發(fā)布時(shí)間：2018-11-28 09:11

【摘要】：目的:研究聚丙烯酰胺凝膠電泳法純化的pfs25蛋白的免疫原性變化。方法:利用聚丙烯酰胺凝膠電泳法(SDS-PAGE)分離了畢赤酵母表達(dá)的惡性瘧原蟲pfs25膜蛋白,按照常規(guī)程序?qū)⒎蛛x的pfs25膜蛋白免疫小鼠,以驗(yàn)證其免疫原性。通過熒光光譜分析、酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn),分析了聚丙烯酰胺凝膠電泳過程中pfs25蛋白質(zhì)免疫原性的變化情況。結(jié)果:SDS-PAGE方法成功分離了pfs25蛋白,免疫小鼠后不能產(chǎn)生特異性抗體;與pfs25標(biāo)準(zhǔn)品相比,純化的pfs25蛋白的熒光光譜發(fā)生了改變,但是ELISA結(jié)果均為陽性。結(jié)論:聚丙烯酰胺凝膠電泳法純化的pfs25蛋白保留了其免疫反應(yīng)性,喪失了免疫原性。
[Abstract]:Objective: to study the immunogenicity of pfs25 protein purified by polyacrylamide gel electrophoresis. Methods: Plasmodium falciparum pfs25 membrane protein expressed by Pichia pastoris was isolated by polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE). The isolated pfs25 membrane protein was immunized by routine procedure to verify its immunogenicity. The changes of immunogenicity of pfs25 protein during polyacrylamide gel electrophoresis were analyzed by fluorescence spectrum analysis and enzyme-linked immunosorbent assay (Elisa). Results: the pfs25 protein was isolated successfully by SDS-PAGE method, and the specific antibody could not be produced after immunizing mice. Compared with pfs25 standard, the fluorescence spectrum of purified pfs25 protein changed, but the results of ELISA were all positive. Conclusion: pfs25 protein purified by polyacrylamide gel electrophoresis retains its immunoreactivity and loses its immunogenicity.
【作者單位】： 國藥集團(tuán)蘭州生物制品研究所有限責(zé)任公司;
【分類號(hào)】：R392.1

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前7條

1 張華群;廖文婷;陳秋莉;葛宜兵;楊界;章萍萍;祁培培;劉超;何婷;王錦紅;潘衛(wèi);曹潔;;人類免疫缺陷病毒1型Tat蛋白N末端缺失突變體融合蛋白的表達(dá)及其免疫原性分析[J];病毒學(xué)報(bào);2011年06期

2 蔡瑜,向本春,席德慧,劉升學(xué),都業(yè)娟;蘋果褪綠葉斑病毒庫爾勒分離物外殼蛋白基因的克隆、原核表達(dá)及特異抗血清的制備[J];農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報(bào);2005年04期

3 陳勇;雷清;劉曉;馬亞茹;卜曉萍;蔣琳;;惡性瘧原蟲膜蛋白Pfs25在畢赤酵母中的組成型表達(dá)[J];生物技術(shù)通訊;2011年06期

4 時(shí)永全,韓者藝,王新,張宇梅,寧曉暄,翟惠虹,樊代明;利用聚丙烯酰胺凝膠電泳純化的微量蛋白制備抗血清[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2002年06期

5 李萍;馬亞茹;陸儉;雷清;陳勇;蔣琳;;Pfs25蛋白單克隆抗體的制備及雙抗體夾心ELISA的建立[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2011年12期

6 石麗媛;楊光璨;董珊珊;于國林;;SDS-PAGE制備凝膠純化鼠疫菌Pla蛋白[J];醫(yī)學(xué)動(dòng)物防制;2008年12期

7 孫鵬;秦貴信;;蒸汽處理對(duì)純化大豆抗原含量及免疫原性的影響[J];中國獸醫(yī)學(xué)報(bào);2006年05期

【共引文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 趙元;秦貴信;王濤;張兵;朱丹;;不同大豆加工制品中主要抗?fàn)I養(yǎng)因子免疫及抑制活性的比較[J];大豆科學(xué);2007年06期

2 曾蕊;宋波;拓云;吳帥;藍(lán)嵐;姜自芹;劉珊珊;;大豆致敏蛋白及其清除方法的研究進(jìn)展[J];大豆科學(xué);2011年06期

3 杜春紅;王鵬;張建中;肖迪;石麗媛;唐雪;宋志忠;;鼠疫耶爾森氏菌Pla蛋白的分離純化與質(zhì)譜分析[J];中國地方病防治雜志;2011年03期

4 王濤;秦貴信;趙元;張兵;張柏林;孫月;;大豆抗原蛋白抗?fàn)I養(yǎng)作用與仔豬生理特點(diǎn)關(guān)系的研究[J];飼料工業(yè);2008年06期

