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SPARC通過競爭性結(jié)合膠原蛋白抑制DDR2的活化

發(fā)布時間:2018-12-09 19:49
【摘要】:目的探討富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白(SPARC)是否與盤狀結(jié)構(gòu)域受體2(DDR2)競爭性結(jié)合膠原蛋白,并觀察SPARC對DDR2磷酸化水平的影響。方法采用轉(zhuǎn)染小干擾RNA的方法下調(diào)人前列腺癌細(xì)胞PC-3中DDR2的表達,觀察對該細(xì)胞中SPARC mRNA表達水平的影響。在HEK293T細(xì)胞中同時過表達SPARC和DDR2,在有無膠原蛋白刺激的情況下,通過免疫沉淀及Western blot法檢測DDR2磷酸化水平的變化。結(jié)果下調(diào)DDR2會引起SPARC mRNA和蛋白表達水平顯著下降;而SPARC能夠抑制膠原蛋白刺激的DDR2磷酸化。結(jié)論 SPARC很可能通過競爭性結(jié)合膠原蛋白來抑制DDR2的活化。
[Abstract]:Objective to investigate the competitive binding of cysteine-rich acidic secretory protein (SPARC) with disc domain receptor 2 (DDR2) to collagen and to investigate the effect of SPARC on the phosphorylation of DDR2. Methods the expression of DDR2 in human prostate cancer cell line PC-3 was down-regulated by transfection of small interfering RNA and the effect on the expression of SPARC mRNA was observed. Both SPARC and DDR2, were overexpressed in HEK293T cells with or without collagen stimulation. The phosphorylation of DDR2 was detected by immunoprecipitation and Western blot assay. Results down-regulation of DDR2 induced a significant decrease in SPARC mRNA and protein expression, while SPARC inhibited DDR2 phosphorylation stimulated by collagen. Conclusion SPARC may inhibit the activation of DDR2 by competitive binding collagen.
【作者單位】: 第四軍醫(yī)大學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室;寧夏醫(yī)科大學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)教研室;
【基金】:國家自然科學(xué)基金青年基金(81100044;30901335;31100787) 國家重點基礎(chǔ)研究發(fā)展計劃(973)(2010CB529705)
【分類號】:R341

【共引文獻】

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本文編號:2369934

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