【摘要】：【目的】建立鳥分枝桿菌感染巨噬細胞模型,探討Toll樣受體2(TLR2)和Toll樣受體6(TLR6)在鳥分枝桿菌誘導巨噬細胞凋亡中的作用,為闡明鳥分枝桿菌致病機制提供依據(jù)�！痉椒ā坑螟B分枝桿菌感染U937細胞,于感染0h、8h、16h、24h和48h后分別提取細胞總蛋白,并通過Western blot方法檢測TLR2和TLR6的表達;分別提取細胞培養(yǎng)上清液,利用ELISA技術(shù)檢測腫瘤壞死因子(TNF-α)含量的變化情況。用鳥分枝桿菌感染阻斷TLR2和TLR6后的U937細胞,通過Western blot方法分別檢測其促凋亡因子BAX和抗凋亡因子BCL-2的表達量,用ELISA技術(shù)檢測細胞培養(yǎng)上清液中TNF-α含量變化情況,用流式細胞儀檢測U937細胞的凋亡變化�！窘Y(jié)果】鳥分枝桿菌感染U937細胞可引起TLR2、TLR6和TNF-α表達上調(diào);用鳥分枝桿菌感染阻斷TLR2和TLR6后的U937細胞,可使U937細胞內(nèi)促凋亡因子BAX和TNF-α表達量下降(P0.05),抗凋亡因子BCL-2表達量升高(P0.05),并可以明顯降低感染鳥分枝桿菌后的細胞的凋亡率(P0.05)�！窘Y(jié)論】TLR2和TLR6與巨噬細胞凋亡相關(guān),巨噬細胞通過TLR2和TLR6來識別鳥分枝桿菌,而鳥分枝桿菌反過來通過促進TLR2和TLR6的表達來影響巨噬細胞相關(guān)凋亡通路,從而誘導巨噬細胞凋亡。
[Abstract]:[objective] to study the role of Toll like receptor 2 (TLR2) and Toll like receptor 6 (TLR6) in inducing macrophage apoptosis induced by Mycobacterium avium. [methods] U937 cells were infected with Mycobacterium avium. The total protein was extracted from U937 cells at 0 h, 8 h, 16 h and 48 h after infection, and the expression of TLR2 and TLR6 was detected by Western blot method. The supernatant of cell culture was extracted, and the content of tumor necrosis factor (TNF- 偽) was detected by ELISA technique. U937 cells of TLR2 and TLR6 were blocked by Mycobacterium avium infection. The expression of BAX and BCL-2 were detected by Western blot, and the content of TNF- 偽 in the supernatant of cell culture was detected by ELISA technique. The apoptosis of U937 cells was detected by flow cytometry. [results] the expression of TLR2,TLR6 and TNF- 偽 was up-regulated in U937 cells infected by Mycobacterium avium. When U937 cells were blocked by Mycobacterium avium infection, the expression of pro-apoptotic factor BAX and TNF- 偽 in U937 cells decreased (P0.05), and the expression of anti-apoptotic factor BCL-2 increased (P0.05). TLR2 and TLR6 were associated with macrophage apoptosis. Macrophages recognized Mycobacterium avium by TLR2 and TLR6, and the apoptosis rate of mycobacterium avium was significantly decreased after infection (P0.05). [conclusion] TLR2 and TLR6 are associated with macrophage apoptosis, and macrophages recognize Mycobacterium avium by TLR2 and TLR6. On the other hand, Mycobacterium avium can induce macrophage apoptosis by promoting the expression of TLR2 and TLR6.
【作者單位】： 廣西醫(yī)科大學廣西高校生物分子醫(yī)學研究重點實驗室生物化學與分子生物學教研室
【基金】：國家自然科學基金項目(81260245) 廣西自然科學基金項目(2015GXNSFAA139077)資助
【分類號】：R378.91

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本文編號：2344043