5 林化成;姬洪波;;大豆抗原蛋白的致敏作用及其緩解機(jī)制的研究進(jìn)展[J];中國畜牧獸醫(yī);2011年07期

6 劉倩;張幟;陳營;;鯉魚腸道黏附受體分離與抗血清制備及體外黏附試驗(yàn)[J];青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);2012年05期

7 耿超;牟安麗;劉志強(qiáng);李向東;周濤;;蘋果褪綠葉斑病毒外殼蛋白基因的原核表達(dá)及抗血清制備[J];果樹學(xué)報(bào);2012年05期

8 魏曉棠;白樺;尼秀媚;張京宣;宋濤;;菜豆莢斑駁病毒外殼蛋白基因的克隆與原核表達(dá)[J];安徽農(nóng)業(yè)科學(xué);2013年05期

9 孫月;秦貴信;;不同處理方法降解大豆中抗?fàn)I養(yǎng)因子的比較研究[J];河北農(nóng)業(yè)科學(xué);2009年10期

10 于翠梅;張志宏;劉月學(xué);馬躍;李賀;代紅艷;;草莓輕型黃邊病毒CP基因的克隆、序列分析及原核表達(dá)[J];華北農(nóng)學(xué)報(bào);2012年01期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前4條

1 陳敏;刺芹側(cè)耳木質(zhì)素降解酶的研究[D];浙江大學(xué);2010年

2 宋艷蘇;兩種梨病毒CP基因原核表達(dá)及蘋果褪綠葉斑病毒分子變異與其血清學(xué)多樣性的關(guān)系[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2011年

3 李振興;蝦（Penaeus Vannamei）過敏原免疫活性的研究[D];中國海洋大學(xué);2006年

4 王利平;兩種線狀病毒分子變異的研究及熱處理對(duì)梨基因表達(dá)的影響[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2009年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 黃妍妍;來源于新疆的蘋果褪綠葉斑病毒和蘋果莖溝病毒的檢測及其分子鑒定[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

2 徐述亮;大豆蛋白抗原對(duì)斷奶仔豬的免疫原性及作用機(jī)理研究[D];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué);2010年

3 崔林開;轉(zhuǎn)Bt抗蟲基因植物的酶聯(lián)免疫檢測技術(shù)研究[D];四川農(nóng)業(yè)大學(xué);2004年

4 史政榮;抗內(nèi)毒素IgY-F（ab′）_2的制備與體外生物學(xué)效應(yīng)研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2005年

5 羅金水;兩種蘭花病毒的生物學(xué)特性及其抗血清的制備與應(yīng)用[D];福建農(nóng)林大學(xué);2007年

6 劉倩;鯉魚腸道中乳酸菌粘附相關(guān)蛋白質(zhì)的鑒定研究[D];山東師范大學(xué);2007年

7 李小飛;擬態(tài)弧菌外膜蛋白OmpU基因的克隆表達(dá)及其免疫保護(hù)性研究[D];安徽農(nóng)業(yè)大學(xué);2007年

8 李美娜;人表皮生長因子（hEGF）在大腸桿菌中的表達(dá)及其多克隆抗體的制備[D];東北師范大學(xué);2008年

9 劉霄卉;綿羊肺腺瘤病毒囊膜基因表面蛋白的表達(dá)及其單克隆抗體的制備[D];內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

10 楊紹麗;蘋果莖痘病毒的鑒定及其外殼蛋白基因的原核表達(dá)[D];華中農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 程冬梅,鄧志勇,郭靄光;SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳快速染色新方法的研究[J];西北植物學(xué)報(bào);2001年06期

2 春林陳,喜斌,于炎湖,齊德生;大豆中抗?fàn)I養(yǎng)因子及其處理方法[J];飼料工業(yè);2000年09期

3 李榮貴;趙峰;楊宏;杜桂彩;汪靖超;王斌;;重組沙蠶溶栓活性蛋白酶的純化及其性質(zhì)研究[J];中國海洋藥物;2007年02期

4 趙翔,霍克克,李育陽;畢赤酵母的密碼子用法分析[J];生物工程學(xué)報(bào);2000年03期

5 王丹英;豆類種子的營養(yǎng)價(jià)值及其抗?fàn)I養(yǎng)因子的研究[J];世界農(nóng)業(yè);2000年11期

6 陳勇;雷清;劉曉;馬亞茹;卜曉萍;蔣琳;;惡性瘧原蟲膜蛋白Pfs25在畢赤酵母中的組成型表達(dá)[J];生物技術(shù)通訊;2011年06期

7 陳鵬;孫群;;不經(jīng)染色直接從SDS-PAGE制備凝膠中準(zhǔn)確切下所需蛋白條帶的方法[J];生物學(xué)通報(bào);2006年03期

