發(fā)布時間：2019-11-05 22:04

【摘要】：目的:探討細胞因子信號轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制因子-1(suppressors of cytokine signaling1,SOCS1)拮抗物pJAK2多肽(氨基酸序列號為1001-1013)參與樹突狀細胞(dendritic cells,DCs)的體外誘導(dǎo)培養(yǎng)后對DCs抗腫瘤作用的影響。方法:采集健康人外周血,離心獲得單個核細胞,用重組人粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(recombinant human granulocyte-macrophage colony stimulating factor,rhGM-CSF)及重組人白細胞介素-4(recombinant human interleukin-4,rhIL-4)誘導(dǎo)DCs,第5天分為4組:單純DCs培養(yǎng)(對照)組、抗原負載(Lysate-DCs)組、多肽修飾(pJAK2-DCs)組和抗原與多肽共培養(yǎng)(Lysate+pJAK2-DCs)組,第6天各組加入腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-alpha,TNF-α)促成熟。倒置顯微鏡下觀察DCs形態(tài);FCM法檢測DCs表型;乳酸脫氫酶(lactate dehydrogenase,LDH)細胞毒實驗檢測各組細胞毒性T淋巴細胞(cytotoxic T lymphocyte,CTL)對胃癌細胞BGC-823的靶向殺傷作用;ELISA法檢測白細胞介素-12(interleukin-12,IL-12)和γ干擾素(interferon-γ,IFN-γ)的水平。結(jié)果:與未加入誘導(dǎo)劑組相比,各組均成功誘導(dǎo)出成熟DCs,均高表達CD80、CD83、CD86和人類白細胞DR抗原(human leukocyte antigen DR,HLA-DR),但以Lysate+pJAK2-DCs組的表達水平最高。在10:1～30:1的效靶比范圍內(nèi),CTL殺傷作用與效靶比呈正相關(guān)。當(dāng)效靶比為30:1時,對照組的CTL殺傷率達(19.77±2.34)%,低于其他3組(P0.01),而Lysate+pJAK2-DCs組較Lysate-DCs組及pJAK2-DCs組都高(P0.05)。Lysate+pJAK2-DCs組培養(yǎng)上清液中IL-12及IFN-γ的分泌水平明顯高于對照組(P0.01)。結(jié)論:SOCS1拮抗物pJAK2多肽(1001-1013)可增強DCs對胃癌細胞的抗原遞呈及特異性抗腫瘤作用。

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本文編號：2556368