模式抗原Mannan-TTC的制備及免疫原性分析
本文選題:甘露聚糖 + 免疫原性; 參考:《中國(guó)免疫學(xué)雜志》2013年03期
【摘要】:目的:制備高免疫原性的模式抗原Mannan-TTC,分析其免疫原性。方法:將甘露聚糖(Mannan)與破傷風(fēng)毒素C片段(TTC)蛋白進(jìn)行化學(xué)交聯(lián),SDS-PAGE分析交聯(lián)產(chǎn)物。用混合淋巴細(xì)胞反應(yīng)檢測(cè)DC負(fù)載Mannan-TTC刺激同種異體T細(xì)胞增殖的能力;WST-1和ELISA檢測(cè)TTC特異性CD4+T細(xì)胞的增殖和分泌IFN-γ的能力;小鼠免疫后,用ELISA檢測(cè)TTC特異性抗體水平。結(jié)果:成功交聯(lián)Mannan與TTC,獲得模式抗原Mannan-TTC。該交聯(lián)產(chǎn)物能通過活化樹突狀細(xì)胞(DC),不僅增強(qiáng)了對(duì)同種異體T細(xì)胞增殖的能力,而且顯著增強(qiáng)TTC抗原特異性的CD4+T淋巴細(xì)胞增殖及分泌細(xì)胞因子IFN-γ。動(dòng)物免疫實(shí)驗(yàn)則顯示,該交聯(lián)產(chǎn)物能刺激小鼠免疫細(xì)胞產(chǎn)生TTC抗原特異性的抗體,但與單純TTC抗原刺激相比,無顯著性差異。結(jié)論:所獲Mannan-TTC抗原免疫原性好,能顯著增強(qiáng)細(xì)胞免疫應(yīng)答,為研究體內(nèi)外抗原提呈、免疫應(yīng)答提供了良好的模式抗原。
[Abstract]:Aim: to prepare a model antigen Mannan-TTC with high immunogenicity and analyze its immunogenicity. Methods: Mannan was chemically crosslinked with tetanus toxin C (TTC) protein, and the crosslinked products were analyzed by SDS-PAGE. The ability of DC loaded Mannan-TTC to stimulate the proliferation of allogeneic T cells and the ability of TTC specific CD4 T cells to proliferate and secrete IFN- 緯 were detected by mixed lymphocyte reaction and ELISA was used to detect the level of TTC specific antibody. Results: the model antigen Mannan-TTCwas obtained by successfully crosslinking Mannan with TTC. By activating dendritic cells, the crosslinked product not only enhanced the proliferation of allogeneic T cells, but also significantly enhanced the proliferation and secretion of IFN- 緯, a cytokine of CD4 T lymphocytes specific to TTC antigen. Animal immunoassay showed that the cross-linked product could stimulate the immune cells of mice to produce TTC antigen-specific antibodies, but there was no significant difference compared with the stimulation of TTC antigen alone. Conclusion: the obtained Mannan-TTC antigen has good immunogenicity and can significantly enhance the cellular immune response, which provides a good model antigen for the study of antigen presentation and immune response in vivo and in vitro.
【作者單位】: 新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)系;新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科;新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第三附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科;
【基金】:國(guó)家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(31100645) 河南省科技攻關(guān)計(jì)劃項(xiàng)目(102102310154) 河南省高?萍紕(chuàng)新人才項(xiàng)目(2012HASTIT024) 河南省高校青年教師骨干項(xiàng)目(2010GGJS-117) 河南省教育廳科學(xué)技術(shù)研究重點(diǎn)項(xiàng)目(12A320017)資助項(xiàng)目 新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院重點(diǎn)學(xué)科開放基金(ZD200928)資助項(xiàng)目
【分類號(hào)】:R392.1
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