本文選題：HaCaT細(xì)胞 + IL-　； 參考：《安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)》2013年08期

【摘要】：目的探討白介素-10(IL-10)對皮膚角質(zhì)形成(HaCaT)細(xì)胞中血管內(nèi)皮生長因子A(VEGF-A)表達(dá)的影響及其可能機(jī)制。方法培養(yǎng)HaCaT細(xì)胞,用不同劑量IL-10刺激后,通過熒光定量PCR(Real-time PCR)在mRNA水平上分析IL-10對HaCaT細(xì)胞中VEGF-A表達(dá)的影響;通過Western blot法分析IL-10對HaCaT細(xì)胞信號通路:絲裂原蛋白激活激酶-胞外信號調(diào)節(jié)激酶(MAPKs-ERK1/2)及磷脂酰肌醇激酶-絲氨酸/蘇氨酸激酶(PI3K-AKT)的影響,并通過MAPKs-ERK1/2特異性阻斷劑PD98059及PI3K-AKT特異性阻斷劑LY294002阻斷這兩個(gè)信號途徑,進(jìn)而分析IL-10影響HaCaT細(xì)胞中VEGF-A表達(dá)的可能機(jī)制。結(jié)果 Real-time PCR分析結(jié)果顯示IL-10能抑制HaCaT細(xì)胞中VEGF-A轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá);Western blot法結(jié)果顯示:IL-10能夠增加ERK1/2和AKT的磷酸化水平。阻斷劑研究顯示IL-10抑制VEGF-A轉(zhuǎn)錄水平表達(dá)的作用不依賴MAPKs-ERK1/2和PI3K-AKT途徑。結(jié)論 IL-10抑制HaCaT細(xì)胞中VEGF-A轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá),不依賴MAPKs-ERK1/2和PI3K-AKT途徑發(fā)揮作用。
[Abstract]:Objective to investigate the effect of interleukin-10 (IL-10) on the expression of vascular endothelial growth factor (VEGF-A) in human keratinocytes (HaCaT) and its possible mechanism. Methods HaCaT cells were cultured and stimulated with different doses of IL-10. The effect of IL-10 on VEGF-A expression in HaCaT cells was analyzed at mRNA level by fluorescence quantitative PCR(Real-time. The effects of IL-10 on the signal pathway of HaCaT cells: mitogen-activated kinase-extracellular signal-regulated kinase MAPKs-ERK1 / 2) and phosphatidylinositol kinase-serine / threonine kinase (PI3K-AKT) were analyzed by Western blot assay. The two signaling pathways were blocked by MAPKs-ERK1/2 specific blocker PD98059 and PI3K-AKT specific blocker LY294002, and the possible mechanism of IL-10 affecting VEGF-A expression in HaCaT cells was analyzed. Results Real-time PCR analysis showed that IL-10 could inhibit the expression of VEGF-A transcription in HaCaT cells. Western blot assay showed that WIL-10 could increase the phosphorylation of ERK1/2 and AKT. Antagonist studies have shown that the inhibition of VEGF-A transcription by IL-10 does not depend on the MAPKs-ERK1/2 and PI3K-AKT pathways. Conclusion IL-10 inhibits the expression of VEGF-A in HaCaT cells and does not depend on the MAPKs-ERK1/2 and PI3K-AKT pathways.
【作者單位】： 安徽醫(yī)科大學(xué)生物化學(xué)教研室;合肥師范學(xué)院化學(xué)化工系;
【基金】：國家自然科學(xué)基金(編號:81271748)
【分類號】：R392.11

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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本文編號：1960802