【摘要】：由于流感病毒容易突變,流感通用疫苗的研究勢在必行.流感病毒血凝素(HA)柄部和基質蛋白2的胞外域(M2e)都是流感病毒通用疫苗的重要候選靶點.通過重疊PCR的方法用A/PR/8/34(H1N1)(簡稱PR8)流感病毒的M2e或者4個甘氨酸取代HA的頭部,分別獲得HAM2e和HA4G,然后將兩種重組基因插入真核表達載體pCAGGS-P7中,制得pHAM2e和pHA4G兩種DNA疫苗.通過電擊免疫的方法對小鼠分別免疫pHAM2e和pHA4G,免疫3次,每次免疫間隔2周.第3次免疫2周后用5LD50的同源流感病毒感染小鼠.結果表明HAM2e組和HA4G組的小鼠均產生了特異性抗體,HAM2e組比HA4G組具有更好的抗PR8流感病毒的能力,這提示可以用M2e替換HA頭部用于疫苗研發(fā).
[Abstract]:Because influenza viruses are prone to mutation, it is imperative to develop a universal influenza vaccine. Influenza virus hemagglutinin (HA) stalk and extracellular domain of matrix protein 2 (M2e) are important candidates for influenza virus vaccine. The head of HA was replaced by M2e or 4 glycine of A/PR/8/34 (H1N1) (PR8) influenza virus by overlapping PCR. HAM2e and HA4G, were obtained, respectively. The two recombinant genes were inserted into the eukaryotic expression vector pCAGGS-P7. Two kinds of DNA vaccine, pHAM2e and pHA4G, were prepared. Mice were immunized with pHAM2e and pHA4G, for 3 times, with an interval of 2 weeks. Mice were infected with 5LD50 homologous influenza virus 2 weeks later. The results showed that both HAM2e and HA4G mice produced specific antibodies, and HAM2e group had better ability to resist PR8 influenza virus than HA4G group, which suggested that M2e could be used to replace HA head for vaccine development.
【作者單位】： 湖南師范大學生命科學學院;
【基金】：湖南省高校創(chuàng)新平臺開放基金資助項目(11K040) 湖南省科技廳基金資助項目(2011SK3109)
【分類號】：R392

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 田春生;;用聚乙二醇濃縮流感病毒[J];國際生物制品學雜志;1983年04期

2 張愛君;;流行性感冒病毒的致病性、診斷與防治[J];中國地方病防治雜志;2009年04期

3 郭仁;;流感血凝素的細胞內糖基化作用:葡糖胺的效用[J];醫(yī)學分子生物學雜志;1980年05期

4 楊正時;;流感:一種動物源性傳染病[J];中國微生態(tài)學雜志;2009年01期

5 陳錦輝;趙玉軍;童貽剛;;禽流感感染人的分子機制研究進展[J];畜牧獸醫(yī)雜志;2007年01期

6 陳忠斌;王升啟;;流感病毒反向遺傳操作及相關分子生物學研究[J];國外醫(yī)學(微生物學分冊);1998年03期

7 黃韌,李志東,劉忠華,張鈺,劉香梅;禽流感H5N1亞型病毒感染ICR小鼠模型建立[J];中國實驗動物學報;2005年S1期

8 涂文偉;毛華偉;劉宇隆;;機體抗流感病毒免疫應答機制及研究進展[J];中華兒科雜志;2007年11期

9 ;張仲秋:我國將采取有力措施防控新型流感病毒[J];獸醫(yī)導刊;2009年05期

10 ;解讀甲型H1N1流感[J];晚霞;2009年10期

相關會議論文 前10條

1 李月越;陳杭薇;王萍;王瑞娟;霍秀青;胡美;;住院病人流感病毒感染臨床分析[A];中華醫(yī)學會呼吸病學年會——2011（第十二次全國呼吸病學學術會議）論文匯編[C];2011年

2 徐紅日;王成祥;王惠芳;張靖;鹿曉晶;;中醫(yī)藥對流感病毒感染所致炎性損傷的干預機制研究概況[A];全國中醫(yī)內科肺系病第十四次學術研討會論文集[C];2010年

3 李青;陳國平;劉紅;;安徽省甲型H1N1流感病毒感染狀況調查[A];華東地區(qū)第十次流行病學學術會議暨華東地區(qū)流行病學學術會議20周年慶典論文匯編[C];2010年

4 李月越;陳杭薇;王萍;王瑞娟;霍秀青;胡美;;GICA法檢測呼吸科住院病人流感病毒感染臨床研究[A];中華醫(yī)學會呼吸病學年會——2011（第十二次全國呼吸病學學術會議）論文匯編[C];2011年

5 李海燕;畢英佐;于康震;;流感病毒的致病性與其血凝素裂解性及細胞蛋白酶的關系[A];中國畜牧獸醫(yī)學會禽病學會分會第十次學術研討會論文集[C];2000年

6 關秀茹;;流感病毒感染及IL-18與急性心肌梗死關系的研究[A];中華醫(yī)學會第九次全國檢驗醫(yī)學學術會議暨中國醫(yī)院協(xié)會臨床檢驗管理專業(yè)委員會第六屆全國臨床檢驗實驗室管理學術會議論文匯編[C];2011年

