【摘要】：本研究觀察無血清培養(yǎng)液培養(yǎng)的人臍帶間充質(zhì)干細胞(UC-MSC),并比較與含10%胎牛血清培養(yǎng)液培養(yǎng)的人臍帶間充質(zhì)干細胞的異同。采集正常足月剖宮產(chǎn)胎兒臍帶,用MesenCult-XF無血清培養(yǎng)液或含10%胎牛血清培養(yǎng)液培養(yǎng)。觀察不同培養(yǎng)液培養(yǎng)的間充質(zhì)干細胞細胞的形態(tài)、免疫表型、細胞周期、增殖分化潛能及對混合淋巴細胞反應的抑制作用。結(jié)果表明,采用無血清MesenCult湟-XF培養(yǎng)液培養(yǎng)的MSC平均傳代倍增6.57±0.7倍,含血清培養(yǎng)液培養(yǎng)的MSC平均傳代倍增4,59±0.45倍(P0.05);兩種培養(yǎng)液培養(yǎng)的MSC均表達CD44、CD90、CD73、CD105抗原,不表達CD31、CD45、HLA-DR及CD34等抗原,表達程度無明顯統(tǒng)計學差異;無血清培養(yǎng)液培養(yǎng)的MSC(65±5.2)%均為G o/G1期細胞,含血清培養(yǎng)液培養(yǎng)的MSC(62±3.1)%為G o/G1期細胞(P0.05);兩種培養(yǎng)液培養(yǎng)的人臍帶MSC均可向成脂細胞、成骨細胞分化;無血清培養(yǎng)液培養(yǎng)的臍帶MSC按1 000、5 000、10 000、20 000個細胞/孔接種密度與反應細胞和刺激細胞共培養(yǎng)的每分鐘閃爍值(CPM)分別為(6.43±0.47)×104、(4.30±0.38)×104、(1.97±0.13)×104和(0.24±0.03)×104,含血清培養(yǎng)液培養(yǎng)的MSC與不同密度的混合淋巴細胞共培養(yǎng)的CPM值分別為(7.85±0.07)×104、(5.64±0.12)×104、(3.09±0.18)×104和(1.73±0.05)×104。結(jié)論:無血清培養(yǎng)液培養(yǎng)的細胞均為MSC,有傳代增殖潛能,傳代可達臨床治療MSC細胞量,并可避免異種蛋白致敏。
[Abstract]:Human umbilical cord mesenchymal stem cells (UC-MSC) cultured in serum-free medium were observed and compared with human umbilical cord mesenchymal stem cells cultured in 10% fetal bovine serum culture medium. Umbilical cord of normal full-term caesarean section was collected and cultured with MesenCult-XF serum-free culture medium or 10% fetal bovine serum culture medium. The morphology, immunophenotype, cell cycle, proliferation and differentiation potential of mesenchymal stem cells cultured in different culture medium were observed. The results showed that the average passage doubling of MSC in serum-free MesenCult Huang XF medium was 6.57 鹵0.7-fold, and that of MSC cultured in serum-containing medium was 40.59 鹵0.45fold (P0.05). The MSC in both cultures expressed CD44,CD90,CD73,CD105 antigens, but did not express CD31,CD45,HLA-DR and CD34 antigens. The expression of MSC in serum-free medium (65 鹵5.2)% was G o/G1 phase cells and MSC (62 鹵3.1)% in serum-containing medium was G o/G1 phase cells (P0.05). Human umbilical cord MSC could differentiate into adipogenic cells and osteoblasts. The (CPM) of umbilical cord MSC cultured in serum-free medium was (6.43 鹵0.47) 脳 10 ~ 4, (4.30 鹵0.38) 脳 10 ~ 4, (1.97 鹵0.13) 脳 10 ~ 4 and (0.24 鹵0.03) 脳 10 ~ (4), respectively. The (CPM) of the co-culture of the cells / well and response cells and stimulating cells was (6.43 鹵0.47) 脳 10 ~ (4), (1.97 鹵0.13) 脳 10 ~ 4 and (0.24 鹵0.03) 脳 10 ~ 4 respectively. The CPM values of co-cultured mixed lymphocytes were (7.85 鹵0.07) 脳 10 ~ 4, (5.64 鹵0.12) 脳 10 ~ 4, (3.09 鹵0.18) 脳 10 ~ 4 and (1.73 鹵0.05) 脳 10 ~ 4, respectively. Conclusion: all the cells cultured in serum-free medium have the potential to proliferate through passage, which can reach the clinical treatment of MSC cells and avoid the allergy of xenogeneic proteins.
【作者單位】： 蘇州大學附屬兒童醫(yī)院血液腫瘤科;蘇州大學附屬第一醫(yī)院 江蘇省血液研究所 衛(wèi)生部血栓與止血重點實驗室;
【基金】：江蘇省衛(wèi)生廳面上項目(H201212) 蘇州市科技發(fā)展計劃項目(SS0718) 江蘇省臨床醫(yī)學中心血液病學開放課題編號(KF200943)
【分類號】：R329.28

