本文選題：肺炎鏈球菌 + 黏膜免疫��； 參考：《臨床檢驗(yàn)雜志》2013年04期

【摘要】：目的研制一種無(wú)轉(zhuǎn)化能力的肺炎鏈球菌(S.pn)減毒株R6ΔcomE,評(píng)價(jià)其作為S.pn活菌疫苗的保護(hù)效果。方法構(gòu)建comE基因缺陷的R6ΔcomE株,評(píng)價(jià)R6、R6ΔcomE株的轉(zhuǎn)化能力及其毒力;用R6、R6ΔcomE株分別對(duì)BALB/c小鼠進(jìn)行黏膜免疫,用ELISA法檢測(cè)免疫小鼠血清特異性抗體效價(jià)和脾細(xì)胞上清中IFN-γ、IL-4及IL-17A水平;用D39株經(jīng)鼻腔黏膜感染免疫小鼠,觀察生存時(shí)間和生存率。結(jié)果成功構(gòu)建comE缺陷的R6ΔcomE株。體外轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)中R6株轉(zhuǎn)化菌量中位數(shù)為1 970 CFU/mL,體內(nèi)轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)中每只小鼠34 CFU,體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)中R6ΔcomE株轉(zhuǎn)化菌量均為0;感染1×108CFU D39株的小鼠于3 d內(nèi)全部死亡,而感染相同劑量R6、R6ΔcomE株的小鼠均存活21 d,且均于感染后72 h內(nèi)清除細(xì)菌。R6、R6ΔcomE株黏膜免疫小鼠后,血清抗體滴度的中位數(shù)(P25,P75)分別達(dá)1.0×106(6.4×105,1.8×106)、1.2×106(8.1×105,1.6×106),與相應(yīng)陰性對(duì)照組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均0.01);與相應(yīng)陰性對(duì)照組比較,R6、R6ΔcomE株免疫組IL-4、IL-17A均升高(P均0.01),而IFN-γ水平差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)。黏膜免疫R6、R6ΔcomE株的BALB/c小鼠可抵抗D39株感染,生存率分別為60%和70%。結(jié)論 R6ΔcomE株毒力弱,無(wú)轉(zhuǎn)化能力,可誘導(dǎo)對(duì)S.pn感染的免疫保護(hù),是一株安全有潛力的S.pn減毒活菌疫苗。
[Abstract]:Objective to develop a detoxification strain R6 螖 comE with no transformation ability, and to evaluate its protective effect as a live S.pn vaccine. Methods the R6 螖 comE strain was constructed, and the transformation ability and virulence of R6 R6 螖 comE strain were evaluated, the BALB / c mice were immunized with R6N R6 螖 comE strain, the specific antibody titers of serum and the levels of IFN- 緯 IL-4 and IL-17A in spleen cell supernatant of immunized mice were detected by Elisa. The survival time and survival rate of mice immunized with D39 strain of nasal mucosal infection were observed. Results the R6 螖 comE strain with comE deficiency was successfully constructed. In vitro transformation test, the median amount of R6 strain was 1 970 CFU / mL, in vivo transformation test was 34 CFU per mouse, and in vitro and in vivo test R6 螖 comE strain was 0. All the mice infected with 1 脳 108 CFU D39 strain died within 3 days. However, the mice infected with the same dose of R6, R6 螖 comE, survived for 21 days, and the mice were immunized with bacteria, R6, R6 螖 comE, within 72 hours after infection. The median titer of serum antibody was 1.0 脳 10 ~ (6) C ~ (6.4 脳 10 ~ (5) ~ (1.8) 脳 10 ~ (6) C ~ (-1) = 1.2 脳 10 ~ (6) C ~ (8.1) 脳 10 ~ (5) C ~ (1.6) 脳 10 ~ (6), there was significant difference between the two groups (P = 0.01), and compared with the corresponding negative control group, the IL-4 IL-17A of IL-4 and IL-17A were all increased (P = 0.01), but the level of IFN- 緯 was not significantly different from that of the corresponding negative control group (P < 0.05), but there was no significant difference in the level of IFN- 緯 between the two groups. BALB / c mice immunized with R6 / R6 螖 comE strain could resist D39 strain infection and the survival rate was 60% and 70%, respectively. Conclusion R6 螖 comE strain has weak virulence and no transformation ability, which can induce the immune protection against S.pn infection. It is a safe and potential vaccine against S.pn attenuated live bacteria.
【作者單位】： 重慶醫(yī)科大學(xué)檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)院檢驗(yàn)系臨床檢驗(yàn)診斷學(xué)實(shí)驗(yàn)室;
【基金】：國(guó)家自然科學(xué)基金(31070819) 重慶市渝中區(qū)科技計(jì)劃項(xiàng)目(20110315) 重慶醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)教學(xué)管理中心創(chuàng)新實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目(201117)
【分類號(hào)】：R392

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本文編號(hào)：2005968