7 孔維;喬傳玲;陳艷;楊煥良;展小過;辛曉光;陳化蘭;;抗H3N2亞型豬流感病毒血凝素單克隆抗體的制備與鑒定[A];中國畜牧獸醫(yī)學會家畜傳染病學分會第七屆全國會員代表大會暨第十三次學術研討會論文集（上冊）[C];2009年

8 唐應華;張評滸;薛峰;劉曉文;劉秀梵;;禽流感H9亞型血凝素單克隆抗體的研制和初步應用[A];第六屆全國會員代表大學暨第11次學術研討會論文集（下）[C];2005年

9 何卓晶;汪一帆;郭潮潭;;A型流感病毒受體識別及種間傳播的研究進展[A];2007年浙江省醫(yī)學病毒學、醫(yī)學微生物與免疫學學術年會論文匯編[C];2007年

10 孫林;焦新安;劉文博;潘志明;劉秀梵;;從噬菌體隨機十二肽庫中篩選新城疫病毒血凝素—神經氨酸酶模擬表位[A];中國畜牧獸醫(yī)學會家畜傳染病學分會成立20周年慶典暨第十次學術研討會論文集（下）[C];2003年

相關重要報紙文章 前10條

1 本報記者 張慶源;河北承德：城鄉(xiāng)間的轉院生死門[N];21世紀經濟報道;2009年

2 吳登梅;如何區(qū)別流感與感冒[N];民族醫(yī)藥報;2003年

3 江夏;哪些動物可能感染禽流感[N];人民日報;2004年

4 見習記者 郭成林　編輯 祝建華;“翻版”達菲市場受寵 利君國際兩日飆升34%[N];上海證券報;2009年

5 白毅;流感疫苗的研發(fā)歷程[N];中國醫(yī)藥報;2003年

6 本報記者 王丹;向流感宣戰(zhàn)[N];中國高新技術產業(yè)導報;2001年

7 馬偉隆主任醫(yī)師;疫苗——流感的克星[N];上海中醫(yī)藥報;2005年

8 黃澤殠 凌潔;漫談流感[N];醫(yī)藥經濟報;2001年

9 孟慶云;時疫傳播肆虐狂：流感的世界大流行[N];中國中醫(yī)藥報;2003年

10 英甲;人與流感：大戰(zhàn)未有盡頭[N];中國商報;2001年

相關博士學位論文 前10條

1 王劍;流感病毒感染與粘膜免疫損傷[D];中國科學技術大學;2012年

2 湯必奎;流感病毒感染致炎的表觀遺傳學機制研究[D];復旦大學;2010年

3 房家立;A型流感病毒感染誘導COX2基因表達機制研究[D];武漢大學;2011年

4 董丹;以“肺常不足”立論雙表法抗流感病毒感染TLR信號通路時效關系研究[D];遼寧中醫(yī)藥大學;2010年

5 高展翔;蒿芩清膽湯對流感病毒感染濕熱證小鼠水通道蛋白影響的實驗研究[D];廣州中醫(yī)藥大學;2012年

6 張衛(wèi)東;甲（A）型流感病毒多基因表達DNA疫苗的構建及其免疫效果研究[D];四川大學;2006年

7 王芙艷;流感病毒血凝素基因抗流感病毒感染關鍵序列解析及嵌合基因疫苗的研究[D];中南大學;2008年

8 諶資;H5N1血凝素蛋白的重組牛痘病毒表達純化以及耐奧司他韋神經氨酸酶動力學研究[D];中南大學;2009年

9 高玉偉;虎源和獅源H5N1亞型流感病毒進化分析與HA基因重組犬2型腺病毒構建研究[D];吉林大學;2006年

10 蔣露芳;上海地區(qū)人群甲型流感的傳播與病毒抗原變異的研究[D];復旦大學;2007年

相關碩士學位論文 前10條

1 金葉智;漢黃芩素對流感病毒感染肺泡巨噬細胞炎癥物質的影響及機制[D];北京中醫(yī)藥大學;2011年

2 馬紅梅;甲型H1N1流感病毒致宿主細胞氧化損傷機制的研究[D];廣州醫(yī)學院;2011年

3 趙峰;哺乳動物雷帕霉素靶蛋白在流感病毒感染中的作用[D];北京交通大學;2011年

4 嚴敏;銀翹散對流感病毒感染小鼠模型肺組織mBDF1表達的影響[D];成都中醫(yī)藥大學;2010年

5 田興華;新城疫病毒B_（95）株血凝素—神經氨酸酶基因的克隆與表達[D];河北農業(yè)大學;2002年

6 陳琛;槲皮素與奧司他韋對H1N1病毒感染細胞中TLR7信號通路的影響[D];暨南大學;2011年

7 楊文;A、B型流感病毒血凝素基因抗流感關鍵序列解析[D];湖南師范大學;2004年

8 張姝慧;禽流感病毒H5、H9亞型單抗及ELISA鑒別診斷方法的研究和應用[D];華中農業(yè)大學;2005年

9 張玉松;H5N1禽流感病毒HA假病毒的構建及特性研究[D];中國疾病預防控制中心;2008年

10 邱美珍;禽流感核酸疫苗免疫保護性研究[D];湖南師范大學;2005年

，

本文編號：2385880