10和14d時(shí)機(jī)械縮足閾值和熱縮足潛伏期增加(P0.05),且術(shù)后7d、14d時(shí)背根神經(jīng)節(jié)CBS、p-NF-κB p65、p-PKC的表達(dá)下調(diào)(P0.05)。結(jié)論:CCI大鼠背根神經(jīng)節(jié)CBS、p-NF-κB p65及p-PKC表達(dá)上調(diào)參與了神經(jīng)病理性疼痛的發(fā)生發(fā)展。內(nèi)源性H_2S合成酶CBS在大鼠CCI所致的神經(jīng)病理性疼痛中具有重要作用,可能通過調(diào)節(jié)背根神經(jīng)節(jié)PKC/NF-κB信號(hào)通路參與痛覺過敏的形成和維持。
【圖文】：

CCI+AOAA 組大鼠術(shù)側(cè)足趾并攏背屈、舔舐、懸空等神經(jīng)痛表現(xiàn)減輕。2 機(jī)械縮足閾值變化與 Sham 組比較，CCI 組大鼠術(shù)后 1、3、7、10、14d 時(shí)機(jī)械縮足閾值降低(P<0.05 14d 時(shí)下降至最低值 13.9±3.2g；與 CCI 組比較，CCI+AOAA 組大鼠術(shù)后 1、310、14d 時(shí)機(jī)械縮足閾值升高(P<0.05)，見表 2，圖 1。表 2 三組大鼠不同時(shí)點(diǎn)機(jī)械縮足閾值的變化(g，n=6， x ±s)別 術(shù)前 1d 術(shù)后 1d 術(shù)后 3d 術(shù)后 7d 術(shù)后 10d 術(shù)后 14dham 組 33.7±1.2 33.9±2.1 33.6±2.4 33.7±2.3 33.3±1.9 35.2±1.2CI 組 33.5±1.5 19.8±1.4#18.3±1.2#17.7±2.1#18.0±2.0#13.9±3.2#CI+AOAA 組 33.5±2.7 24.2±2.6*23.8±3.2*24.6±2.2*25.9±1.8*26.2±2.1*注：與 Sham 組比較，#P＜0.05；與 CCI 組比較，*P＜0.05

熱縮足潛伏期變化與 Sham 組比較，CCI 組大鼠在術(shù)后 1、3、7、10、14d 時(shí)熱縮足潛伏期降低(P<0.05)， 1d 達(dá)最低值 11.4±1.8s，術(shù)后 3、7、10、14d 時(shí)呈持續(xù)低水平(P<0.05)；與 CCI較，CCI+AOAA 組大鼠術(shù)后 1、3、7、10、14d 時(shí)熱縮足潛伏期升高(P<0.05)， 3，圖 2。表 3 三組大鼠不同時(shí)點(diǎn)熱縮足潛伏期的變化(s，n=6， x ±s)別 術(shù)前 1d 術(shù)后 1d 術(shù)后 3d 術(shù)后 7d 術(shù)后 10d 術(shù)后 14dam 組 24.0±2.4 23.9±2.0 24.1±1.7 25.1±2.2 24.2±1.7 24.2±1.8I 組 24.2±1.9 11.4±1.8#11.9±1.9#12.2±1.7#12.4±1.1#11.8±1.8#I+AOAA 組 24.1±1.9 15.7±1.3*18.0±2.1*18.6±1.6*19.4±1.5*19.5±1.4*注：與 Sham 組比較，#P＜0.05，與 CCI 組比較，*P＜0.05
【學(xué)位授予單位】：遵義醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2019
【分類號(hào)】：R338

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本文編號(hào)：2673418