本文選題：胚胎干細(xì)胞 + 微囊體�。� 參考：《臨床兒科雜志》2013年05期

【摘要】：目的探討分離提取及鑒定胚胎干細(xì)胞(ESC)產(chǎn)生的微囊體(MV)的實(shí)驗(yàn)方法,初步研究其促造血的生物學(xué)作用。方法利用超濾離心的方法從小鼠ESC培養(yǎng)上清液中分離提純MV(ES-MV),以小鼠胚胎成纖維細(xì)胞(MEF)培養(yǎng)上清來源的MV(MEF-MV)為對照;采用透射電鏡形態(tài)學(xué)觀察,RT-PCR檢測特異性基因表達(dá)的方法對ES-MV進(jìn)行鑒定;將ES-MV用于環(huán)磷酰胺所致骨髓抑制小鼠,通過骨髓涂片初步觀察其對造血的恢復(fù)作用。結(jié)果透射電鏡下觀察,ES-MV呈明顯異質(zhì)性的圓形或橢圓形小囊泡,直徑約30 nm-1μm不等,有完整的包膜,內(nèi)為低電子密度物質(zhì)。RT-PCR方法從ES-MV中可檢測到Oct-4、Wnt-3、Hoxb4基因的表達(dá),而MEF-MV內(nèi)不能檢測到這些基因的表達(dá);將ES-MV用于骨髓抑制小鼠后,骨髓涂片顯示成熟紅細(xì)胞和有核細(xì)胞比例明顯升高。結(jié)論 ESC可以產(chǎn)生MV,并且是MV的豐富來源;超濾離心法是一種方便實(shí)用的提取ES-MV的方法;ES-MV對促進(jìn)骨髓造血有一定的作用。
[Abstract]:Objective to investigate the method of isolation and identification of microthylated MV produced by embryonic stem cell ESCs and to study the biological effect of MV on hematopoiesis. Methods MVGE-MVV was isolated from the supernatant of mouse ESC culture by ultrafiltration centrifugation, and the MVN MEF-MV derived from the supernatant of mouse embryonic fibroblast cells (MEF) was used as control. The specific gene expression of ES-MV was identified by transmission electron microscopy (TEM) and RT-PCR. ES-MV was used in cyclophosphamide induced bone marrow suppression mice and its hematopoietic recovery was preliminarily observed by bone marrow smear. Results under transmission electron microscope, the oval or circular vesicles were observed to be heterogeneous, with a diameter of about 30 nm-1 渭 m and a complete capsule. The expression of Oct-4 Wnt-3Hoxb4 gene was detected from ES-MV by RT-PCR with a low electron density substance. The expression of these genes was not detected in MEF-MV, and the ratio of mature erythrocytes and nucleated cells was significantly increased in bone marrow smears of mice treated with ES-MV. Conclusion ESC can produce MV and is a rich source of MV, and ultrafiltration centrifugation is a convenient and practical method to extract ES-MV in bone marrow hematopoiesis.
【作者單位】： 貴陽醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院兒科;貴陽市第一人民醫(yī)院檢驗(yàn)科;
【基金】：國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(No.30960412)
【分類號】：R329

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7 陳強(qiáng);成體組織中“類胚胎干細(xì)胞”可塑性的初步研究[D];第三軍醫(yī)大學(xué);2009年

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本文編號：2031170