本文選題：尾蚴性皮炎 + 血吸蟲(chóng)��； 參考：《天津醫(yī)科大學(xué)》2017年碩士論文

【摘要】：目的:探究磷脂酶Cε(PLCε)在日本血吸蟲(chóng)(SJ)尾蚴性皮炎中的作用及其機(jī)制。方法:用日本血吸蟲(chóng)尾蚴感染PLCε野生型(WT)與PLCε敲除型(KO)兩基因型小鼠,分別建立Ⅰ型和Ⅳ型超敏反應(yīng)模型。在感染后不同時(shí)間點(diǎn)獲取小鼠皮膚組織,每基因型不同時(shí)間點(diǎn)分別有3只小鼠。將獲取的小鼠皮膚組織分成3份,分別從組織病理學(xué)、分子生物學(xué)和免疫學(xué)三個(gè)方面進(jìn)行分析。1.進(jìn)行石蠟包埋,制作石蠟切片,進(jìn)行蘇木素伊紅(HE)染色,分析皮膚組織病理變化,并拍照記錄。2.提取總RNA,并進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄,用qRT-PCR的方法檢測(cè)相關(guān)細(xì)胞因子mRNA表達(dá)水平。3.用O.C.T包埋,制作冰凍切片進(jìn)行免疫熒光染色,探究炎癥因子表達(dá)位置及表達(dá)量。結(jié)果:1.HE染色結(jié)果顯示,在Ⅰ型尾蚴性皮炎模型中PLCεKO與WT組小鼠皮膚炎癥反應(yīng)無(wú)顯著性差異,兩基因型小鼠皮膚組織肥厚度以及炎性細(xì)胞數(shù)量表現(xiàn)出相同的變化趨勢(shì),炎細(xì)胞數(shù)量在12h達(dá)到高峰,之后有下降趨勢(shì)。PLCεWT與KO兩基因型之間差異不明顯(均P0.05)。2.在Ⅳ型尾蚴性皮炎模型中,PLCεKO小鼠與WT小鼠皮膚肥厚度和炎細(xì)胞數(shù)量都表現(xiàn)出相同的變化趨勢(shì),皮膚厚度隨感染時(shí)間延長(zhǎng)呈增厚趨勢(shì),PLCε基因敲除后,皮膚厚度顯著受到抑制(t48h=5.317,P=0.000;t72h=10.162,P=0.000),在48 h,炎性細(xì)胞浸潤(rùn)明顯減弱(t48h=2.888,P=0.020)。3.qRT-PCR檢測(cè)相關(guān)細(xì)胞因子mRNA表達(dá)水平結(jié)果顯示,成纖維細(xì)胞、角質(zhì)細(xì)胞等非免疫細(xì)胞所分泌的細(xì)胞因子IL-1α,IL-1β,趨化因子Cxcl-1,Cxcl-2mRNA的表達(dá)在KO組明顯受到抑制(IL-1α:t12h=4.785,P=0.000;t24h=2.109,P=0.046;IL-1β:t6h=3.187,P=0.004;t12h=5.049,P=0.000;Cxcl-1:t12h=4.858,P=0.000;Cxcl-2:t24h=7.957,P=0.000)。而T細(xì)胞衍生因子IL-4,IFNg,IL-17等以及IL-23 mRNA的表達(dá)量表現(xiàn)出升高的趨勢(shì),但是在WT與KO組間無(wú)顯著性差異(IL-4:t24h=0.496,P=0.625;IFNg:t24h=-0.035,P=0.973;IL-17:t24h=0.112,P=0.938;IL-23:t24h=-1.151,P=0.261)。4.早期炎癥細(xì)胞因子IL-1α,IL-1β免疫熒光染色結(jié)果顯示,IL-1α表達(dá)在表皮及真皮位置,IL-1β主要表達(dá)在表皮位置,并且WT兩種炎癥因子蛋白的表達(dá)量相對(duì)KO組較高。結(jié)論:1.PLCε不影響速發(fā)型尾蚴性皮炎;2.PLCε影響遲發(fā)型尾蚴性皮炎;3.PLCε下調(diào)促炎因子(40)L-1α,IL-1β以及趨化因子Cxcl-1,Cxcl-2等非免疫細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子mRNA的表達(dá)抑制了遲發(fā)型尾蚴性皮炎。
[Abstract]:Objective: to investigate the role and mechanism of phospholipase C 蔚 -PLC 蔚 in cercaritic dermatitis of Schistosoma japonicum. Methods: two genotypes of Schistosoma japonicum cercariae infected with PLC 蔚 wild type (WTT) and PLC 蔚 knockout type (KO) were used to establish type 鈪，

本文編號(hào)：1946021