8 丁天兵,任育華,汪海丹,于淑湘;傳統(tǒng)動(dòng)物免疫法和硝酸纖維素膜皮下包埋免疫法的比較[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;2001年02期

9 李元，馬文煜，白光春，丁天兵，李別虎，，肖毅;空斑法篩選具有中和活性的抗衣原體粘連蛋白McAb[J];細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志;1996年03期

10 周兵,周瑞寶;大豆球蛋白的性質(zhì)[J];西部糧油科技;1998年04期

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 齊靜姣;李加濤;吳丹;王瑩;陳雄彬;;抗旋毛蟲雞卵黃抗體的制備與鑒定[J];現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué);2010年01期

2 蔣惠荷;神經(jīng)氨酸酶對(duì)癌細(xì)胞免疫原性增強(qiáng)的作用[J];蚌埠醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào);1978年S1期

3 龔蘊(yùn)貞;乙型肝炎多肽微膠粒疫苗的研制[J];國際生物制品學(xué)雜志;1985年03期

4 張學(xué)述;;釀酒酵母表達(dá)的人類免疫缺陷癥病毒包膜多肽不同區(qū)段的抗原性和免疫原性[J];國際生物制品學(xué)雜志;1988年03期

5 Ada GL;史百芬;;疫苗的前景[J];國際生物制品學(xué)雜志;1988年04期

6 王長太;;用五種不同方法提純的HBsAg的純度、抗原性和免疫原性[J];國際生物制品學(xué)雜志;1989年05期

7 左祥生,蘇寶田;孕血清中早孕因子免疫原性的分析[J];中國免疫學(xué)雜志;1991年02期

8 趙鳳蘭,李福勝,胡志榮;鼠傷寒桿菌外膜蛋白的提取和分析鑒定[J];鄭州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);1993年04期

9 王敘亭;霍亂毒素B亞單位N-末端附加肽段降低其口服免疫原性[J];國際生物制品學(xué)雜志;1993年05期

10 蔣玖;成人口服霍亂活菌苗CVD103-HgR的安全性,免疫原性及排泄特點(diǎn)[J];國外醫(yī)學(xué).預(yù)防.診斷.治療用生物制品分冊(cè);1994年04期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 賈曉暉;程健君;何多姣;李雙霞;田穎新;賈天軍;;感染CPn人群中CPn0308免疫原性分析研究[A];河北省免疫學(xué)會(huì)第六次免疫學(xué)大會(huì)資料匯編[C];2010年

2 徐云升;;高危型HPV新型免疫原MAP的分子設(shè)計(jì)及其免疫原性鑒定[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第16次全國皮膚性病學(xué)術(shù)年會(huì)摘要集[C];2010年

3 李忠明;張穎;黃嘉璐;何為;劉慶良;張洪勇;熊思東;;采用嵌合基因技術(shù)增強(qiáng)結(jié)核桿菌ESAT-6抗原在小鼠和猴子體內(nèi)免疫原性的研究[A];2005年中國防癆協(xié)會(huì)全國學(xué)術(shù)會(huì)議論文集[C];2005年

4 李擎天;朱泳璋;褚嘉yP;張庶民;郭曉奎;;GM-CSF對(duì)重組百日咳DNA疫苗免疫原性的作用[A];首屆全國微生物基因組學(xué)學(xué)術(shù)研討會(huì)會(huì)程與論文摘要集[C];2006年

5 馬翠卿;魏林;李彩虹;王秀榮;;A族鏈球菌表面新發(fā)現(xiàn)蛋白Fba的原核表達(dá)及其免疫原性分析[A];河北省免疫學(xué)會(huì)第5次會(huì)員代表暨學(xué)術(shù)大會(huì)論文摘要集[C];2006年

6 毛開榮;丁家波;程君生;蔣玉文;;布魯氏菌基因缺失菌株rS2的構(gòu)建及其免疫原性測定[A];第二屆全國人畜共患病學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集[C];2008年

7 吳韋霖;韓煥興;陸惠琦;仲人前;;人源化抗體的演進(jìn)發(fā)展及應(yīng)用現(xiàn)狀[A];全國臨床免疫檢驗(yàn)研討會(huì)暨第六屆全國臨床免疫學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2009年

8 曾瑞紅;吳麗娜;楊建嶺;魏林;李彩霞;崔玉秀;;TERT多表位疫苗的制備及其免疫原性初步研究[A];河北省免疫學(xué)會(huì)第六次免疫學(xué)大會(huì)資料匯編[C];2010年

9 商慶龍;谷鴻喜;;HPV16 L1蛋白在大腸桿菌中的表達(dá)、純化及免疫原性研究[A];慶祝黑龍江省免疫學(xué)會(huì)成立十周年（1993—2003）論文集[C];2003年

