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西咪替丁伍用弓形蟲ROP2蛋白免疫小鼠誘導免疫反應的初步研究

發(fā)布時間:2019-05-06 18:08
【摘要】:目的觀察西咪替丁伍用弓形蟲棒狀體蛋白2(ROP2)免疫小鼠誘導的免疫反應。方法 80只BALB/c小鼠隨機分為A組、B組、C組和D組,各組分別經(jīng)皮下注射PBS、弓形蟲ROP2蛋白+PBS、弓形蟲ROP2蛋白+福氏佐劑和弓形蟲ROP2蛋白+西咪替丁[200 mg/(kg.d)]免疫BALB/c小鼠,每次ROP2蛋白免疫劑量為100μg/只(200μl),共免疫3次,每次間隔2周。于首次免疫前和每次免疫后2周,采血分離血清。末次免疫后2周,每組小鼠隨機處死8只,無菌分離脾細胞,CCK-8法測定淋巴細胞增殖活性。流式細胞術檢測小鼠全血T細胞亞群。ELISA法檢測小鼠血清IgG抗體和γ干擾素(IFN-γ)水平。各組剩余12只小鼠經(jīng)腹腔感染弓形蟲RH株速殖子(5×104個/鼠),觀察攻擊感染后小鼠生存時間。結果末次免疫后2周,A、B、C和D組小鼠的血清IFN-γ水平分別為(659.750±239.962)、(872.750±197.011)、(1 600.750±480.680)和(1 494.375±451.655)pg/ml,血清特異性IgG抗體水平分別為0.504±0.078、0.592±0.160、1.068±0.111和1.046±0.147,脾細胞增殖活性分別為0.504±0.078、0.592±0.160、0.831±0.130和0.762±0.089,外周血CD4+/CD8+比值分別為0.504±0.078、0.592±0.160、0.831±0.130和0.762±0.089,C和D組均顯著高于A和B組(前3個指標,均P0.01;后者,均P0.05),D組與C組的差異均無統(tǒng)計學意義(P0.05)。各免疫組弓形蟲攻擊感染后,A、B、C和D組小鼠的生存時間中位數(shù)分別為96、108、132和132 h,C組和D組小鼠平均存活時間顯著長于A組和B組(P0.05),D組與C組的相比,差異無統(tǒng)計學意義(P0.05)。結論西咪替丁可增強ROP2蛋白誘導的細胞免疫和體液免疫反應。
[Abstract]:Objective to observe the immune response induced by cimetidine combined with Toxoplasma gondii rod protein 2 (ROP2) immunization in mice. Methods 80 BALB/c mice were randomly divided into three groups: group A, group B, group C and group D. ROP2 protein PBS, of Toxoplasma gondii was subcutaneously injected into each group. Toxoplasma gondii ROP2 protein adjuvant and Toxoplasma gondii ROP2 protein cimetidine [200 mg/ (kg.d)] were used to immunize BALB/c mice at a dose of 100 渭 g / mouse (200 渭 l) per ROP2 protein for 3 times at an interval of 2 weeks. Blood samples were collected before the first immunization and 2 weeks after each immunization. Two weeks after the last immunization, 8 mice in each group were killed at random, spleen cells were isolated aseptically, and lymphocyte proliferation activity was measured by CCK- 8 method. Flow cytometry was used to detect T lymphocyte subsets and Elisa was used to detect serum IgG antibody and interferon-緯 (IFN- 緯) levels in mice. The remaining 12 mice in each group were infected with Toxoplasma gondii RH strain Tachyzoites (5 脳 10 4 / mouse) through abdominal cavity to observe the survival time after infection. Results the serum IFN- 緯 levels in group A, B, C and D were (659.750 鹵239.962), (872.750 鹵197.011), (1 600.750 鹵480.680) and (1 494.375 鹵451.655) pg/ml, respectively at 2 weeks after the last immunization. The serum specific IgG antibody levels were 0.504 鹵0.078, 0.592 鹵0.160, 1.068 鹵0.111 and 1.046 鹵0.147, respectively. The proliferative activities of splenocytes were 0.504 鹵0.078, 0.592 鹵0.160, 0.831 鹵0.130 and 0.762 鹵0.089, respectively. The ratio of CD4 / CD8 in peripheral blood was 0.504 鹵0.078, 0.592 鹵0.160, 0.831 鹵0.130 and 0.762 鹵0.089, respectively. The ratios in C and D groups were significantly higher than those in A and B groups (P 0.01). In the latter group, there was no significant difference between), D group and C group (P0.05). The median survival time of mice in groups A, B, C and D were 96108132 and 132h, respectively. The average survival time of mice in groups C and D was significantly longer than that in groups A and B (P0.05), D group compared with group C, P 0.05, P < 0.01), and the median survival time of mice in group C and D was significantly longer than that in group A and group B (P0.05). There was no significant difference (P0.05). Conclusion cimetidine can enhance cellular and humoral immune responses induced by ROP2 protein.
【作者單位】: 蚌埠醫(yī)學院病原生物學教研室安徽省感染與免疫重點實驗室;安徽病原生物學省級實驗室人獸共患病安徽省重點實驗室安徽醫(yī)科大學病原生物學教研室;
【基金】:國家重點基礎研究發(fā)展規(guī)劃項目(973計劃)(No.2010CB530001) 安徽省教育廳重點資助項目(No.KJ2012A201)~~
【分類號】:R392

【參考文獻】

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本文編號:2470382

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