同種大鼠腹腔異位心臟移植模型的建立和常山酮抗免疫排斥反應的研究
本文選題:大鼠同種腹腔異位心臟移植 + 常山酮 ; 參考:《吉林大學》2017年碩士論文
【摘要】:常山酮(Halofuginone HF),又名鹵夫酮,是從中國草本植物常山中提取出來的一種生物堿。近年來,HF具有廣泛的有益的生物活性。研究發(fā)現(xiàn),HF不僅僅具有抗球蟲的作用,還可以調節(jié)免疫系統(tǒng)的功能。有研究已經表明,HF在多種器官移植手術中可以有效的延長移植物的存活時間及受體的存活率。然而,HF在抗免疫排斥反應中對CD4~+CD25~+Foxp3~+調節(jié)性T細胞的作用機制沒有研究。由于HF的藥用價值不斷的被研究證實,本文將通過HF在同種大鼠腹腔異位心臟移植術術后,受體在抗免疫排斥反應中的作用機制進行研究和討論,本研究將為尋找治療免疫排斥反應和解決器官移植中免疫排斥的方法提供部分理論依據。本實驗的設計方案,以Wistar大鼠為供體,SD大鼠為受體,成功建立同種大鼠腹腔異位心臟移植模型,實驗者總結了成功建立此模型的心得以及經驗。本實驗,通過HF作用于模型來分析HF在同種大鼠腹腔異位心臟移植手術中對CD4~+CD25~+Foxp3~+調節(jié)性T細胞的影響。將24只供體Wistar大鼠、24只受體SD大鼠各分組分為兩組,A組移植手術前三天,手術后四天經口給予生理鹽水,作為空白對照組,共12例;B組在移植手術前三天,手術后四天20mg/kg/d HF經口給藥,作為給藥組,共12例。術后每天觀察和評估受體大鼠,通過B超、心電圖,觸診觀察移植物的存活時間以及搏動狀況,在術后3d、5d、7d采取移植物做HE染色,觀察心肌的損傷以及炎性細胞的浸潤,在術后5d、7d,分別取A、B組的外周血、脾臟以及淋巴結進行流式細胞儀檢測CD4~+CD25~+調節(jié)性T細胞(CD4~+CD25~+n Treg)的表達量。在術后第5d、第7d,分別取A、B組的脾臟進行熒光定量pcr檢測脾臟中Foxp3~+的表達量。術后每天觀察和評估結果:A組對照組,術后受體當天精神狀態(tài)良好,進食進水正常,移植心臟搏動強而有力,心率約200次/min;術后第3d。受體反應以及飲食量減少,活動量也相對減少,取供心觀察心臟部分開始變黑,心搏動減弱;術后第5d,受體反應同第3d,甚至反應更加遲鈍,取供心肉眼觀察顏色暗紅發(fā)黑。B組給藥組。術后受體當天精神狀態(tài)良好,進食進水正常,移植心臟搏動強而有力,心率約200次/min;術后第3d、第5d狀態(tài)同當天,分別取供心觀察發(fā)現(xiàn)顏色無暗紅,外觀鮮紅,無明顯血栓及壞死組織。HE染色結果:第3d、第5d、第7d的心臟病理切片結果顯示,A組空白組,低倍鏡下觀察,心肌損傷越來越嚴重,大量炎性細胞浸潤。高倍鏡下,心肌細胞腫脹、空泡變性嚴重。B組給藥組,低倍鏡下顯示,心肌整體病變比空白組輕,心肌間可見炎性細胞的浸潤也有水腫。在高倍鏡下發(fā)現(xiàn),偶見空泡變性,水腫較空白組輕,炎性細胞較空白組少。流式細胞儀檢測結果:在術后第5d、第7d分別對A、B兩組大鼠采集淋巴結、脾臟、外周血進行流式細胞儀分析檢測,結果發(fā)現(xiàn)CD4~+CD25~+n Treg在淋巴結和脾臟有明顯的的升高,在外周血中有明顯下降。熒光定量pcr檢測結果:在術后第5d、第7d分別對A、B兩組大鼠采集脾臟進行熒光定量pcr檢測,結果發(fā)現(xiàn)給藥組脾臟中表達的Foxp3的基因表達量比空白組高,且顯著。結論:成功建立了大鼠同種腹腔異位心臟移植手術模型,常山酮在大鼠異位心臟移植手術模型中具有抗免疫排斥的作用。
[Abstract]:The effects of HF on CD4 ~ + CD25 ~ + Foxp3 ~ + regulatory T cells were studied . The results showed that there were no dark red , bright red , no obvious thrombus and necrotic tissue in the heart . The results showed that the changes of CD4 ~ + CD25 ~ + n - Treg in lymph nodes and spleen were more and more severe than those in the blank group . Results : The gene expression of Foxp3 expressed in the spleen of rats was higher than that in blank group , and the results showed that the rat model of allogeneic heart transplantation was successfully established , and it had anti - immune rejection in the model of ectopic heart transplantation in rats .
【學位授予單位】:吉林大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2017
【分類號】:R654.2;R-332
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本文編號:2043297
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