【相似文獻】

相關期刊論文 前10條

1 向?qū)?胡以平;;肝干細胞的幾個生物學問題[J];生命科學;2009年05期

2 顏雪蕓,陳書艷;內(nèi)皮祖細胞的研究及進展[J];細胞與分子免疫學雜志;2005年06期

3 劉伯寧;;美“干細胞禁令”螳臂當車?[J];南風窗;2010年20期

4 楊志明;;組織工程的發(fā)展與未來[J];中國修復重建外科雜志;2008年02期

5 張發(fā)寶;楊黃恬;;骨髓間質(zhì)干細胞向心肌細胞分化的可塑性及應用研究進展[J];生理科學進展;2006年03期

6 馬志敏;;胚胎干細胞移植后的存活、增殖及遷移得到證實[J];中國介入心臟病學雜志;2006年05期

7 徐燕寧;關娜;張慶華;雷蕾;;體細胞重編程為多潛能干細胞的研究進展[J];生命科學;2008年02期

8 吳清法,王立生,吳祖澤;間充質(zhì)干細胞的來源及臨床應用[J];軍事醫(yī)學科學院院刊;2002年03期

9 付玉華;周秀梅;徐鳳青;錢其軍;;誘導多潛能干細胞(iPSCs)的研究與應用進展[J];生物化學與生物物理進展;2011年02期

10 胡林萍;高瀛岱;鄭國光;師迎旭;謝印良;劉擁軍;袁衛(wèi)平;程濤;;過氧化氫酶在人臍帶間充質(zhì)干細胞中作用的研究[J];中國實驗血液學雜志;2010年02期

相關會議論文 前9條

1 宋小飛;廖國龍;傅強;徐月敏;;大鼠脂肪干細胞誘導成肌細胞的實驗研究[A];第十五屆全國泌尿外科學術會議論文集[C];2008年

2 宋關斌;秦建;申曉東;嚴潤彬;石軼松;;機械拉伸對大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞增殖的調(diào)節(jié)作用[A];第十次中國生物物理學術大會論文摘要集[C];2006年

3 郭勇;張西正;魏嚴;郭春;徐曉瑩;李瑞欣;張永紅;;大鼠脂肪組織源性間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)及誘導分化[A];中國細胞生物學學會第九次會員代表大會暨青年學術大會論文摘要集[C];2007年

4 時艷;侯玲玲;湯富酬;蔣衛(wèi);王培剛;丁明孝;鄧宏魁;;ActiVinA和RA三步法誘導小鼠胚胎干細胞向胰腺β細胞的定向分化[A];中國細胞生物學學會2005年學術大會、青年學術研討會論文摘要集[C];2005年

5 張彥;李尚珠;;間充質(zhì)干細胞在血管工程中的機制及應用[A];2009全國中西醫(yī)結(jié)合周圍血管疾病學術交流會論文集[C];2009年

6 韓姝;師偉;李艷華;裴雪濤;;大量擴增造血干/祖細胞的轉(zhuǎn)基因基質(zhì)細胞滋養(yǎng)層的初步研究[A];第10屆全國實驗血液學會議論文摘要匯編[C];2005年

7 符岳;黃子;王彤;方向韶;;大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞分離培養(yǎng)及向神經(jīng)元樣細胞分化的實驗研究[A];第十一次全國急診醫(yī)學學術會議暨中華醫(yī)學會急診醫(yī)學分會成立二十周年慶典論文匯編[C];2006年