10 陳希煒;吳軍;羅高興;羅奇志;王錫華;易紹萱;賀偉峰;馬兵;王儒鵬;唐進(jìn);;間接抗原遞呈途徑在表皮細(xì)胞免疫原性中作用的實(shí)驗(yàn)研究[A];全國燒傷創(chuàng)面處理、感染專題研討會(huì)論文匯編[C];2004年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 記者楊健;腫瘤細(xì)胞遨游太空后發(fā)生變化[N];人民日?qǐng)?bào);2003年

2 記者白劍峰;腫瘤細(xì)胞太空“旅行”[N];人民日?qǐng)?bào);2003年

3 ;映日荷花別樣紅[N];中國醫(yī)藥報(bào);2004年

4 莊愉;生物制劑的現(xiàn)狀與未來[N];中國醫(yī)藥報(bào);2001年

5 莊愉;新型抗結(jié)核疫苗的開發(fā)研究[N];中國醫(yī)藥報(bào);2002年

6 靜雨;用炎癥來阻止腫瘤生長[N];中國醫(yī)藥報(bào);2003年

7 王kH;腫瘤疫苗研究的新選擇[N];中國醫(yī)藥報(bào);2004年

8 本報(bào)記者 劉洪宇;艾滋疫苗：修成正果還需多少年？[N];遼寧日?qǐng)?bào);2008年

9 ;韓忠朝：在干細(xì)胞領(lǐng)域執(zhí)著前行[N];人民政協(xié)報(bào);2009年

10 記者 張周來;我國啟動(dòng)艾滋病疫苗Ⅱ期臨床研究[N];新華每日電訊;2009年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 井申榮;微載體制備甲肝滅活疫苗的研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2000年

2 蔣爾鵬;應(yīng)用RNA干擾技術(shù)降低人胚胎心臟垞細(xì)胞免疫原性的實(shí)驗(yàn)研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2012年

3 羅源;丙型肝炎病毒高變區(qū)1對(duì)HCV E2蛋白免疫原性抑制作用研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2010年

4 沈美龍;基于DNA免疫的乙型肝炎病毒表面抗原大中小蛋白的免疫原性研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2010年

5 張榮光;幽門螺桿菌omp11和lpp20基因的克隆及表達(dá)產(chǎn)物免疫原性和保護(hù)效果研究[D];鄭州大學(xué);2004年

6 王蘭;版納微型豬近交系骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分化后的免疫原性和免疫調(diào)節(jié)作用[D];四川大學(xué);2006年

7 田美娟;天壇痘病毒載體改造及其對(duì)HIV重組疫苗免疫原性的影響[D];中國疾病預(yù)防控制中心;2010年

8 王希;新型流感病毒樣顆粒疫苗在老齡小鼠中免疫原性研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2011年

9 何曉文;乙型肝炎治療性疫苗的研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2005年

10 姜濤;SARS新型核酸疫苗的實(shí)驗(yàn)研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2005年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 段鴻元;登革3型病毒prME和NS1多基因重組質(zhì)粒DNA免疫原性增強(qiáng)效果觀察[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2003年

2 欒翔凌;SARS病毒E、M、N基因克隆、表達(dá)及免疫原性初步研究[D];中國人民解放軍軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院;2005年

3 席曉蓉;HBsAg/GM-CSF融合蛋白在畢赤酵母中的表達(dá)及其免疫原性研究[D];昆明醫(yī)學(xué)院;2005年

4 唐艷;TRP-2_（180-188）CTL表位之APL的設(shè)計(jì)和評(píng)價(jià)[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2005年

5 鐘瓊;SARSCoV滅活疫苗對(duì)恒河猴的免疫原性、保護(hù)性與安全性研究[D];武漢大學(xué);2005年

6 王雅英;百日咳桿菌粘著素和菌毛的克隆、表達(dá)及免疫原性和保護(hù)性研究[D];中國藥品生物制品檢定所;2006年

7 孫會(huì)來;人免疫缺陷病毒重組非復(fù)制型痘苗病毒的構(gòu)建及其免疫原性研究[D];吉林大學(xué);2007年

8 劉新華;創(chuàng)傷弧菌FJ03-X2莢膜多糖的提取和免疫原性分析[D];福建農(nóng)林大學(xué);2008年

9 王小娥;利用噬菌體展示技術(shù)鑒定vvIBDV抗原表位及多表位模擬蛋白表達(dá)[D];山東農(nóng)業(yè)大學(xué);2008年

10 楊敏;戊二醛聚合方法對(duì)血紅蛋白聚合產(chǎn)物免疫學(xué)特性的影響[D];西北大學(xué);2009年

本文編號(hào)：2362424