【摘要】：目的觀察西咪替丁伍用弓形蟲(chóng)棒狀體蛋白2(ROP2)免疫小鼠誘導(dǎo)的免疫反應(yīng)。方法 80只BALB/c小鼠隨機(jī)分為A組、B組、C組和D組,各組分別經(jīng)皮下注射PBS、弓形蟲(chóng)ROP2蛋白+PBS、弓形蟲(chóng)ROP2蛋白+福氏佐劑和弓形蟲(chóng)ROP2蛋白+西咪替丁[200 mg/(kg.d)]免疫BALB/c小鼠,每次ROP2蛋白免疫劑量為100μg/只(200μl),共免疫3次,每次間隔2周。于首次免疫前和每次免疫后2周,采血分離血清。末次免疫后2周,每組小鼠隨機(jī)處死8只,無(wú)菌分離脾細(xì)胞,CCK-8法測(cè)定淋巴細(xì)胞增殖活性。流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)小鼠全血T細(xì)胞亞群。ELISA法檢測(cè)小鼠血清IgG抗體和γ干擾素(IFN-γ)水平。各組剩余12只小鼠經(jīng)腹腔感染弓形蟲(chóng)RH株速殖子(5×104個(gè)/鼠),觀察攻擊感染后小鼠生存時(shí)間。結(jié)果末次免疫后2周,A、B、C和D組小鼠的血清IFN-γ水平分別為(659.750±239.962)、(872.750±197.011)、(1 600.750±480.680)和(1 494.375±451.655)pg/ml,血清特異性IgG抗體水平分別為0.504±0.078、0.592±0.160、1.068±0.111和1.046±0.147,脾細(xì)胞增殖活性分別為0.504±0.078、0.592±0.160、0.831±0.130和0.762±0.089,外周血CD4+/CD8+比值分別為0.504±0.078、0.592±0.160、0.831±0.130和0.762±0.089,C和D組均顯著高于A和B組(前3個(gè)指標(biāo),均P0.01;后者,均P0.05),D組與C組的差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。各免疫組弓形蟲(chóng)攻擊感染后,A、B、C和D組小鼠的生存時(shí)間中位數(shù)分別為96、108、132和132 h,C組和D組小鼠平均存活時(shí)間顯著長(zhǎng)于A組和B組(P0.05),D組與C組的相比,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。結(jié)論西咪替丁可增強(qiáng)ROP2蛋白誘導(dǎo)的細(xì)胞免疫和體液免疫反應(yīng)。
[Abstract]:Objective to observe the immune response induced by cimetidine combined with Toxoplasma gondii rod protein 2 (ROP2) immunization in mice. Methods 80 BALB/c mice were randomly divided into three groups: group A, group B, group C and group D. ROP2 protein PBS, of Toxoplasma gondii was subcutaneously injected into each group. Toxoplasma gondii ROP2 protein adjuvant and Toxoplasma gondii ROP2 protein cimetidine [200 mg/ (kg.d)] were used to immunize BALB/c mice at a dose of 100 渭 g / mouse (200 渭 l) per ROP2 protein for 3 times at an interval of 2 weeks. Blood samples were collected before the first immunization and 2 weeks after each immunization. Two weeks after the last immunization, 8 mice in each group were killed at random, spleen cells were isolated aseptically, and lymphocyte proliferation activity was measured by CCK- 8 method. Flow cytometry was used to detect T lymphocyte subsets and Elisa was used to detect serum IgG antibody and interferon-緯 (IFN- 緯) levels in mice. The remaining 12 mice in each group were infected with Toxoplasma gondii RH strain Tachyzoites (5 脳 10 4 / mouse) through abdominal cavity to observe the survival time after infection. Results the serum IFN- 緯 levels in group A, B, C and D were (659.750 鹵239.962), (872.750 鹵197.011), (1 600.750 鹵480.680) and (1 494.375 鹵451.655) pg/ml, respectively at 2 weeks after the last immunization. The serum specific IgG antibody levels were 0.504 鹵0.078, 0.592 鹵0.160, 1.068 鹵0.111 and 1.046 鹵0.147, respectively. The proliferative activities of splenocytes were 0.504 鹵0.078, 0.592 鹵0.160, 0.831 鹵0.130 and 0.762 鹵0.089, respectively. The ratio of CD4 / CD8 in peripheral blood was 0.504 鹵0.078, 0.592 鹵0.160, 0.831 鹵0.130 and 0.762 鹵0.089, respectively. The ratios in C and D groups were significantly higher than those in A and B groups (P 0.01). In the latter group, there was no significant difference between), D group and C group (P0.05). The median survival time of mice in groups A, B, C and D were 96108132 and 132h, respectively. The average survival time of mice in groups C and D was significantly longer than that in groups A and B (P0.05), D group compared with group C, P 0.05, P < 0.01), and the median survival time of mice in group C and D was significantly longer than that in group A and group B (P0.05). There was no significant difference (P0.05). Conclusion cimetidine can enhance cellular and humoral immune responses induced by ROP2 protein.
【作者單位】： 蚌埠醫(yī)學(xué)院病原生物學(xué)教研室安徽省感染與免疫重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;安徽病原生物學(xué)省級(jí)實(shí)驗(yàn)室人獸共患病安徽省重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室安徽醫(yī)科大學(xué)病原生物學(xué)教研室;
【基金】：國(guó)家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展規(guī)劃項(xiàng)目(973計(jì)劃)(No.2010CB530001) 安徽省教育廳重點(diǎn)資助項(xiàng)目(No.KJ2012A201)~~
【分類號(hào)】：R392

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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5 葉強(qiáng);弓形蟲(chóng)排泄分泌抗原的功能組分分析與鑒定[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2013年

6 孟鵬;半套式PCR技術(shù)檢測(cè)土壤中弓形蟲(chóng)的研究[D];甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué);2013年

7 蒲元華;雞感染弓形蟲(chóng)的臨床癥狀和病理變化觀察及在組織中分布[D];中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院;2014年

8 王娜;新型抗原傳遞載體在抗弓形蟲(chóng)病疫苗上的初步應(yīng)用[D];延邊大學(xué);2011年

9 王花;安徽省市售豬肉弓形蟲(chóng)感染陽(yáng)性率及基因分型的研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2012年

10 楊振;我國(guó)部分地區(qū)水生動(dòng)物弓形蟲(chóng)感染情況調(diào)查[D];南京農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

本文編號(hào)：2470382