本文選題：前軟骨干細(xì)胞 + 免疫磁珠分選��； 參考：《中國(guó)矯形外科雜志》2013年13期

【摘要】：[目的]研究兔前軟骨干細(xì)胞PSCs,(precartilagious stem cells)的分離、培養(yǎng)方法及增殖、表型特征,為細(xì)胞移植治療椎間盤退變,提供合適的種子細(xì)胞。[方法]取胎兔骨骺周圍軟骨膜(LaCroix環(huán))中的細(xì)胞進(jìn)行原代培養(yǎng),然后采用免疫磁珠分離系統(tǒng)分選純化PSCs。體外培養(yǎng),傳代,凍存復(fù)蘇,繪制生長(zhǎng)曲線,觀察細(xì)胞特性。分別采用免疫組化、免疫熒光、RT-PCR等方法鑒定純化后的PSCs。[結(jié)果]免疫磁珠分離可獲得純度較高的兔PSCs,培養(yǎng)后成活率高,細(xì)胞狀態(tài)良好。細(xì)胞凍存復(fù)蘇后,細(xì)胞增殖速度、細(xì)胞形態(tài)及表面標(biāo)志物無(wú)明顯變化。免疫組化、免疫熒光、RT-PCR等方法鑒定后,細(xì)胞都有明顯的PSCs表面特異性標(biāo)記物的表達(dá)。[結(jié)論]PSCs存在于LaCroix環(huán)中,免疫磁珠分離法得到的PSCs,體外培養(yǎng)條件下,細(xì)胞增殖較快,生物學(xué)特性穩(wěn)定。
[Abstract]:[objective] to study the isolation, culture, proliferation and phenotypic characteristics of rabbit anterior chondrocyte stem cells (PSCs) in order to provide suitable seed cells for the treatment of disc degeneration. [methods] the cells from the periepiphyseal perichondrium of fetal rabbits were cultured in primary culture, and PSCs were purified by immunomagnetic bead separation system. Culture in vitro, passage, cryopreservation and resuscitation, draw growth curve, observe cell characteristics. The purified PSCswere identified by immunohistochemistry and immunofluorescence reverse transcription polymerase chain reaction (RT-PCR). [results] PSCs with high purity could be obtained by immunomagnetic beads separation. The survival rate was high and the cells were in good condition. After cryopreservation and resuscitation, there were no significant changes in cell proliferation rate, cell morphology and surface markers. The expression of PSCs surface specific markers was detected by immunohistochemistry and RT-PCR. [conclusion] PSCs exists in the LaCroix ring, and the PSCs obtained by immunomagnetic beads method can proliferate rapidly and have stable biological characteristics in vitro.
【作者單位】： 南京醫(yī)科大學(xué)附屬無(wú)錫市人民醫(yī)院骨科;
【基金】：南京醫(yī)科大學(xué)科技發(fā)展基金重點(diǎn)項(xiàng)目(項(xiàng)目編號(hào):2010NJMUZ64,No.2011NJMU205) 國(guó)家自然科學(xué)基金青年科學(xué)基金項(xiàng)目(項(xiàng)目編號(hào):81101374)
【分類號(hào)】：R329

【參考文獻(xiàn)】

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【二級(jí)參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：1829360