發(fā)布時(shí)間：2018-06-19 10:18

  本文選題：Sp + K細(xì)胞��； 參考：《基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床》2013年05期

【摘要】：目的研究轉(zhuǎn)錄因子Sp1在K562細(xì)胞誘導(dǎo)向紅系分化過程中的表達(dá)變化,并確定其對于紅系分化及珠蛋白表達(dá)的影響。方法用定量PCR及Western blot的方法確定Sp1在紅系分化過程中的表達(dá)情況。通過RNAi的方法抑制Sp1的表達(dá),并通過聯(lián)苯胺染色確定K562細(xì)胞中血紅蛋白的表達(dá)情況,同時(shí)定量PCR的方法分析紅系分化相關(guān)基因的表達(dá),流式細(xì)胞技術(shù)檢測紅系分化過程中表面標(biāo)志蛋白的表達(dá)情況。結(jié)果在hemin誘導(dǎo)的K562細(xì)胞以及促紅細(xì)胞生成素EPO誘導(dǎo)的造血干細(xì)胞向紅系分化過程中,Sp1的mRNA及蛋白水平均呈明顯下降,提示其可能負(fù)調(diào)節(jié)紅系分化過程。在K562細(xì)胞中抑制Sp1的表達(dá)則可明顯提高K562細(xì)胞中的血紅蛋白含量,促進(jìn)γ-,ε-珠蛋白,CD71,CD235a基因的表達(dá),同時(shí)CD71,CD235a陽性細(xì)胞比例明顯增加。結(jié)論以上結(jié)果說明轉(zhuǎn)錄因子Sp1負(fù)調(diào)節(jié)紅系分化過程,抑制Sp1的表達(dá)可提高K562細(xì)胞中珠蛋白的表達(dá),并促進(jìn)K562細(xì)胞向紅系分化。
[Abstract]:Objective to investigate the expression of transcription factor Sp1 in erythroid differentiation induced by K562 cells and determine its effect on erythroid differentiation and globin expression. Methods quantitative PCR and Western blot were used to determine the expression of Sp1 in erythroid differentiation. The expression of Sp1 was inhibited by RNAi and the expression of hemoglobin in K562 cells was determined by benzidine staining. Meanwhile, the expression of genes related to erythroid differentiation was analyzed by quantitative PCR. Flow cytometry was used to detect the expression of surface marker protein during erythroid differentiation. Results the mRNA and protein levels of Sp1 in K562 cells induced by hemin and erythropoietin EPO-induced hematopoietic stem cells were significantly decreased, suggesting that it may negatively regulate the process of erythroid differentiation. Inhibition of Sp1 expression in K562 cells significantly increased the hemoglobin content and the expression of 緯 -, 蔚 -globin CD71 + CD235a gene in K562 cells, and increased the percentage of CD71 + CD235a positive cells. Conclusion these results suggest that transcription factor Sp1 negatively regulates erythroid differentiation and inhibits the expression of SP1 in K562 cells, which can increase the expression of globin and promote the differentiation of K562 cells into erythrocytes.
【作者單位】： 中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究所醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)國家重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(31201103)
【分類號(hào)】：R341

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本文編號(hào)：2039553