單人袖套法建立小鼠頸部心臟移植模型
本文選題:心臟移植 + 模型 ; 參考:《上海醫(yī)學(xué)》2013年05期
【摘要】:目的在雙人袖套法建立小鼠頸部心臟移植模型的基礎(chǔ)上,對(duì)其核心步驟進(jìn)行改進(jìn),使手術(shù)由單人即可完成。方法供、受體分別為BALB/c小鼠(50只)和C57BL/6小鼠(50只),應(yīng)用內(nèi)芯固定套管的"袖套"法血管吻合技術(shù),進(jìn)行小鼠頸部心臟移植。術(shù)后每天觸摸小鼠頸部觀察移植心臟的搏動(dòng)情況。移植心臟搏動(dòng)持續(xù)3d以上即表示移植成功,觀察移植心臟的存活時(shí)間。術(shù)后第7天隨機(jī)選取10只受體小鼠將其處死,取其移植心臟,經(jīng)10%多聚甲醛固定、石蠟包埋、切片后脫水、固定,經(jīng)蘇木精-伊紅(H-E)染色,置于光學(xué)顯微鏡下觀察移植心臟的心肌結(jié)構(gòu),判斷受體小鼠移植心臟的排斥反應(yīng)分級(jí)。結(jié)果正式實(shí)驗(yàn)50次。術(shù)后移植心臟復(fù)跳率為100%。1只受體小鼠術(shù)后未蘇醒,另1只受體小鼠術(shù)后第2天移植心臟停跳;單人袖套法建立小鼠頸部心臟移植模型的成功率為96%(48/50)。供心缺血時(shí)間18~35min,平均供心缺血時(shí)間為(26.2±5.4)min;手術(shù)時(shí)間73~119min,平均手術(shù)時(shí)間為(93.5±12.7)min;移植心臟存活時(shí)間7~9d,平均移植心臟存活時(shí)間為(8.1±0.6)d。病理學(xué)檢查示,移植心臟的心肌細(xì)胞間質(zhì)有大量淋巴、巨噬細(xì)胞浸潤(rùn),伴有明顯的水腫、出血和心肌壞死。10只小鼠的移植心臟均出現(xiàn)排斥反應(yīng),其中3A級(jí)排斥反應(yīng)2只,3B級(jí)5只,4級(jí)3只。結(jié)論經(jīng)改進(jìn)后的單人袖套法建立小鼠頸部心臟移植模型的成功率較高,且操作簡(jiǎn)便,值得推廣。
[Abstract]:Objective on the basis of establishing mouse cervical heart transplantation model by double cuff method, the core steps were improved to make the operation complete by single person. Methods the recipients were BALB/c mice (n = 50) and C57BL/6 mice (n = 50). The cervical heart transplantation was carried out by using the technique of "cuff" vascular anastomosis with inner core fixation cannula. Every day after operation, the mouse neck was touched to observe the pulsatility of the transplanted heart. The beating duration of the transplanted heart for more than 3 days indicated that the transplant was successful, and the survival time of the transplanted heart was observed. On the 7th day after operation, 10 recipient mice were randomly selected to be killed, and their hearts were transplanted. The hearts were fixed with 10% paraformaldehyde, embedded in paraffin, dehydrated and fixed by sections, and stained by hematoxylin-eosin (H-E). The myocardial structure of the transplanted heart was observed under optical microscope, and the rejection grade of the transplanted heart in the recipient mice was determined. Results 50 formal experiments were conducted. After operation, 100.1 recipient mice did not wake up, the other one received cardiac arrest on the second day after operation, and the success rate of single sleeve method was 96 / 48 / 50. The mean ischemic time of donor heart was 26.2 鹵5.4 min, the mean operation time was 73.5 鹵12.7 min, the mean ischemic time of donor heart was 73.5 鹵12.7 min, the mean time of donor heart ischemia was 8.1 鹵0.6 min, the survival time of donor heart was 79 days, the mean survival time of donor heart was 8.1 鹵0.6 minutes. Histopathological examination showed that there were a large number of lymphoid, macrophage infiltration, edema, hemorrhage and myocardial necrosis in the cardiac stroma of the transplanted heart in 10 mice. Among them, there were 3 cases of 3 A grade rejection, 3 cases of grade 3 B, 5 cases of grade 4 and 3 cases of grade 4 rejection. Conclusion the improved single cuff method has a high success rate and is worth popularizing because of its high success rate and simple operation.
【作者單位】: 復(fù)旦大學(xué)附屬中山醫(yī)院心外科;
【基金】:上海市重點(diǎn)學(xué)科建設(shè)項(xiàng)目資助(B116)
【分類號(hào)】:R-332
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