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CD59在T細(xì)胞LAT脂筏內(nèi)移位及跨膜信號轉(zhuǎn)導(dǎo)中的作用

發(fā)布時(shí)間:2018-04-25 08:04

  本文選題:CD + LAT。 參考:《免疫學(xué)雜志》2013年04期


【摘要】:目的用前期構(gòu)建好的LAT-EGFP質(zhì)粒轉(zhuǎn)染Jurkat細(xì)胞,探討單克隆抗體交聯(lián)CD59前后CD59與接頭蛋白分子LAT在Jurkat細(xì)胞活化轉(zhuǎn)導(dǎo)中的相關(guān)作用。方法采用電轉(zhuǎn)染的方法轉(zhuǎn)染Jurkat細(xì)胞,抗體交聯(lián)CD59后共聚焦顯微鏡下觀察細(xì)胞膜上LAT-EGFP分子分布的變化;利用噻唑藍(lán)(MTT)比色法檢測CD59抗體交聯(lián)前后Jurkat細(xì)胞的增殖效應(yīng);用Western blot技術(shù)檢測CD59抗體交聯(lián)前后LAT磷酸化情況。結(jié)果共聚焦顯微鏡下可觀察到CD59抗體交聯(lián)后LAT-EGFP由散在分布為主變?yōu)辄c(diǎn)簇狀分布為主;CD59抗體交聯(lián)刺激組Jurkat細(xì)胞增殖能力增加;Western blot結(jié)果表明CD59抗體交聯(lián)后LAT磷酸化水平增加。結(jié)論抗體交聯(lián)CD59能使接頭蛋白分子LAT進(jìn)入脂筏,并增強(qiáng)T細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)效應(yīng)。
[Abstract]:Objective to investigate the role of CD59 and LAT in the activation transduction of Jurkat cells before and after CD59 crosslinking with monoclonal antibody (McAb), using the constructed LAT-EGFP plasmid to transfect Jurkat cells. Methods Jurkat cells were transfected by electrotransfection. The distribution of LAT-EGFP molecules on the cell membrane was observed under confocal microscope after cross-linking of CD59, and the proliferative effect of Jurkat cells before and after cross-linking of CD59 antibody was detected by using thiazolyl blue Jurkat colorimetry. Western blot technique was used to detect LAT phosphorylation before and after CD59 antibody crosslinking. Results it was observed under confocal microscope that LAT-EGFP increased after cross-linking of CD59 antibody from scattered distribution to cluster distribution. The proliferation ability of Jurkat cells stimulated by CD59 antibody cross-linking was increased. The results showed that the phosphorylation level of LAT was increased after cross-linking of CD59 antibody. Conclusion Antibody crosslinked CD59 can make LAT enter lipid raft and enhance T cell signal transduction.
【作者單位】: 青島大學(xué)醫(yī)學(xué)院免疫學(xué)教研室;
【基金】:國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81273206)
【分類號】:R392.11

【參考文獻(xiàn)】

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【共引文獻(xiàn)】

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【二級參考文獻(xiàn)】

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本文編號:1800466


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