結(jié)核分枝桿菌MPT64抗原對巨噬細胞凋亡的抑制作用
本文選題:結(jié)核分枝桿菌 + MPT抗原; 參考:《第二軍醫(yī)大學學報》2013年05期
【摘要】:目的探討結(jié)核分枝桿菌MPT64抗原對RAW264.7巨噬細胞的影響及相關(guān)機制。方法將MPT64基因在大腸桿菌中表達、純化,獲得的純化蛋白用于后續(xù)實驗。將用佛波醇酯(PMA)分化的RAW264.7巨噬細胞分為對照組、卡介菌純蛋白衍生物(BCGPPD)誘導組、BCG-PPD+MPT64共同作用組,分別給予相應的處理。孵育16 h后,采用流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡情況,用ELISA試劑盒檢測培養(yǎng)細胞上清的細胞因子TNF-α及IL-10水平。結(jié)果 BCG-PPD可以誘導RAW264.7巨噬細胞凋亡,BCG-PPD+MPT64組的細胞凋亡水平低于BCG-PPD組(P0.05)。細胞因子上清檢測結(jié)果表明,與對照組相比,BCG-PPD作用組的TNF-α水平升高(P0.01),而IL-10水平無明顯變化;與BCG-PPD組相比,BCG-PPD+MPT64共同孵育組的IL-10水平升高(P0.01),而TNF-α水平無明顯變化。結(jié)論 MPT64抗原可能是一種毒力因子,能夠抑制BCG-PPD誘導的巨噬細胞凋亡,該作用可能是通過提高IL-10水平來實現(xiàn)的。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of Mycobacterium tuberculosis MPT64 antigen on RAW264.7 macrophages and its related mechanism. Methods MPT64 gene was expressed in Escherichia coli and purified. RAW264.7 macrophages differentiated by phorbol alcohol ester (PMA) were divided into two groups: control group, BCGPPD-induced group and BCG-PPD MPT64 group. After incubation for 16 h, apoptosis was detected by flow cytometry and the levels of cytokines TNF- 偽 and IL-10 in supernatant of cultured cells were detected by Elisa kit. Results BCG-PPD could induce apoptosis of RAW264.7 macrophages. The level of apoptosis in BCG-PPD MPT64 group was lower than that in BCG-PPD group. The results of cytokine supernatant test showed that the level of TNF- 偽 in BCG-PPD treated group was higher than that in control group, but the level of IL-10 was not changed, but the level of IL-10 in BCG-PPD MPT64 co-incubated group was higher than that in BCG-PPD MPT64 group, but the level of TNF- 偽 had no obvious change. Conclusion MPT64 antigen may be a virulence factor, which can inhibit the apoptosis of macrophages induced by BCG-PPD, which may be achieved by increasing the level of IL-10.
【作者單位】: 海軍醫(yī)學研究所航空醫(yī)學研究室;成都軍區(qū)昆明總醫(yī)院傳染結(jié)核科;
【基金】:國家自然科學基金(31070121) 上海市自然科學基金(08ZR1405600)~~
【分類號】:R378
【參考文獻】
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【共引文獻】
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,本文編號:1994415
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