【摘要】：本研究觀察無血清培養(yǎng)液培養(yǎng)的人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞(UC-MSC),并比較與含10%胎牛血清培養(yǎng)液培養(yǎng)的人臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞的異同。采集正常足月剖宮產(chǎn)胎兒臍帶,用MesenCult-XF無血清培養(yǎng)液或含10%胎牛血清培養(yǎng)液培養(yǎng)。觀察不同培養(yǎng)液培養(yǎng)的間充質(zhì)干細(xì)胞細(xì)胞的形態(tài)、免疫表型、細(xì)胞周期、增殖分化潛能及對混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)的抑制作用。結(jié)果表明,采用無血清MesenCult湟-XF培養(yǎng)液培養(yǎng)的MSC平均傳代倍增6.57±0.7倍,含血清培養(yǎng)液培養(yǎng)的MSC平均傳代倍增4,59±0.45倍(P0.05);兩種培養(yǎng)液培養(yǎng)的MSC均表達(dá)CD44、CD90、CD73、CD105抗原,不表達(dá)CD31、CD45、HLA-DR及CD34等抗原,表達(dá)程度無明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;無血清培養(yǎng)液培養(yǎng)的MSC(65±5.2)%均為G o/G1期細(xì)胞,含血清培養(yǎng)液培養(yǎng)的MSC(62±3.1)%為G o/G1期細(xì)胞(P0.05);兩種培養(yǎng)液培養(yǎng)的人臍帶MSC均可向成脂細(xì)胞、成骨細(xì)胞分化;無血清培養(yǎng)液培養(yǎng)的臍帶MSC按1 000、5 000、10 000、20 000個(gè)細(xì)胞/孔接種密度與反應(yīng)細(xì)胞和刺激細(xì)胞共培養(yǎng)的每分鐘閃爍值(CPM)分別為(6.43±0.47)×104、(4.30±0.38)×104、(1.97±0.13)×104和(0.24±0.03)×104,含血清培養(yǎng)液培養(yǎng)的MSC與不同密度的混合淋巴細(xì)胞共培養(yǎng)的CPM值分別為(7.85±0.07)×104、(5.64±0.12)×104、(3.09±0.18)×104和(1.73±0.05)×104。結(jié)論:無血清培養(yǎng)液培養(yǎng)的細(xì)胞均為MSC,有傳代增殖潛能,傳代可達(dá)臨床治療MSC細(xì)胞量,并可避免異種蛋白致敏。
[Abstract]:Human umbilical cord mesenchymal stem cells (UC-MSC) cultured in serum-free medium were observed and compared with human umbilical cord mesenchymal stem cells cultured in 10% fetal bovine serum culture medium. Umbilical cord of normal full-term caesarean section was collected and cultured with MesenCult-XF serum-free culture medium or 10% fetal bovine serum culture medium. The morphology, immunophenotype, cell cycle, proliferation and differentiation potential of mesenchymal stem cells cultured in different culture medium were observed. The results showed that the average passage doubling of MSC in serum-free MesenCult Huang XF medium was 6.57 鹵0.7-fold, and that of MSC cultured in serum-containing medium was 40.59 鹵0.45fold (P0.05). The MSC in both cultures expressed CD44,CD90,CD73,CD105 antigens, but did not express CD31,CD45,HLA-DR and CD34 antigens. The expression of MSC in serum-free medium (65 鹵5.2)% was G o/G1 phase cells and MSC (62 鹵3.1)% in serum-containing medium was G o/G1 phase cells (P0.05). Human umbilical cord MSC could differentiate into adipogenic cells and osteoblasts. The (CPM) of umbilical cord MSC cultured in serum-free medium was (6.43 鹵0.47) 脳 10 ~ 4, (4.30 鹵0.38) 脳 10 ~ 4, (1.97 鹵0.13) 脳 10 ~ 4 and (0.24 鹵0.03) 脳 10 ~ (4), respectively. The (CPM) of the co-culture of the cells / well and response cells and stimulating cells was (6.43 鹵0.47) 脳 10 ~ (4), (1.97 鹵0.13) 脳 10 ~ 4 and (0.24 鹵0.03) 脳 10 ~ 4 respectively. The CPM values of co-cultured mixed lymphocytes were (7.85 鹵0.07) 脳 10 ~ 4, (5.64 鹵0.12) 脳 10 ~ 4, (3.09 鹵0.18) 脳 10 ~ 4 and (1.73 鹵0.05) 脳 10 ~ 4, respectively. Conclusion: all the cells cultured in serum-free medium have the potential to proliferate through passage, which can reach the clinical treatment of MSC cells and avoid the allergy of xenogeneic proteins.
【作者單位】： 蘇州大學(xué)附屬兒童醫(yī)院血液腫瘤科;蘇州大學(xué)附屬第一醫(yī)院 江蘇省血液研究所 衛(wèi)生部血栓與止血重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：江蘇省衛(wèi)生廳面上項(xiàng)目(H201212) 蘇州市科技發(fā)展計(jì)劃項(xiàng)目(SS0718) 江蘇省臨床醫(yī)學(xué)中心血液病學(xué)開放課題編號(hào)(KF200943)
【分類號(hào)】：R329.28

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本文編號(hào)：2203484