【摘要】：目的探討慢病毒負(fù)載綠色熒光蛋白(GFP)對兔脂肪干細(xì)胞(rADSCs)轉(zhuǎn)染的可行性及穩(wěn)定性,為rADSCs組織工程化角膜上皮的研究提供可靠的體內(nèi)外示蹤方法。方法以慢病毒作為載體,采用不同感染復(fù)數(shù)(MOI)慢病毒將GFP基因?qū)雛ADSCs,熒光倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞轉(zhuǎn)染情況,應(yīng)用MTT法檢測慢病毒轉(zhuǎn)染對rADSCs細(xì)胞生長的影響,評價細(xì)胞毒性。結(jié)果當(dāng)MOI值為50、100、500時,rADSCs均可被成功轉(zhuǎn)染,120 h后轉(zhuǎn)染效率均可達(dá)50%以上。當(dāng)MOI值為50、100時,GFP-慢病毒對rADSCs的生長無明顯影響,而MOI值為500時,細(xì)胞生長受到明顯抑制。結(jié)論慢病毒負(fù)載GFP可成功導(dǎo)入rADSCs,為進(jìn)一步對ADSCs組織工程化角膜上皮的研究奠定了良好的實驗基礎(chǔ)。
[Abstract]:Objective to investigate the feasibility and stability of lentivirus loaded green fluorescent protein (GFP) on (rADSCs) transfection of rabbit adipose stem cells and to provide a reliable in vitro and in vivo tracer for the study of rADSCs tissue engineered corneal epithelium. Methods Lentivirus was used as vector and GFP gene was transfected into rADSCs, by using different complex (MOI) lentivirus. The effect of lentivirus transfection on the growth of rADSCs cells was detected by MTT assay. To evaluate cytotoxicity. Results when the MOI value was 50100,500, the rADSCs could be transfected successfully, and the transfection efficiency could reach more than 50% after 120 h. When the MOI value was 50100, GFP- lentivirus had no obvious effect on the growth of rADSCs, but when MOI value was 500, cell growth was significantly inhibited. Conclusion Lentivirus-loaded GFP can be successfully introduced into rADSCs, to lay a good experimental foundation for further study of ADSCs tissue engineered corneal epithelium.
【作者單位】： 上海交通大學(xué)附屬第六人民醫(yī)院眼科;上海交通大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院組織胚胎學(xué)教研室;上海市生殖醫(yī)學(xué)重點(diǎn)實驗室;
【分類號】：R329

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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本文編號：2396198