發(fā)布時間：2018-12-13 07:20

【摘要】：目的探討蛋白激酶MPK-1對脂質(zhì)代謝的影響及可能的作用機制。方法用秀麗線蟲(C.elegans)作為模式生物,采用RNA干擾(RNAi)技術(shù)定向干擾mpk-1,sbp-1、daf-2基因表達,油紅O和蘇丹黑染色觀察線蟲脂質(zhì)含量的變化,洗脫脂肪進行定量分析確定脂肪含量的增減。采用RNAi技術(shù)結(jié)合對線蟲體內(nèi)特定位置綠色熒光蛋白表達變化的觀察,分析MPK-1影響脂肪累積的可能機制。結(jié)果干擾mpk-1基因表達后,線蟲體內(nèi)脂肪含量明顯增加。熒光顯微鏡觀察發(fā)現(xiàn):脂質(zhì)合成酶fat-7∷gfp線蟲干擾mpk-1基因表達后,熒光增強;表達調(diào)控fat-7的轉(zhuǎn)錄因子DAF-16熒光蛋白的線蟲品系中干擾mpk-1基因表達,可促進DAF-16向核內(nèi)轉(zhuǎn)移。結(jié)論蛋白激酶MPK-1可能通過DAF-16調(diào)控FAT-7的活性,抑制脂肪的合成代謝,減少脂質(zhì)累積。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of protein kinase MPK-1 on lipid metabolism and its possible mechanism. Methods using C.elegans as model organism, RNA interference (RNAi) technique was used to directly interfere mpk-1,sbp-1,daf-2 gene expression. Oil red O and Sudan black staining were used to observe the change of nematode lipid content. The content of fat was determined by quantitative analysis. The changes of green fluorescent protein (GFP) expression in nematodes were observed by RNAi technique. The possible mechanism of MPK-1 affecting fat accumulation was analyzed. Results after interfering with the expression of mpk-1 gene, the fat content of nematodes increased significantly. Fluorescence microscopy showed that fat-7: gfp nematode interfered with the expression of mpk-1 gene, and the fluorescence increased. Interfering with the expression of mpk-1 gene in nematode strains which express DAF-16 fluorescent protein, the transcription factor of fat-7, can promote the transfer of DAF-16 into nucleus. Conclusion protein kinase MPK-1 may regulate the activity of FAT-7 through DAF-16, inhibit the metabolism of fat and decrease the accumulation of lipid.
【作者單位】： 上海交通大學醫(yī)學院附屬瑞金醫(yī)院分子醫(yī)學中心;
【分類號】：R363

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本文編號：2376139