8 陳槐卿;韓君;陳銳;藥蓉;田衛(wèi);;體外培養(yǎng)大鼠骨髓基質(zhì)細胞生長分化特性的研究[A];21世紀醫(yī)學工程學術研討會論文摘要匯編[C];2001年

9 曹楠;廖婧;劉祖梅;朱文敏;王嘉;劉麗均;郁麗麗;徐平;肖磊;楊黃恬;;大鼠胚胎干細胞向功能性心肌細胞的分化研究[A];中國生理學會第十一屆張錫鈞基金全國青年優(yōu)秀生理學學術論文交流及評獎會議綜合摘要[C];2011年

相關重要報紙文章 前10條

1 朱茜;流式細胞技術推動生命科學快速發(fā)展[N];科技日報;2010年

2 記者 毛文波;法發(fā)現(xiàn)肌肉干細胞胚胎起源[N];科技日報;2005年

3 吳靜芳;泰達將建我國最大干細胞研發(fā)基地[N];中國高新技術產(chǎn)業(yè)導報;2005年

4 編譯 王金元;科學家研究人體再生可能[N];北京科技報;2006年

5 記者 吳國瑛;先在媽媽“肚子”里治病[N];上�？萍紙�;2006年

6 ;采幾根頭發(fā)當“種”,科學家培育出“皮膚”[N];新華每日電訊;2008年

7 記者　陳建強;首家間充質(zhì)干細胞庫在津建成[N];光明日報;2006年

8 胡德榮;羊?qū)殞汅w內(nèi)有了人基因[N];健康報;2006年

9 記者 張麗霞;我市干細胞技術躋身國際前列[N];大連日報;2011年

10 王大鵬 劉墨非 羅德宏;人類克隆 不能將孩子和臟水一起潑掉[N];中國高新技術產(chǎn)業(yè)導報;2005年

相關博士學位論文 前5條

1 劉義;孤雌胚胎干細胞移植治療小鼠心肌梗死的研究[D];南開大學;2012年

2 李靜遠;人骨髓間充質(zhì)干細胞端粒調(diào)控機制的研究[D];浙江大學;2006年

3 薛群;人胎盤源間充質(zhì)樣干細胞生物學特性及移植治療腦出血的實驗研究[D];蘇州大學;2004年

4 聶黎黎;MAPK在骨髓間充質(zhì)干細胞信號轉(zhuǎn)導機制中的作用[D];吉林大學;2013年

5 張昊;小鼠心肌干細胞的體外分離培養(yǎng)、分選與鑒定及他汀對心肌干細胞存活的研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學院;2013年

相關碩士學位論文 前10條

1 周進明;小鼠骨髓間質(zhì)干細胞生物學性狀及應用可行性研究[D];第三軍醫(yī)大學;2001年

2 馮勱;胎盤和臍帶來源組織與細胞的分離、培養(yǎng)及凍存[D];中南大學;2007年

3 曲鑫建;模擬微重力WB-F344肝干細胞三維培養(yǎng)研究[D];西北農(nóng)林科技大學;2006年

4 徐軍軍;外周血來源間充質(zhì)干細胞在組織工程皮膚制備中的作用[D];西北農(nóng)林科技大學;2008年

5 丁以國;BMP-2誘導骨髓間充質(zhì)干細胞向心肌細胞分化的實驗研究[D];蘇州大學;2009年

6 黃黎;單克隆抗體ZUC3免疫磁珠分選人骨髓間充質(zhì)干細胞的方法研究[D];浙江大學;2006年

7 雷霆華;綿羊皮膚類干細胞的分離、培養(yǎng)和鑒定[D];中國農(nóng)業(yè)大學;2005年

8 李偉;山羊表皮干細胞分離純化的研究[D];西北農(nóng)林科技大學;2005年

9 商春華;小鼠胚胎干細胞在生物材料上的三維擴增培養(yǎng)[D];華南理工大學;2012年

10 王挺;兔異體血清及組織提取物對骨髓間充質(zhì)干細胞增殖和分化作用的研究[D];浙江大學;2006年

，

本文編號：2203484