【摘要】：目的觀察關節(jié)軟骨中是否存在著軟骨干細胞,并對軟骨干細胞進行分離、培養(yǎng)和鑒定。方法將軟骨組織消化成單個軟骨細胞,接種到預先用纖連蛋白處理過的平皿中,20 mins后換液,培養(yǎng)2周時用克隆環(huán)挑取形成的單個細胞集落,在體外進行擴增。流式細胞儀檢測擴增后細胞表面標志物,并對細胞的成脂肪、成骨、成軟骨能力進行驗證。結(jié)果成功挑選出軟骨細胞集落,培養(yǎng)至第3代,細胞呈均一的長梭形。細胞表面表達間充質(zhì)干細胞相關抗原CD44、CD29、CD73、CD90和CD166,且?guī)缀醪槐磉_CD45、CD34和CD133。用誘導培養(yǎng)基培養(yǎng)時,軟骨干細胞能成功的向脂肪細胞、骨細胞和軟骨細胞進行分化。結(jié)論關節(jié)軟骨中存在著軟骨干細胞,并成功的對軟骨干細胞進行了分離和鑒定。
[Abstract]:Objective to observe the existence of chondrocytes in articular cartilage, and to isolate, culture and identify chondrocytes. Methods the cartilage tissue was digested into a single chondrocyte and inoculated into a plate pretreated with fibronectin. After 20 mins of culture, a single cell colony was isolated and amplified in vitro. Flow cytometry was used to detect the biomarkers of expanded cells, and the ability of adipogenesis, osteogenesis and cartilage formation was verified. Results the colony of chondrocytes was successfully selected and cultured to the third passage. Expression of mesenchymal stem cell associated antigens CD44,CD29,CD73,CD90 and CD166, on cell surface and almost no expression of CD45,CD34 and CD133. When cultured in induction medium, chondrocytes could differentiate into adipocytes, bone cells and chondrocytes successfully. Conclusion there are chondrocyte stem cells in articular cartilage, and the chondrocyte stem cells have been isolated and identified successfully.
【作者單位】： 中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院北京協(xié)和醫(yī)院骨科;
【基金】：國家自然科學基金(81130034)
【分類號】：R329

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