檢測結(jié)核分枝桿菌蛋白抗原b夾心ELISA的建立及其應(yīng)用
本文選題:結(jié)核分枝桿菌蛋白抗原b + 結(jié)核性腦膜炎 ; 參考:《細胞與分子免疫學雜志》2013年05期
【摘要】:目的建立定量檢測腦脊液中結(jié)核分枝桿菌蛋白抗原b的夾心ELISA,以便用于診斷結(jié)核性腦膜炎。方法制備抗結(jié)核分枝桿菌蛋白抗原b鼠源性單克隆抗體(mAb)及兔多克隆抗體;以單克隆抗體為包被抗體,多克隆抗體為檢測抗體,建立檢測結(jié)核分枝桿菌蛋白抗原b的雙抗體夾心ELISA;應(yīng)用此方法檢測正常人(n=6)、非結(jié)核性腦膜炎患者(n=26)及臨床確診結(jié)核性腦膜炎患者(n=42)的腦脊液標本中蛋白抗原b的含量,并分析其與結(jié)核性腦膜炎活動性感染的相關(guān)性。結(jié)果成功建立了檢測蛋白抗原b的夾心ELISA,敏感度可達0.4μg/L。應(yīng)用該方法在正常人及非結(jié)核性腦膜炎患者腦脊液中未檢測到蛋白抗原b;在結(jié)核性腦膜炎患者腦脊液中蛋白抗原b含量顯著升高。結(jié)論建立了敏感、特異檢測結(jié)核分枝桿菌蛋白抗原b含量的ELISA,為活動性結(jié)核性腦膜炎的診斷提供一種有效手段。
[Abstract]:Objective to establish a sandwich ELISA assay for the detection of Mycobacterium tuberculosis protein antigen b in cerebrospinal fluid (CSF) for the diagnosis of tuberculous meningitis. Methods the monoclonal antibody (mAb) and rabbit polyclonal antibody against Mycobacterium tuberculosis protein antigen b mouse were prepared, and the monoclonal antibody was used as the coating antibody and the polyclonal antibody as the detection antibody. To establish a double antibody sandwich ELISAmethod for detecting mycobacterium tuberculosis protein antigen b, and to detect the content of protein antigen b in cerebrospinal fluid (CSF) samples of normal persons, non-tuberculous meningitis patients, and clinically diagnosed tuberculous meningitis patients. The correlation between tuberculous meningitis and active infection was analyzed. Results the sandwich ELISAs for the detection of protein antigen b were successfully established, with a sensitivity of 0.4 渭 g / L. No protein antigen b was detected in cerebrospinal fluid (CSF) of normal subjects and non-tuberculous meningitis patients, and the content of protein antigen b in cerebrospinal fluid (CSF) of tuberculous meningitis patients increased significantly. Conclusion ELISA, which is sensitive and specific for the detection of Mycobacterium tuberculosis protein b, is an effective method for the diagnosis of active tuberculous meningitis.
【作者單位】: 第四軍醫(yī)大學西京醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科;中鐵二十局中心醫(yī)院;第四軍醫(yī)大學免疫學教研室;
【基金】:陜西省科技統(tǒng)籌創(chuàng)新工程計劃(2011KTCG03-12)
【分類號】:R392.1
【參考文獻】
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【共引文獻】
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