本文選題：針刺 + 干眼　； 參考：《南京中醫(yī)藥大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：目的:通過皮下注射氫溴酸東莨菪堿注射液建立水液缺乏性兔干眼模型,探討針刺對此模型眼表及淚腺細(xì)胞的影響,探索針刺對干眼的作用機制。方法:健康新西蘭白兔24只隨機分為空白組、模型組、針刺組共3組,每組8只,空白組不作任何處理;模型組和針刺組皮下注射氫溴酸東莨菪堿,每日4次,每次2mg.kg-1,直至實驗結(jié)束;針刺組在干眼模型建立成功后進(jìn)行針刺,每日針1次,共14天。不同時段觀察各組的SchirmerⅠ試驗(SIT)、淚膜破裂時間(BUT)、角膜熒光素鈉染色(CFS),光鏡、電鏡觀察淚腺形態(tài)學(xué)變化,免疫組化檢測淚腺組織中凋亡相關(guān)基因蛋白的表達(dá),聯(lián)酶免疫法檢測淚腺組織中乙酰膽堿(ACh)的含量。結(jié)果:1.SIT:針刺第4、7、14天,針刺組與模型組相比,兩組淚流量差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。針刺第14天,針刺組與實驗前相比,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。2.BUT:針刺第7、14天,針刺組與模型組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。針刺第14天,針刺組與實驗前相比,差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。3.CFS:針刺第7、14天,針刺組與模型組相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。針刺組在針刺后的各時段與針刺前相比,差異顯著(P0.05),且在針刺第4天時,CFS評分最高,此后即呈現(xiàn)逐漸下降的趨勢。4.淚腺形態(tài)學(xué)觀察:空白組的正常淚腺組織中未見明顯細(xì)胞擴張及萎縮;模型組的淚腺上皮細(xì)胞萎縮,細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)較少,可見大量淋巴細(xì)胞浸潤;針刺組中淚腺柱狀上皮細(xì)胞擴張,未見明顯腺體萎縮,胞漿豐富,腺體間質(zhì)少量淋巴細(xì)胞浸潤,。5.淚腺組織凋亡相關(guān)基因蛋白的表達(dá):空白組中偶見陽性細(xì)胞表達(dá),模型組可見大量淡黃色至棕黃色細(xì)顆粒細(xì)胞,針刺組中見少量淡黃色至棕黃色細(xì)顆粒細(xì)胞;針刺組淚腺細(xì)胞凋亡因子相關(guān)基因蛋白Bax、Fas及FasL陽性表達(dá)的細(xì)胞數(shù)明顯低于模型組,P0.05;針刺組的Bax/Bcl_2、Fas/FasL與空白組均無統(tǒng)計學(xué)差異,P0.05。6.淚腺中Ach含量測定:針刺組淚腺組織中Ach含量較模型組高,差異顯著,有統(tǒng)計學(xué)意義,P0.05;且針刺組與空白組相比時,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義,P0.05。結(jié)論:1皮下注射氫溴酸東莨菪堿可以成功制備兔干眼模型,且穩(wěn)定持續(xù)。2光鏡、電鏡下觀察模型組淚腺組織可見淚腺上皮細(xì)胞萎縮,細(xì)胞內(nèi)物質(zhì)較少,可見大量淋巴細(xì)胞浸潤。針刺組的淚腺細(xì)胞胞漿豐富,排列緊密,活動良好,與空白組接近。3針刺對水液缺乏性兔干眼模型有良好干預(yù)作用,可以提高淚液分泌量,增加淚膜穩(wěn)定性,改善角膜狀況,其機制可能為通過促進(jìn)Ach釋放,抑制干眼兔淚腺組織的細(xì)胞凋亡和腺體萎縮,改善兔干眼模型的淚腺代謝,從而達(dá)到增加淚液分泌的作用。
[Abstract]:Objective: to study the effect of acupuncture on ocular surface and lacrimal gland cells in rabbits with water deficiency by subcutaneous injection of scopolamine hydrobromide, and to explore the mechanism of acupuncture on dry eye. Methods: Twenty-four healthy New Zealand white rabbits were randomly divided into three groups: model group and acupuncture group with 8 rabbits in each group without any treatment, the model group and acupuncture group were subcutaneously injected with scopolamine hydrobromide 4 times a day. The acupuncture group was treated with acupuncture once a day for 14 days after the establishment of the dry eye model. Schirmer I test, lacrimal film rupture time, corneal fluorescein sodium staining, morphological changes of lacrimal gland were observed by light microscope and electron microscope. The expression of apoptosis-related gene protein in lacrimal gland was detected by immunohistochemistry. The content of acetylcholine (ache) in lacrimal gland was detected by Elisa. Results 1. Sit: on the 14th day of acupuncture, there was a significant difference in lacrimal flow between the acupuncture group and the model group (P 0.05). On the 14th day of acupuncture, there was no significant difference between the acupuncture group and the experimental group (P < 0.05). 2.But: on the 714th day of acupuncture, the difference between the acupuncture group and the model group was statistically significant (P < 0.05). On the 14th day, there was no significant difference between the acupuncture group and the experimental group. 3. CFS: on the 714th day of acupuncture, the difference between the acupuncture group and the model group was statistically significant. The difference between the acupuncture group and the acupuncture group was significant (P 0.05), and the CFS score of the acupuncture group was the highest on the 4th day after acupuncture, and then decreased gradually. 4. Morphological observation of lacrimal gland: there was no obvious cell expansion and atrophy in normal lacrimal gland tissue in blank group, but the epithelial cells of lacrimal gland in model group were atrophied, the substance in the cells was less, and a large number of lymphocytes were infiltrated. In acupuncture group, the columnar epithelial cells of lacrimal gland were dilated, no obvious gland atrophy, abundant cytoplasm, and a small amount of lymphocyte infiltration in glandular stroma. The expression of apoptosis-related gene protein in lacrimal gland tissue: positive cells were occasionally found in blank group, a large number of light yellow to brown fine granular cells were found in model group, and a small amount of light yellow to brown fine granular cells were found in acupuncture group. The number of positive expression of Bax-FAS and FasL in lacrimal gland apoptosis-associated gene protein in acupuncture group was significantly lower than that in model group (P0.05), but there was no significant difference in Bax / Bcl2Fas-FasL between acupuncture group and blank group (P0.05.6). The content of Ach in lacrimal gland in acupuncture group was higher than that in model group (P 0.05), and there was no significant difference between acupuncture group and blank group (P 0.05). Conclusion Anisodamine hydrobromide subcutaneously can be used to establish rabbit dry eye model, and it is stable and persistent under light microscope. Under electron microscope, the lacrimal gland epithelial cells atrophy, the intracellular substance is less, and a large number of lymphocytes infiltrate can be seen in the lacrimal gland tissue of the model group. The cytoplasm of lacrimal gland cells in acupuncture group was rich, compact and active, which had a good intervention effect on dry eye model of rabbits with water deficiency, and could increase tear secretion, increase the stability of lacrimal film and improve the corneal condition. The mechanism may be to promote the release of Ach, inhibit the apoptosis of lacrimal gland and atrophy of gland in dry eye rabbit, improve the metabolism of lacrimal gland in rabbit dry eye model, so as to increase the secretion of lacrimal fluid.
【學(xué)位授予單位】：南京中醫(yī)藥大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2017
【分類號】：R245;R-332

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本文編號：1974206